1.一种检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒由包被有3A9单克隆抗体的多孔板、辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体4C12。
2.根据权利要求1所述的检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒，其特征在于：所述多孔板每孔包被3A9单克隆抗体浓度为2.0-200.0μg/mL。
3.根据权利要求1所述的检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括显色底物3'.3'.5，5'-四甲基联苯胺。
4.根据权利要求2所述的检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒，其特征在于：所述多孔板每孔包被3A9单克隆抗体的用量为100μL，浓度为10.0μg/mL。
5.根据权利要求1所述的检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒，其特征在于：所述辣根过氧化物酶标记单克隆抗体4C12的制备方法的步骤为,
1）按常规方法制备小鼠腹水单克隆抗体4C12，用正辛酸一饱和硫酸铵法提纯小鼠腹水单克隆抗体4C12，以BCA蛋白浓度测定试剂盒检测得单克隆抗体4C12的浓度为 4.34mg/mL，单克隆抗体4C12放置于-20℃环境下 保存备用；
2)称取5mg辣根过氧化物酶溶解于1ml蒸馏水中；
3)将步骤2）获得的溶液加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液，冰浴下避光搅拌15分钟；
4)将步骤3）获得的溶液装入透析袋中，用1mM pH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4小时换液一次，期间换液3-5次；
5)在步骤4）获得的溶液中加入20μl 0.2M pH9.5碳酸盐缓冲液，使以上醛化HRP的pH升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG，冰浴避光搅拌2小时；
6)将步骤5）获得的溶液加入0.1ml 浓度为4mg/ml NaBH4液，混匀，再在4℃环境下放置2小时；
7)将步骤6）获得的溶液装入透析袋中，用0.15M pH7.4 PBS透析，4小时换液一次，期间换液3-5次；
8)将步骤7）获得的溶液在冰浴搅拌下逐滴缓慢加入等体积饱和硫酸铵，置于4℃环境下 2小时；
9)将步骤8）获得的溶液放入离心管内，用离心机3000rpm离心30min，弃去上清，沉淀用半饱和硫酸铵洗1-2次，最后沉淀物溶于0.15M pH7.4的PBS中；
10)将步骤9）得到的溶液装入透析袋中，用0.15M pH7.4的PBS缓冲盐水透析，祛除铵离子后，12000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，即酶标4C12，酶标4C12分装后冰冻保存。
6.一种检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒的制备方法，其特征在于，其制备步骤如下：
（1）制备包被有3A9单克隆抗体的多孔板
用碳酸盐缓冲液制成的包被液将3A9单克隆抗体稀释为浓度10.0μg/mL的稀释液，所述包被液由Na2CO3 1.59 g、NaHCO3 2.93 g，加双蒸水定容至1000 mL制成，其在4 ℃条件下保存，然后将所述3A9单克隆抗体稀释液加入多孔板的各孔内，置于4℃环境下包被12小时-24小时，包被时间届满后，将质量浓度5%的脱脂奶粉溶液加入多孔板的各孔内，并在37℃进行封闭反应，封闭反应时间至少1小时-1.5小时，封闭反应结束后，用洗涤缓冲液洗涤多孔板，当多孔板上的未反应物被去除后即获得包被有3A9单克隆抗体的多孔板，其保存温度为4℃；
（2）制备辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体4C12
按常规方法：用杂交瘤细胞制备小鼠腹水单克隆抗体4C12，用正辛酸一饱和硫酸铵法提纯，以BCA蛋白浓度测定试剂盒检测得单克隆抗体4C12的浓度为 4.34mg/mL，单克隆抗体至-20℃ 保存备用；
（3）按常规方法配备显色底物3'.3'.5，5'-四甲基联苯胺；
（4）配备洗涤缓冲液，洗涤缓冲液由以下成分组成：NaCl 8.0 g，KH2PO4 0.2 g， KCl 0.2 g，Na2HPO4·12H2O 3.58 g，Tween-20 0.5 mL，加双蒸水定容至1000 mL即制成洗涤缓冲液；
（5）按常规方法将洗涤缓冲液分装到20ML消毒过的玻璃瓶，辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体4C12和显色底物分别分装到环氧树脂小试管管内，然后与制备包被有3A9单克隆抗体的多孔板一起组合成试剂盒；
所述辣根过氧化物酶标记4C12步骤如下：
步骤1）称取5mg辣根过氧化物酶溶解于1ml蒸馏水中；
步骤2）于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液，冰浴下避光搅拌15分钟；
步骤3）将上述溶液装入透析袋中，用1mM pH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4小时换液一次， 期间换液3-5次；
步骤4）加20μl 0.2M pH9.5碳酸盐缓冲液，使以上醛化辣根过氧化物酶的pH值升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG，冰浴避光搅拌2小时；
步骤5）加0.1ml新配的4mg/ml NaBH4液，混匀，再置4℃2小时；
步骤6）将上述液装入透析袋中，用0.15M pH7.4 PBS透析，4小时换液一次， 期间换液3-5次；
步骤7）在冰浴搅拌下逐滴缓慢加入等体积饱和硫酸铵，置于4℃ 环境下2小时；
步骤8）将步骤7）获得的溶液置于4℃ 环境下2小时的溶液置于离心管内用离心机在3000rpm条件下离心30min，弃去上清，沉淀用半饱和硫酸铵洗1-2次，将沉淀物溶于0.15M pH7.4的PBS中；
步骤9）将步骤8）得到的溶液装入透析袋中，用0.15M pH7.4的PBS缓冲盐水透析，去除铵离子后，12000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，即酶标4C12，使用时，用磷酸盐缓冲液作1：1600倍稀释。
7.根据权利要求6所述的一种检测无乳链球菌的双抗体夹心酶联免疫吸附测定试剂盒的制备方法，其特征在于：所述制备包被有3A9单克隆抗体的多孔板时，所述3A9单克隆抗体稀释液的加入量为100µL/孔，所述辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体4C12稀释液的加入量为100µL/孔，所述质量浓度5%的脱脂奶粉溶液的加入量为100µL/孔。