一种同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于农药残留检测领域，涉及主流烟气中农药残留量检测技术，特别涉及 卷烟主流烟气中11种常用农药含量的测定方法，具体是检测主流烟气中仲丁灵、多菌灵、吡 虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇。
【背景技术】
[0002] 烟草及烟草制品农药残留量的控制是保证烟草制品吸食安全的重要手段，近年来 倍受人们关注。目前，在烟草生长过程中施用的农药种类主要有杀菌剂、杀虫剂、除草剂和 抑芽剂。烟草种植过程中常用的杀菌剂有霜霉威、多菌灵、甲霜灵、腈菌唑、稻瘟灵、甲基硫 菌灵、三唑醇和三唑酮;常用的杀虫剂有吡虫啉;除草剂有二甲戊灵;仲丁灵为烟用抑芽剂。 鉴于农药残留对卷烟吸食安全性的影响，国际烟草科学研究合作中心（C0RESTA)于2003年 提出对烟草中的99种农药指导性残留限量，并于2013年将指标扩充到120种，以上11种农药 均被列入120名单。除多菌灵外，其他10个指标均被列入中国烟叶公司2015年度烟草上推荐 使用农药名单，在各个烟区都有施用。由于这11种农药的施用广泛性和烟叶的高残留风险， 极有可能迀移到卷烟烟气，而卷烟烟气又直接进入吸烟者体内，从而会严重影响卷烟消费 者的健康。因此准确测定烟气中农药残留量并研究农药烟气迀移率具有十分重要意义。
[0003] 烟叶农药残留量的分析方法报道较多，主要有气相色谱法(GC)、气相色谱-串联质 谱法(GC-MS/MS)和液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)。而烟气中农药残留量的检测方法报道较 少，主要是基于GC或GC-MS法。
【发明内容】
[0004] 鉴于此，本发明目的在于提供一种快速、准确的卷烟主流烟气中11种常用农药含 量的测定方法，该方法可同时测定烟气中仲丁灵，多菌灵，吡虫啉，稻瘟灵，甲霜灵，腈菌唑， 二甲戊灵，霜霉威，甲基硫菌灵，三唑酮和三唑醇。
[0005] 为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种同时测定卷烟主流烟 气常用农药含量的方法，所述常用农药为仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、 二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇，其特征在于，包括以下步骤：
[0006] (1)烟气捕集
[0007] 根据《卷烟：取样》（ISO 8243:2006)来选取样品烟支，按照《烟草和烟草制品调节 和试验用大气》（ISO 3402 :1999)来平衡烟支；采用《常规分析卷烟吸烟机.定义和标准条 件》(IS0 3308:2000)来捕集迀移到主流烟气中的农药，每个滤片抽吸5支烟，捕集器后接预 先加入乙腈和内标的吸收瓶来捕集气相物;捕集烟气后的滤片放入50mL旋盖离心管中，1张 滤片/管，并用1/4空白滤片搽干净捕集器上的烟气粒相物，一并加入旋盖离心管。
[0008] (2)提取玻璃纤维滤片中的目标物：
[0009] 将吸收瓶中捕集完烟气气相物的乙腈内标溶液倒入装有滤片的旋盖离心管中，将 离心管置于涡漩混合振荡仪上，第一次涡漩振荡;放入冰箱冷冻后取出，依次加入无水硫酸 镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠，第二次涡旋振荡后离心；
[0010] ⑶N-丙基乙二胺(PSA)纯化：
[0011] 移取上清液于新的离心管中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂，第三次漩涡振荡混 合，然后高速离心;吸取上清液经有机相滤膜过滤，移取滤液，并用超纯水稀释定容后待测；
[0012] (4)标准储备液和标准工作液的配制：
[0013]用乙腈分别配置仲丁灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、三唑 酮和三唑醇标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20Γ保存；用二甲基亚砜分别配制多菌灵 和甲基硫菌灵标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20 °C保存;分别取一定量的农药储备液 于容量瓶进行混合，用乙腈稀释定容，制得Syg/mL混合标准储备液；
[0014] 用乙腈准确配置磷酸三苯酯(TPP)内标标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20°c 保存;取一定量的内标储备液，用乙腈稀释定容，制得lOyg/mL内标标准工作液；内标储备液 和工作液于冰箱-20°C储存，使用前将其恢复到室温；
[0015] 用捕集不含农药的卷烟主流烟气的滤片的萃取基质分别配制不同浓度的仲丁灵、 多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇 标准工作溶液；
[0016] (5)超高效液相色谱-串联质谱测定：
[0017] 吸取空白烟叶溶液和配制好的不同浓度的仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜 灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇标准工作溶液，注入串联质谱 检测器，按内标法以峰面积计算出样品待测液中仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、 腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇含量；
[0018] 选取90 %流动相A和10 %流动相B为初始流动相体系，分析时间为12min，进样量为 2yL;所述流动相A是体积分数为0.1 %的甲酸水溶液，流动相B是体积分数为0.1 %的甲酸甲 醇溶液；
[0019]前述串联质谱检测器采用UPLC-MS/MS系统，选取的色谱柱为UPLC色谱柱： UPLCHSST3，规格为100mmX 2 · 1mm，1 · 8μπι;串联质谱检测的条件为：电喷雾离子源，喷雾电压 (IS):2.6kV;离子化温度350°C ;雾化气流量:800L/Hr;锥孔气流量50L/Hr;碰撞气流量为 0.15ml/min;碰撞气为氩气，其余气体为氮气;驻留时间为30msec，正离子MRM模式采集。
[0020] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (1) 中，捕集过程吸收瓶依次加入的乙腈和内标的体积分别为10mL和20yL。
[0021] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (2) 中，第一次涡旋振荡时长lmin，第一次涡旋振荡的速率为2000rpm;第二次涡旋振荡的速 率为2000rpm，振荡时间为2min，第二次祸旋振荡后离心10min、离心速率为4000rpm。
[0022] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (2)中，冷冻温度为-18°C，冷冻时间lOmin。
[0023] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (2) 中，依次加入的无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠的质量分别为4g、lg、lg 和0.5g。
[0024] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (3) 中，第三次涡旋振荡的速率为2000rpm，振荡时间为2min，第三次漩涡振荡后离心2min、 离心速率为6000rpm。
[0025] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (3)中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂的质量为150mg和25mg。
[0026] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (3)中，移取滤液体积为200yL，加入超纯水定容到lmL。
[0027] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，步骤 (5)中，色谱柱采用梯度洗脱，条件为：0 - 2min，90%A - 50%A;2 - 2.4min，50%A - 30%A; 2.4-4.0min,30%A-20%A；4.0-6.0min,20%A-5%A,6.0-9.8min,5%A-5%A；9.8-10.0min，5%A-90%Α，10·0 -12.0min，90%A-90%A;流动相流速为 0.4mL/min。
[0028] 根据本发明同时测定卷烟主流烟气常用农药含量的方法的一个实施方式，所述步 骤(5)中，测定烟草中仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、 甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇含量的具体操作为：分别吸取空白烟气基质和配制好的不同 浓度的仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三 唑酮和三唑醇标准工作溶液，注入UPLC-MS/MS系统，绘制仲丁灵、多菌灵、吡虫啉、稻瘟灵、 甲霜灵、腈菌唑、二甲戊灵、霜霉威、甲基硫菌灵、三唑酮和三唑醇的线性回归方程，对纯化 稀释后的样品待测液进行测定