用于细胞检测的试剂盒和方法与流程

文档序号:12286882阅读:来源:国知局

技术特征:

1. 一种器械,其包括:

壳体,所述壳体被构造成能移除地联接到反应室,所述壳体限定构造成接收试剂容器的试剂体积,所述壳体包括穿刺件,所述穿刺件限定与所述试剂体积流体连通的转移路径,所述壳体包括输送部分,所述输送部分在所述壳体联接到所述反应室时限定所述转移路径和所述反应室之间的输送路径;以及

致动器,所述致动器具有安置在所述试剂体积内的柱塞部分,所述致动器的接合部分被构造成被操纵以在所述试剂体积内移动所述柱塞部分以使所述试剂容器变形,所述穿刺件被构造成刺穿所述试剂容器的易破部分,以将试剂从所述试剂容器经由所述转移路径和所述输送路径传送到所述反应室中。

2.根据权利要求1所述的器械,其中,所述转移路径垂直于所述试剂容器的所述易破部分。

3.根据权利要求1所述的器械,其中,所述穿刺件限定与所述试剂体积和所述输送路径流体连通的多个转移路径,所述转移路径是所述多个转移路径中的一个。

4.根据权利要求1所述的器械,其中,所述穿刺件和所述壳体整体地构造。

5.根据权利要求1所述的器械,其中,所述输送路径的一部分部分地环绕所述穿刺件。

6.根据权利要求1所述的器械,其中,所述输送路径的离开部分限定与所述反应室的侧壁相交的离开轴线。

7. 根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包括环绕所述易破部分的裙部,所述裙部和所述输送部分的表面形成基本上流体密闭的密封;以及

锁定构件,所述锁定构件被构造成在所述试剂容器变形时限制所述裙部相对于所述壳体的运动,以维持在所述裙部和所述表面之间的所述基本上流体密闭的密封。

8.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包括环绕所述易破部分的裙部,所述裙部的第一部分和所述输送部分的第一表面形成基本上流体密闭的密封,所述裙部的第二部分被构造成接合所述壳体的保持部分,以在所述试剂容器变形时限制所述裙部相对于所述壳体的运动。

9.根据权利要求1所述的器械,其中,所述致动器的所述柱塞部分和所述壳体的一部分共同地限定密封,以将所述试剂体积与所述壳体外的体积流体地隔离。

10.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包含多个转导颗粒。

11.根据权利要求11所述的器械,其中,所述多个转导颗粒被改造成不能裂解性复制。

12.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包含试剂,所述试剂被配制成与样本中的多个报告分子反应以增强信号的产生。

13.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包含营养物、抗生素、裂解试剂或消毒试剂中的至少一者。

14.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

安置在所述试剂体积内的所述试剂容器,所述试剂容器包含十三醛。

15.根据权利要求1所述的器械,其还包括:

具有逐渐变细的侧壁的所述反应室,

所述输送路径的离开部分限定离开轴线,所述离开轴线与所述反应室的所述逐渐变细的侧壁相交。

16.一种器械,其包括:

壳体,所述壳体被构造成能移除地联接到反应室,所述壳体限定试剂体积,所述壳体包括限定输送路径的输送部分,在所述壳体联接到所述反应室时,所述输送路径将所述试剂体积置放成与所述反应室流体连通,所述输送部分包括与所述输送路径流体连通的穿刺件;

试剂容器,所述试剂容器安置在所述壳体的所述试剂体积内,所述试剂容器包含试剂,所述试剂容器包括易破部分和环绕所述易破部分的裙部;

致动器,所述致动器具有安置在所述试剂体积内的柱塞部分,所述致动器被构造成被操纵以在所述试剂体积内移动所述柱塞部分以使所述试剂容器从第一构造变形到第二构造,所述穿刺件被构造成在所述试剂容器处于所述第二构造时,刺穿所述试剂容器的所述易破部分以将试剂从所述试剂容器经由所述输送路径传送到所述反应室中;以及

锁定构件,所述锁定构件被构造成在所述试剂容器处于所述第二构造时,维持所述裙部与所述壳体的所述输送部分的肩部相接触,以维持在所述裙部和所述肩部之间的基本上流体密闭的密封。

17.根据权利要求16所述的器械,其中,所述穿刺件限定多个转移路径,所述转移路径被构造成在所述试剂容器处于所述第二构造时,将所述反应室置放成与所述输送路径流体连通。

18.根据权利要求16所述的器械,其中,所述输送路径的一部分部分地环绕所述穿刺件。

19.根据权利要求16所述的器械,其还包括:

具有逐渐变细的侧壁的所述反应室,

所述输送路径的离开部分限定离开轴线,所述离开轴线与所述反应室的所述逐渐变细的侧壁相交。

20.根据权利要求16所述的器械,其中,处于所述第二构造的所述试剂容器的体积小于处于所述第一构造的所述试剂容器的体积的大约百分之五。

21.根据权利要求16所述的器械,其中,所述试剂容器包含多个转导颗粒。

22.根据权利要求16所述的器械,其中,所述试剂容器包含试剂,所述试剂被配制成与样本中的多个报告分子反应以增强信号的产生。

23.一种器械,其包括:

壳体,所述壳体被构造成能移除地联接到反应室,所述壳体限定试剂体积,所述壳体包括限定输送路径的输送部分,在所述壳体联接到所述反应室时,所述输送路径将所述试剂体积置放成与所述反应室流体连通,所述输送部分包括与所述输送路径流体连通的穿刺件;

试剂容器,所述试剂容器安置在所述壳体的所述试剂体积内,所述试剂容器包含试剂,所述试剂容器包括接触部分、易破部分和环绕所述易破部分的裙部;以及

致动器,所述致动器具有安置在所述试剂体积内的柱塞部分,所述柱塞部分对应于所述试剂容器的所述接触部分或所述穿刺件中的至少一者,所述致动器被构造成被操纵以在所述试剂体积内移动所述柱塞部分,使得所述柱塞部分接合所述试剂容器的所述接触部分,以使所述试剂容器从第一构造变形到第二构造,在所述试剂容器处于所述第二构造时,所述穿刺件刺穿所述试剂容器的所述易破部分,以将试剂从所述试剂容器经由所述输送路径传送到所述反应室中。

24. 根据权利要求23所述的器械,其中:

所述试剂容器的所述接触部分环绕所述穿刺件;以及

所述致动器的所述柱塞部分限定与所述穿刺件对准的开口。

25.根据权利要求20所述的器械,其中:

所述致动器的所述柱塞部分的形状对应于所述试剂容器的所述接触部分的形状。

26.根据权利要求23所述的器械,其中,所述柱塞部分具有弯曲形状,其被构造成配合地接合所述试剂容器的所述接触部分的弯曲形状。

27.根据权利要求23所述的器械,其中:

所述输送部分包括表面和肩部,所述穿刺件从所述表面延伸,所述表面被构造成在所述试剂容器处于所述第二构造时,接收所述试剂容器的至少所述易破部分,所述肩部环绕所述表面。

28.根据权利要求23所述的器械,其还包括:

锁定构件,所述锁定构件被构造成在所述试剂容器处于所述第二构造时,维持所述裙部与所述壳体的所述输送部分的所述肩部相接触,以维持在所述裙部和所述肩部之间的基本上流体密闭的密封。

29.一种方法,其包括:

将样本安置到反应室中,所述反应室被包装以包含试剂,所述试剂被配制成与所述样本混合以形成化验培养基;

将与细胞表型相关联的多个转导颗粒与所述反应室中的所述样本混合,所述多个转导颗粒被改造成包括核酸分子,所述核酸分子被配制成导致所述细胞表型产生能够生成能检测信号的多个报告分子,所述试剂被配制成抑制在所述细胞表型的一部分中的所述能检测信号;

接收与所述试剂相关联的第一信号;

在所述第一信号指示存在所述试剂时,维持所述样本和所述多个转导颗粒,以在所述细胞表型存在于所述样本中时,表达所述多个报告分子;以及

接收与所述多个报告分子的量相关联的第二信号。

30.根据权利要求29所述的方法,其中,所述试剂是干燥试剂。

31.根据权利要求29所述的方法,其中,所述试剂粘附到所述反应室的内表面。

32.根据权利要求29所述的方法,其中,所述细胞表型的所述部分包括对个别地或与另一抗生素组合的抗生素有抗性的细菌表型。

33.根据权利要求32所述的方法,其中,所述抗生素是下述中的任一者:β-内酰胺、超广谱β-内酰胺、氨基糖甙类、安沙霉素类、碳头孢烯类、碳青霉烯类,任一代头孢菌素、糖肽类、林可酰胺类、脂肽类、大环内酯类、单菌胺类、硝基呋喃类、恶唑烷酮类、青霉素类、多肽、喹诺酮类、氟喹诺酮类、磺酰胺类、四环素类、分枝杆菌抗生素、氯霉素、莫匹罗星。

34.根据权利要求29所述的方法,其中,所述细胞表型的所述部分包括对下述中的至少一者有抗性的细菌表型:头孢西丁、万古霉素、替考拉丁、氨苄青霉素/舒巴坦、环丙沙星、美罗培南、头孢他啶、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、或庆大霉素。

35. 根据权利要求29所述的方法,其中:

所述试剂包括抗生素和着色剂,所述抗生素被配制成抑制在所述细胞表型的所述部分中产生所述多个报告分子;以及

所述第一信号与所述着色剂相关联。

36.根据权利要求29所述的方法,其中,所述第一信号与在所述反应室内的所述化验培养基的体积相关联。

37.根据权利要求29所述的方法,其中,所述第二信号的幅值独立于高于预定量的所述多个转导颗粒的量。

38.根据权利要求29所述的方法,其中,所述多个转导颗粒被改造成不能进行裂解性复制或溶原复制中的任一者。

39.根据权利要求29所述的方法,其中,所述多个转导颗粒源自噬菌体。

40.根据权利要求29所述的方法,其还包括:

将物质安置到所述样本中,所述物质被配制成与所述多个报告分子反应,以生成所述第二信号。

41.一种方法,其包括:

接收包含拭子和运送培养基的容器,所述拭子包括轴,所述轴具有由非卷绕材料构造的收集部分,所述运送培养基包括从所述收集部分释放的样本;

将所述运送培养基和所述样本转移到反应室中;

使与目标细胞相关联的多个转导颗粒与所述反应室中的所述运送培养基混合,所述多个转导颗粒被改造成包括核酸分子,所述核酸分子被配制成导致所述目标细胞产生多个报告分子;

在所述目标细胞存在于所述样本中时,将所述运送培养基和所述多个转导颗粒的所述混合物在至少20℃的温度维持大约八小时或更短的时段,以表达所述多个报告分子;以及

接收与所述多个报告分子的量相关联的信号。

42.根据权利要求41所述的方法,其中,所述多个转导颗粒是非复制型。

43.根据权利要求41所述的方法,其中,所述多个转导颗粒没有所述多个报告分子中的报告分子。

44.根据权利要求41所述的方法,其中,来自所述多个报告分子中的报告分子是下述中的任一者:细菌荧光素酶、真核荧光素酶、荧光蛋白质、适用于比色法检测的酶、适用于免疫检测的蛋白质、适用于免疫检测的肽或起着适体的作用或表现出酶活性的核酸。

45.根据权利要求41所述的方法,其中,所述维持执行大约两个小时或更短的时段。

46.根据权利要求41所述的方法,其中,所述收集部分由泡沫材料构造。

47.根据权利要求41所述的方法,其中:

所述反应室包含配制成与所述运送培养基混合的低压冻干试剂药片,所述低压冻干试剂药片包括抗生素。

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