技术特征：
1.一种快速检测杂交瘤细胞分泌抗体的方法，其特征在于，展现杂交瘤细胞中的抗体fc段于细胞质中，对胞质中fc段进行分析，判断抗体特异性及细胞产生抗体的能力。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、待检细胞中加入蛋白转运抑制剂使细胞分泌的抗体滞留于细胞内；s2、对步骤s1中的细胞进行破膜和抗体固定；s3、步骤s2中的抗体与二抗进行反应；s4、向步骤s3反应后的体系中加入缓冲液，流式细胞仪进行检测。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤s1中蛋白转运抑制剂为布雷非得菌素a、莫能菌素中的一种或多种。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶抑制剂溶于rpmi-10％完全培养液；所述的蛋白酶抑制剂与rpmi-10％完全培养液的比例为1：10-1：1000。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤s1中的待检细胞为cd22[10f.4.4.1]、cd22[5e8.1.8]、cd3[sk7]中的一种或多种。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤s2中破膜的方法为加入cytofix/cytoperm。7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤s3中的二抗为大鼠抗小鼠igg、山羊抗小鼠igg或兔抗小鼠igg中的一种或多种。8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤s4中的缓冲液为perm/wash缓冲液。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的步骤s4中的perm/wash缓冲液首先用于清洗，其次用于重悬。10.一种快速检测杂交瘤细胞分泌抗体的试剂盒，其特征在于，包括：蛋白转运抑制剂、细胞破膜剂、与待检细胞分泌抗体反应的二抗、缓冲液。
技术总结
一种快速检测杂交瘤细胞分泌抗体的方法，包括：展现杂交瘤细胞中的抗体Fc段于细胞质中，对胞质中Fc段进行分析，判断抗体特异性及细胞产生抗体的能力。本发明提供的方法使一些在细胞内表达的抗体和杂交瘤细胞中分泌抗体细胞占总细胞数的阳性率占比可以直观的检测出来。可以检测每一个单克隆细胞分泌抗体能力的高低和杂交瘤细胞表面的非特异性成分的高低。低。低。
技术研发人员：张洋 褚建达 张娅
受保护的技术使用者：浙江正熙生物技术股份有限公司
技术研发日：2022.01.18
技术公布日：2022/5/17