一种二肽分子及其制备方法和应用_2

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纯化好的目标二肤溶液放入冻干机中进行浓缩,冻干成白色粉末。
[0035] 实施例2二肤对小鼠耳廓肿胀程度的影响,抗炎消肿镇痛的作用
[0036] 取昆明种小鼠,雌雄各半,体重25-30g,按样品量随机分组:每组10只。 HY01-HY24(250mg/kg) (2mg/ml)、蔡了美丽(250mg/kg)、生理盐水对照组 0).Iml/lOg)粗提 物剂量均折算为原动物生药剂量(下同)。各组均经口灌胃给药,对照组经口灌胃生理盐 水。各组每天灌胃1次,连续4d,末次灌胃化后,尾静脉注射Evan'Sblue50mg/kg,于 小鼠右耳双面涂二甲苯2加1/面,2化后,拉颈处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用直径 7. 5mm的打孔器分别在双耳同一部位打下圆耳片,电子天平称重,求出重量差,用W表示 肿胀度(肿胀度=左耳耳片重-右耳耳片重)。按W下公式计算肿胀抑制百分率。
[0037] 抑制率(%) =(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度 *100%。
[0038] 表1
[0039]
[0040]
[0041] 试验分析;二肤分别进行二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验,观察其是否具有抑制作 用。二甲苯诱导的小鼠耳片水肿为急性非特异性的炎症模型,所导致的急性炎症改变包括 血管扩张、毛细血管通透性增加、渗出等。从试验结果看二肤对抑制小鼠的急性炎症效果良 好,结果具有统计学意义。
[0042] 实施例3二肤对醋酸致小鼠扭体反应的影响,镇痛作用
[0043] 取昆明种小鼠,雌雄各半,体重25-30g,随机分组,二肤给药组(250mg/kg)、对照 组5 %阿斯匹林可溶性淀粉溶液(250mg/kg)、生理盐水组。给药组和生理盐水组末次灌胃 化后,分别腹腔注射0. 6%冰醋酸,各组在给致痛剂0. 2ml后观察15min内各组由醋酸引 起的扭体次数,凡超过15min不扭体者按无扭体反应对待。
[0044] 表 2
[0045]
[0046] 结果表明,二肤组能有效减轻小鼠醋酸性腹腔疼痛反应。
[0047] 实施例4二肤对皮肤烧伤的试验
[004引 1、实验材料
[004引 1. 1样品;按实施例1制得样品二肤。
[0050] 1. 2实验动物;18-22gKM小鼠,320只,雌雄各半。
[0051] 1. 3实验试剂;氯化钢注射液、湿润烧伤膏(灿头市美宝制药有限公司)。
[0052] 2、皮肤创面修复功能评价方法
[0053] 2. 1对小鼠实验性烫伤的影响
[0054] 160只KM小鼠按性别与体重随机分为16组,10只/组(详见表1),试验时将小 鼠右后足妬部位置于预先调至55C恒温水浴中15砂,此后每隔半小时各组小鼠分别于右 足妬部涂药1次,共给药3次,4. 5小时后将小鼠脱颈椎处死,于同一部位剪下两足妬部,用 精密扭力天平称重,W每鼠右足重减去左足重量为肿胀度并计算肿胀抑制率。
[00巧]2. 2对小鼠实验性烧伤的影响
[0056] 将中间挖空2cmX2cm的石棉纸置于小鼠背上,用微量移液器吸取IOOuL无水己醇 滴于20mg棉球上,置于暴露处,点火燃烧造成II度烧伤模型。按性别与烧伤面积随机分组, 10只/组。各组分别涂药,连续涂15山Bid,末次给药后用数码相机拍照,用IPP5. 1图像分 析软件包测量各组动物烧伤面积。
[0057] 3、皮肤创面修复功能评价结果
[0058] 3. 1样品对小鼠实验性烫伤的影响
[005引表3样品对小鼠实验性烫伤的影响U ±SD,>
[0060]
[0061] 注;*:P<0. 05与对照组比较
[0062] 结果显示,二肤对热水烫伤致小鼠足妬的肿胀度有不同程度的降低,与对照组比 较均有明显差异(P<〇. 05),提示二肤对烫伤有较好的保护作用。
[0063] 3. 2样品对小鼠实验性烧伤的影响
[0064] 表4样品对小鼠实验性烧伤的影响侣±巧)
[0065]
[006引 注:与模型组比较冲<0. 05
[0067] 结果显示,与对照组比较,给药15天,二肤组小鼠的创面结麻面积均明显减少 (P<0. 05)。
[0068] 3. 3功能评价结果由上述实验结果表明:二肤对烧烫伤所致皮肤创面均有修复作 用。
[0069] 实施例5二肤对胃溃瘍的治疗作用
[0070] 1、实验材料
[00川 1. 1样品;按实施例1制得样品二肤。
[0072] 1. 2实验动物;KM小鼠,18~22g,160只,雌雄各半。SD大鼠,200~220g,204只, 雌雄各半。
[0073] 1. 3实验试剂;盐酸雷尼替了胶囊、达喜(铅碳酸镇片)。
[0074]2、样品对胃溃瘍粘膜的保护功能评价方法 [00巧]2. 1无水己醇致小鼠胃粘膜损伤模型试验
[007引160只KM小鼠按性别与体重随机分组,10只/组(详见表5),各组给予相应的药 物,连续8天,第7天给药后禁食2地,自由饮水,末次给药后比,所有动物均ig无水己醇 0. 2ml/只,1小时后处死动物,结扎幽口,1 %甲醒固定,观察并评定溃瘍指数(标准;条索状 损伤的长度大于Imm者,测定其长度,每毫米计1分,其宽度大于Imm者计分加倍,长度与宽 度均小于1mm,计0. 5分,将计分相加即为该鼠的溃瘍指数)并计算溃瘍抑制百分率。
[0077] 2. 2己酸致大鼠慢性胃溃瘍模型试验
[0078] 除假手术组(12只),其余大鼠采用10 %醋酸按0. 05ml/只平刺于胃浆膜下 0.4-0. 5mm造模。术后造模大鼠进一步分组(详见表6),并于第2日开始给药,每日1次, 给药14天,末日给药后禁食禁水一夜后处死动物。W游标卡尺测定溃瘍最大长径及垂直于 最大长径的最大宽径。计算溃瘍指数(溃瘍指数=溃瘍最大长径X垂直于最大长径的最 大宽径)及溃瘍抑制率。
[0079]3、样品对胃溃瘍粘膜的保护功能评价结果
[0080] 3. 1样品对无水己醇致小鼠胃粘膜损伤的影响
[00引]表5样品对无水己醇致小鼠胃粘膜损伤的影响巧±洗?
[0082]
[0083] 注;*:P<0. 05与对照组比较
[0084] 结果显示,与对照组比较,二肤可使无水己醇致小鼠胃粘膜损伤的溃瘍指数明显 降低(P<〇. 05),提示二肤对无水己醇致胃粘膜损伤有较好的保护作用。
[0085] 3. 2样品对己酸致大鼠慢性胃溃瘍模型的影响
[008引表6样品对己酸致大鼠慢性胃溃瘍模型的影响巧±猫)
[0087]
[008引注:与模型组比较冲<0. 05
[0089] 由上表显示,模型组的溃瘍指数与假手术组有差异(P< 0. 05);二肤的溃瘍指数 与模型组比较有明显改善(P< 0. 05)。
[0090] 3. 3功能评价结果由上述实验结果表明:二肤对急、慢性胃溃瘍的黏膜具有修复 作用。
[0091] 实施例6二肤提高机体的免疫机能 [009引 1、实验材料
[009引样品;按实施例1制得的样品。
[0094] 实验动物;质量为18~22gSPF级雄性BALB/C小鼠,雄性,随机分组进行实验。
[009引实验方法;将小鼠飞随机分为正常组、模型组、阳性组及样品二肤剂量组,每组10 只。将样品配成0. 5mg/ml受试液后给小鼠灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,阳性 组按20血Ag给予黄茂精,每天ig-次,连续14天。在给药第1、2、3、8、9、10,除正常组外, 其余各组小鼠ip50mL/kg环磯腺巧,共6次,诱导免疫功能低下模型。
[0096] 2、提高免疫力功能评价方法
[0097] 通过实验前后免疫低下小鼠免疫器官指数:胸腺指数、脾指数、肝指数和吞瞻指 数、吞瞻系数,用分光光度法测定小鼠血清中溶血素水平。
[0098] 3、增强免疫力功能评价结果
[0099] 3. 1对免疫低下小鼠免疫器官指数的影响
[0100] 表7对免疫低下小鼠免疫器官指数的影响
[010引注*表示与正常组相比P<
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