01PC。
[0033] 所述步骤⑶中生物胺的检测，在本发明的一种实施方式中，是先制备不同已 知浓度的生物胺样品，然后分别样液点在活化薄层层析板上，吹干，用氯仿一苯一三乙胺 (6:4:1)，展开后，再用苯一丙酮一三乙胺（6:4:1)展开，吹干，碘蒸汽显色，在岛津双波长 飞点薄层扫描仪CS-9301PC参比波长360nm，样品波长254nm条件下对色谱板进行扫描得到 每个斑点的吸光值，然后计算得到进行生物胺浓度与吸光值之间的线性方程，然后将待测 样品的生物胺净化液点在活化薄层层析板上，经同样处理，得到斑点的吸光值，再根据线性 方程计算得到生物胺的浓度。
[0034] 所述步骤⑶中生物胺的检测，在本发明的一种实施方式中，是将生物胺净化液 点在活化的薄层层析板上，采用二次展开技术，两种展开系统。
[0035] 所述两种不同展开系统，第一种是氯仿一苯一三乙胺、氯仿一三乙胺中的一种；第 二种系统是苯一丙酮一三乙胺、乙醚一丙酮一三乙胺中的一种。
[0036] 所述方法，在本发明的一种实施方式中，其涉及的化学品和标准品满足GB/ T5009. 208-2008 的标准。
[0037] 本发明的第二个目的是提供一种薄层层析板，所述薄层层析板通过以下方法制 备：对硅胶进行环氧基、氨基、醛基的活化，使硅胶依次接上环氧基、氨基和醛基，然后将活 化好的硅胶介质分别进行调浆，铺板和层析板活化制得活化薄层层析板。
[0038] 所述薄层层析板的制备中，环氧基的活化条件是：以体积比1:0.5-1:2的 0. 4-1. 2mol/LNaOH溶液与DMSO的混合液作为混合溶剂，震荡，活化温度为30-40°C，活化 时间8-14h，环氧氯丙烷、双环氧乙烷、苯氧基环氧丙烷或二一（环氧丙基）一邻苯并咪唑 酮的用量为2-10mL/g硅胶。所述氨基活化的条件：以质量分数为5% -15%的氨水、氯胺、 乙二胺或双氯胺作为活化液系，震荡，活化温度为32-38°C，活化时间8-14h，5 % -15 %的氨 水、氯胺、乙二胺或双氯胺的用量为15-30ml/g硅胶。所述醛基活化的条件：以6-12g/L的 邻苯二甲醛、戊二醛、乙二醛或己二醛作为活化液系，震荡，活化温度为26-32°C，活化时间 15-45min，6-12g/L的邻苯二甲醛、戊二醛、乙二醛或己二醛的用量为5-12ml/g硅胶。
[0039] 所述薄层层析板的制备中，层析板活化，在本发明的一种实施方式中，是将铺板后 的薄层层析板放入充满保护气体的装置中进行层析板活化，活化后迅速放入装有变性硅胶 干燥剂的装置中备用。
[0040] 所述薄层层析板可以用于生物胺的快速检测。也可以用于其他带有氨基的小分子 物质的检测。
[0041] 本发明的有益效果具体如下：
[0042] (1)将衍生剂在活化时直接固定于介质之上，样品提取净化后无需做衍生处理，稀 释至标定范围内可直接点样展开，进行测定，简便、快速。
[0043] (2)本发明方法中制备得到的薄层层析板，由于通过相关基团的活化最后接上醛 基，理论上还可以检测其他能够与醛基发生反应的物质，比如氨基酸等；本薄层层析板可以 在低温、干燥条件下长期保存；只要按照上述操作步骤进行严格操作可以保证层析板的稳 定性。可制成商业化产品，随时用于样品检测，制备过程加以氮气保护，有利于保护薄层层 析板上醛基的活性，从而保证薄层层析板的功效。相对于传统的生物胺检测方法，能够显著 缩短检测时间。食品中生物胺检测的国标使用的是HPLC法，其检测时间为45min，而本薄层 层析板使用岛津双波长飞点薄层扫描仪CS-9301PC进行定性定量检测只需3-5min，因此相 比国标检测时间缩短了近40min。
[0044] (3)本方法用于生物胺检测，无需昂贵的分析仪器，费用低，操作简便、快捷，对生 物胺的分离度很好、重复性好，可对食品中生物胺的定性与半定量测定，检测限能够达到ng 级别，方便可靠，完全能够满足现场快速检测的需要，可有效降低监控成本，提高我国食品 中生物胺的监测水平，保障人民群众的身体健康。
【附图说明】
[0045] 图1 :标样薄层层析图谱；其中1:色胺（TRY)，2:腐胺（PUT)，3:尸胺（CAD)，4:亚 精胺（sro)，5:组胺（HIS)，6:精胺（SPM)，7:酪胺（TYR)，8: β-苯乙胺（PHE);
[0046] 图2 :半干型黄酒样品薄层层析图谱；其中1:色胺（TRY)，2:腐胺（PUT)，3:尸胺 (CAD)，4:亚精胺（SH))，5:组胺（HIS)，6:精胺（SPM)，7:酪胺（TYR)，8: β -苯乙胺（PHE)。
【具体实施方式】
[0047] 实施例1 :活化硅胶的制备
[0048] 准确称取IOg 200-300目的德国默克公司进口硅胶，先用50ml DMSO制成悬浮 液，再加入20ml环氧氯丙烷，摇匀；准确称取I. 6g氢氧化钠，用IOOml去离子水溶解制成 0. 4mol/L NaOH溶液；最后将100ml 0.4mol/L NaOH溶液加入到上述硅胶活化液中；将此硅 胶活化体系放入30°C，转速180rpm的恒温摇床反应8h，活化完成后，滤去液系，并用大量去 离子水洗涤介质，直至滤出液pH小于8。
[0049] 取浓度为25%的氨水30mL，去离子水120mL，混合配制成5 %氨水作为活化液系； 准确称取环氧基活化硅胶IOg置于250ml三角烧瓶中，加入150mL 10 %氨水，在恒温摇床 180rpm，活化温度为32°C，活化时间8h，活化完成后，滤去液系，并用大量去离子水洗涤介 质，直至滤出液pH小于8。
[0050] 准确称取6g邻苯二甲醛，用IOOOml的无水乙醇溶解，定容，配制成6g/L邻苯二甲 醛活化液系；准确称取氨基活化硅胶IOg置于250ml三角烧瓶中，加入60ml邻苯二甲醛溶 液，于26 °C，200rpm摇床反应15分钟。
[0051] 实施例2:活化硅胶的制备
[0052] 准确称取IOg 100-200目的国产硅胶，先用125ml DMSO制成悬浮液，再加入60ml 苯氧基环氧丙烷，摇匀；准确称取3. 2g氢氧化钠，用IOOml去离子水溶解制成0. 8mol/ LNaOH溶液；最后将IOOml 0. 8m〇l/LNa〇H溶液加入到上述硅胶活化液中；将此硅胶活化体 系放入35°C，转速180rpm的恒温摇床反应llh，活化完成后，滤去液系，并用大量去离子水 洗绦介质，直至滤出液pH小于8。
[0053] 取浓度为25%的氯胺90mL，去离子水135mL，混合配制成10 %氯胺作为活化液系； 准确称取环氧基活化硅胶IOg置于500ml三角烧瓶中，加入225mL 10%氯胺，在恒温摇床 180rpm，活化温度为35°C，活化时间llh，活化完成后，滤去液系，并用大量去离子水洗涤介 质，直至滤出液pH小于8。
[0054] 准确称取9g邻苯二甲醛，用IOOOml的无水乙醇溶解，定容，配制成9g/L邻苯二甲 醛活化液系；准确称取氨基活化硅胶IOg置于250ml三角烧瓶中，加入90ml邻苯二甲醛溶 液，于29 °C，200rpm摇床反应30分钟。
[0055] 实施例3 :活化硅胶的制备
[0056] 准确称取IOg 200-300目的德国默克公司进口硅胶，先用200ml DMSO制成悬浮 液，再加入IOOml环氧氯丙烷，摇匀；准确称取4. 8g氢氧化钠，用IOOml去离子水溶解制成 1. 2mol/L NaOH溶液；最后将100ml I. 2mol/L NaOH溶液加入到上述硅胶活化液中；将此硅 胶活化体系放入40°C，转速180rpm的恒温摇床反应14h，活化完成后，滤去液系，并用大量 去离子水洗绦介质，直至滤出液pH小于8。
[0057] 取浓度为25%的乙二胺180mL，去离子水120mL，混合配制成15%乙二胺作为活化 液系；准确称取环氧基活化硅胶IOg置于500ml三角烧瓶中，加入300mL 15%乙二胺，在恒 温摇床180rpm，活化温度为38°C，活化时间14h，活化完成后，滤去液系，并用大量去离子水 洗绦介质，直至滤出液pH小于8。
[0058] 准确称取12g戊二醛，用IOOOml的无水乙醇溶解，定容，配制成12g/L戊二醛活化 液系；准确称取氨基活化硅胶IOg置于250ml三角烧瓶中，加入120ml戊二醛溶液，于32 °C， 200rpm摇床反应45分钟。
[0059] 实施例4 :活化薄层层析板的制备
[0060] 将实施例3活化好的200-300目的德国默克公司进口硅胶置于充满氮气的塑料盒 然后于37°C烘箱中干燥Ih ;准确称取干燥活化硅胶10g，向硅胶中加入2. 4g无水硫酸钙， 加入8ml去离子水，使固液1:1混合调成匀浆。调浆时搅动不宜过快，应慢慢搅动，防止气 泡产生。
[0061] 在此条件下调制的匀浆流动性较好，采用倾注法进行铺板。将硅胶倾注在 20 X 20cm的玻璃板一端，然后倾斜玻璃板使其自然流下，后轻轻左右晃动使硅胶流动覆盖 均匀，将铺好的板放入真空干燥器中，真空干燥I. 5h，表面水分完全蒸发后用小刀和直尺将 边缘部分刮去。
[0062] 将铺好的薄层层析板放入充满氮气的塑料盒，然后将塑料盒放入105°C烘箱活化 32min，在活化过程中持续不断的向塑料盒内通入氮气，直至活化完成并冷却至室温，然后 将活化好的平板取出，迅速放入装有变性硅胶干燥剂的塑料箱中备用。
[0063] 氮气作为一种惰性保护气体相对于氦气、氙气、氩气、氪气等其来源容易获得；在 活化硅