一种2-丁亚砜-1,4-萘醌的制备方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及一种1，4_萘醌的制备方法。
【背景技术】
[0002] 随着癌症发病率的逐年增加，对肿瘤的发病原因和机理以及抗癌药物的研发等方 面取得了一定进展，但是仍然有许多问题需要解决。寻找高效、安全的抗肿瘤新药已成为研 究热点。近年来，萘醌类化合物的抗癌、抗炎、抗菌和抗病毒等多种生理活性备受国内外研 究者关注。
[0003] 但是天然萘醌类化合物大都存在于植物中，仅从植物中提取和分离萘醌类化合物 远远不能满足研究和应用需求，人工合成或仿生合成已成为重要途径之一。另外，对萘醌类 化合物结构上的改造会降低毒副作用的同时也大大降低了其抗癌的活性，因此寻找新的结 构修饰点，在保留原结构抗癌活性的基础上最大限度的提高其抗癌效果，降低其毒副作用、 提高其对癌细胞的选择性是合成新型萘醌类衍生物的关键，同时改变传统合成路线过长、 反应条件苛刻、反应产率低、原料不易得、试剂昂贵、试剂毒性富过强等诸多弊端，建立一个 适合大量合成萘醌类衍生物，且反应路线简洁产率高的新的合成路线，大量生产高效低毒 的萘醌类衍生物具有广阔的应用前景和重要意义。
【发明内容】
[0004] 为了解决【背景技术】中的问题，本发明提供一种2-丁亚砜-1，4-萘醌的制备方法，采 用此法合成的2-丁亚砜-1,4-萘醌化合物抗癌效果好，毒副作用低，对癌细胞的选择性高， 同时合成反应温度低、易于控制、操作简单、方法成熟。
[0005] 为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案是： 一种2-丁亚砜-l，4-萘醌的制备方法，具体按照以下步骤进行： (1) 2-丁巯基-1，4-萘醌的合成 在反应容器中加入1，4_萘醌和甲醇，甲醇的量满足充分溶解1，4_萘醌即可，二者混合 均匀后加入1-丁硫醇，1-丁硫醇与1，4_萘醌的摩尔比为1.5:1，室温下反应3-5小时后，向反 应容器中加入重铬酸钠和浓硫酸，重铬酸钠与1，4-萘醌的摩尔比为1:5,浓硫酸与1，4-萘醌 的摩尔比为3:4，继续反应5-10分钟;然后用二氯甲烧和饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥， 过滤，浓缩至干燥，得2-丁巯基-1，4-萘醌； (2) 2-丁亚砜-1，4_萘醌的合成 在反应瓶中，加入步骤（1)产物2-丁巯基-1，4-萘醌和氯仿，氯仿的量满足充分溶解2-丁巯基-1，4-萘醌即可，继续加入3-氯过氧苯甲酸，3-氯过氧苯甲酸与2-丁巯基-1，4-萘醌 的摩尔比为1.2:1，0°C温度下反应1.5-2.5小时，反应完全后加入5% NaHCO3溶液中和反应 中过剩的3-氯过氧苯甲酸后终止反应;反应产物经二氯甲烷和饱和食盐水萃取，无水硫酸 钠干燥，过滤，浓缩至干燥，得2-丁亚砜-1，4-萘醌。
[0006] 本发明的有益效果:本发明制备方法的合成路线简单，反应温度低，得到的2-丁亚 砜-I，4-萘醌产物，抗癌效果明显，而且对癌细胞的选择性高。
【附图说明】
[0007]图1是BSNQ对人肝癌Hep3B细胞的杀伤作用。
[0008]图2是BSNQ对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用。
[0009]图3是BSNQ对人肝癌Huh7细胞的杀伤作用。
[0010]图4A是用BSNQ处理Hep3B细胞后，利用荧光显微镜观察细胞凋亡情况图。
[0011]图4B是图4A的定量分析图。
[0012]图5A是用BSNQ处理Hep3B细胞后，利用流式细胞术检测细胞凋亡情况图。
[0013]图5B是图5A的定量分析图。
[0014] 图6A是用BSNQ处理HepG2细胞后，利用荧光显微镜观察细胞凋亡情况图。
[0015] 图6B是图5A的定量分析图。
[0016]图7A是用BSNQ处理Huh7细胞后，利用荧光显微镜观察细胞凋亡情况图。
[0017] 图7B是图7A的定量分析图。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体的实施例、实验例及附图对本发明做进一步的说明： 实施例1 米用下述步骤制备2-丁亚讽-1，4_蔡醒： (1) 2-丁巯基-1，4-萘醌的合成 在100 ml反应瓶中，加入1,4-萘醌158.15 mg (I mmol)和甲醇30 ml，混合均勾后加入 1_丁硫醇166 μL (1.5 mmol)，室温下反应4小时后，向混合物中加入重络酸钠59.6 mg (0.2 mmol)和浓硫酸40.8 μL (0.75 mmol)，反应5-10分钟后结束。经二氯甲烷和饱和食盐 水萃取，适量无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩至干燥，得粗品，经TLC制备，得2-丁巯基-1，4-萘 醌； (2) 2-丁亚讽-1，4_蔡醒的合成(BSNQ) 在50 ml反应瓶中，加入上述产物2-丁疏基-1,4-萘醌246.32 mg (Immol)和氯仿20 ml，缓缓加入3-氯过氧苯甲酸(MCPBA)276.1 mg (1.2 mmol)，0°C温度下反应两个小时，反 应完全后加入5% NaHCO3溶液，终止反应。经二氯甲烧和饱和食盐水萃取，无水硫酸钠干燥， 过滤，浓缩至干燥，得粗品，经TLC制备，得到2-丁亚砜-1，4-萘醌。
[0019] 实验例 一、BSNQ对癌细胞的杀伤作用 实验方法：（MTT实验） ① 接种细胞:用含10%胎小牛血清的培养液配成单个细胞悬液，以每孔10000个细胞接 种到96孔板，每孔体积为200 μL; ② 培养细胞:5% CO2，37°C孵育24 h，至细胞单层铺满孔底； ③ 血清饥饿:加药2 h以前换培养液(含1% FBS的培养液）； ④ 药物处理:将制备出的BSNQ分别取终浓度为0，1，3，10，30，40，50，60、70、80、100 μΜ 处理人肝癌H印3B、!fepG2和Huh7细胞24 h; ⑤ 呈色反应:每孔加 MTT溶液(5 mg/ml，用I3BS配制，pH 7.4)20 μL。继续孵育2-4 h后， 小心吸弃孔内培养上清液，小心用I3BS洗涤2次，然后每孔加100 μL二甲基亚砜(DMSO)，震 荡1 〇分钟，使结晶充分溶解； ⑥ 比色:选择490 nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间 为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长柱状图，结果见图1 -图3及表1。
[0020]结果分析： 在图1 -图3中可以看出BSNQ(IC5t): 1.40 μΜ)对人肝癌Hep3B、HepG2和Huh7都具有良 好的杀伤能力，其杀伤强度随药物浓度的增加而逐渐升高。
[0021 ] 由下表1也可以看出，BSNQ(IC5t): 1.40 μΜ)对人肝癌Hep3B、HepG2和Huh7都具有良 好的杀伤能力，其杀伤强度随药物浓度的增加而逐渐升高。
[0022]表1 BSNQ对人肝癌细胞杀伤作用的1(：50值
二、BSNQ对癌细胞的凋亡作用 实验方法：（体外实验-Annexin-V染色法） ① 接种细胞:用