个糖环单元计)。
[0069] 上述含碘多糖通过如下步骤合成：将淀粉(Amylose, 2g, 12. 3mmolAGU)和溴 化锂（2g)在氮气保护条件下加入到50mLDMF中，加热到90°C，使其完全溶解，冷却，室温 下加入DMAP(与2, 4, 6-三碘苯甲酰氯等量)和不同量的2, 4, 6-三碘苯甲酰氯（1. 23~49. 2 臟〇1，即2,4,6-三碘苯甲酰氯与淀粉六61]摩尔量的比为0.1~4)的01^溶液50 1^，在1001€ 反应5小时，甲醇沉淀；产物反复用DMS0溶解，甲醇中沉淀多次，最终在在水中沉淀，透析， 冻干得白色粉末状含碘多糖。经测试，淀粉2, 4, 6-三碘苯甲酸酯中2, 4, 6-三碘苯甲酰基 的接枝度随着2, 4, 6-三碘苯甲酰氯的投料量增加而增加，为8~300,按每100糖环计。当 投料比为0. 1时，含碘多糖接枝度为8 (按每100糖环计)，碘含量最低，为15% ;当投料比为 4时，含碘多糖接枝度为300 (按每100糖环计)，碘含量最高，为71% ;从而此含碘多糖碘含 量为 15~71%。
[0070] 实施例7 淀粉2, 4, 6-三碘苯甲酸酯，由实施例6制备，选取其中2, 4, 6-三碘苯甲酰基的接枝度 为20(按每100个糖环单元计)的产物用于制备CT造影剂。此接枝度含碘多糖为使用3. 08 mmol的2, 4, 6-三碘苯甲酰氯(投料比为0. 25)反应时得到产物，其碘含量经测定为34%。 [0071] 将上述含碘多糖以2mg/mL的浓度溶解在DMS0中，然后在搅拌下缓慢滴加到纯水 中，透析除去有机溶剂，高速离心浓缩，即得。
[0072] 经测试，此纳米粒子CT造影剂碘浓度为50mgl/mL，含碘纳米粒子粒径为250nm。
[0073] 实施例8 普兰多糖2, 4, 6-三碘苯甲酸酯，由实施例4制备，选取其中2, 4, 6-三碘苯甲酰基的接 枝度为90 (按每100个糖环单元计）的产物用于制备CT造影剂。此接枝度含碘多糖为使 用12. 30mmol的2, 4, 6-三碘苯甲酰氯(投料比为1)反应时得到产物，其碘含量经测定为 58% 〇
[0074] 将上述含碘多糖以50mg/mL的浓度溶解在DMS0中，然后在搅拌下缓慢滴加到纯 水中，透析除去有机溶剂，高速离心浓缩，即得。
[0075] 经测试，此纳米粒子CT造影剂碘浓度为150mgl/mL，含碘纳米粒子粒径为40nm。
[0076] 实施例9 葡聚糖2, 3, 5-三碘苯甲酸酯，由实施例1制备，选取其中2, 3, 5-三碘苯甲酰基的接枝 度为150 (按每100个糖环单元计）的产物用于制备CT造影剂。此接枝度含碘多糖为使用 24. 60mmol的2, 4, 6-三碘苯甲酰氯(投料比为2)反应时得到产物，其碘含量经测定为65%。
[0077] 将上述含碘多糖以10mg/mL的浓度溶解在DMAc中，然后在搅拌下缓慢滴加到纯 水中，透析除去有机溶剂，高速离心浓缩，即得。
[0078] 经测试，此纳米粒子CT造影剂碘浓度为110mgl/mL，含碘纳米粒子粒径为120 nm〇
[0079] 图2为本实施例含碘纳米粒子的透射电镜（TEM)照片。
[0080] 实施例10 含碘多糖纳米粒子CT造影剂，由实施例9制备，其中含碘纳米粒子粒径为120nm，CT造影剂碘浓度为110mgl/mL。
[0081] 将上述含碘多糖纳米粒子CT造影剂取约0.5mL放入2mL的压盖塑料离心管中， 使用Micro-CT仪器进行测试（Nano-X/CT,TriFoilImaging,USA)，实验条件如下：球管 电压65kVp，管电流0.123mA，探测器大小77μm;螺距0.4mm，前置铝滤波器厚度为 0. 5mm。测试结果表明在此条件下其CT值为2991 ±234HU，并且其CT值和其所含的碘的 含量应具有的CT值对应。
[0082] 图3为本实施例中含碘多糖纳米粒子CT造影剂在Micro-CT机器上测试的体外造 影效果和纯水的对比图。
【主权项】
1. 一种含碘多糖，其特征在于，其分子结构以亲水性的天然多糖为骨架，结构通式如下 所示：其中，R基选自氢或衍生化的三碘苯甲酰基，且R不全为氢；所述衍生化的三碘苯甲酰 基的结构式为：其中，R'基选自氢、甲基、甲氨基、乙酰氨基、Ν' -甲基氨甲酰基、甲氧基乙酰氨基、 N-甲基乙酰氨基或烷基中的一种或两种。2. 根据权利要求1所述的含碘多糖，其特征在于，所述天然多糖为葡聚糖、普兰多糖、 淀粉、壳聚糖或裂褶菌素。3. 根据权利要求1所述的含碘多糖，其特征在于，所述衍生化的三碘苯甲酰基为 2, 3, 5-三碘苯甲酰基、4-甲基-6-乙酰氨基-2, 3, 5-三碘苯甲酰基、4-甲氨基-6-甲氧基乙 酰氨基-2, 3, 5-三碘苯甲酰基、2, 4, 6-三碘苯甲酰基、3, 5-二甲氨基-2, 4, 6-三碘苯甲酰 基、3- (Ν' -甲基氨甲酰基）-5- (Ν-甲基乙酰氨基）-2, 4, 6-三碘苯甲酰基或3-甲基-5-正 庚基-2, 4, 6-三碘苯甲酰基。4. 根据权利要求1所述的含碘多糖，其特征在于，所述多糖分子上衍生化三碘苯甲酰 基的接枝度为8~300,上述接枝度按每100个糖环单元计。5. 权利要求1~4任一项所述含碘多糖的合成方法，其特征在于，采用酰氯酯化法，具体 为：将所述天然多糖在氮气保护条件下加热到90°C，使其完全溶解于溶剂中，冷却，室温下 加入衍生化的三碘苯甲酰氯和缚酸剂，反应一段时间后，纯化得到含碘多糖；所述衍生化的 三碘苯甲酰氯的用量为天然多糖糖环单元摩尔量的0. 1~4倍。6. 权利要求1~4任一项所述含碘多糖的合成方法，其特征在于，采用DCC缩合酯化法， 具体为：将所述天然多糖溶解到有机溶剂中，加入4-二甲氨基吡啶、衍生化的三碘苯甲酸 后再加入Ν，Ν' -二环己基碳二亚胺，室温搅拌反应，纯化后得到含碘多糖；所述衍生化的三 碘苯甲酸、Ν，Ν' -二环己基碳二亚胺的用量均为天然多糖糖环单元摩尔量的0. 1~4倍。7. 权利要求1~4任一项所述含碘多糖的合成方法，其特征在于，采用CDI缩合酯化法， 具体为：将衍生化的三碘苯甲酸溶解到有机溶剂中，加入Ν，Ν' -羰基二咪挫，60°C反应4小 时后室温继续反应20小时，得到咪唑酰胺中间体；再将所述天然多糖溶解到有机溶剂中， 加入到咪唑酰胺中间体溶液中，室温搅拌反应24小时，纯化后得到含碘多糖；所述衍生化 的三碘苯甲酸、Ν，Ν' -羰基二咪唑的用量相等，且均为多糖糖环摩尔量的0. 1~4倍。8. 权利要求1~4任一项所述含碘多糖在制备含碘纳米粒子CT造影剂中的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于，将所述含碘多糖以2~50 mg/mL的浓度 溶解到有机溶剂中，搅拌条件下滴加到纯水中，透析除去有机溶剂，离心浓缩后即得所述CT 造影剂。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述含碘多糖的接枝度为20~150,上述 接枝度按每100个糖环单元计。
【专利摘要】本发明公开了一种含碘多糖，其特征在于，其分子结构以亲水性的天然多糖为骨架，结构通式如下所示：？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？其中，R基选自氢或衍生化的三碘苯甲酰基，且R不全为氢；衍生化的三碘苯甲酰基的结构式为：其中，R’？基选自氢、甲基、甲氨基、乙酰氨基、N’-甲基氨甲酰基、甲氧基乙酰氨基、N-甲基乙酰氨基或烷基中的一种或两种。本发明中的高取代含碘多糖相对于含碘小分子，其突出优点是含碘小分子被高分子化后，细胞毒性大大降低，而且不存在由扩散导致的小分子泄露问题；此外，本发明的CT造影剂碘含量高、造影效果好、细胞毒性低，能够作为一种血池造影剂用于临床CT检查和诊断。
【IPC分类】C08B37/00, A61K49/04, C08B37/08, C08B31/04, C08B37/02
【公开号】CN105348410
【申请号】CN201510929052
【发明人】张超, 井一涵, 杨明亮, 谢妍, 洪国斌, 蒋庆
【申请人】中山大学
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月14日