一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂及其制备方法与流程

文档序号:22541185发布日期:2020-10-17 02:03阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:包括微生物混合菌剂、植物免疫诱抗剂和叶片提取液,所述叶片提取液为喷淋植物免疫诱抗剂后产生免疫反应的烟草植株的叶片提取液,所述微生物混合菌剂、植物免疫诱抗剂和叶片提取液的质量百分比为微生物混合菌剂5%~10%、植物免疫诱抗剂3%~5%和叶片提取液10%~15%,余量为无菌水。

2.根据权利要求1所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:所述微生物混合菌剂包括解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌,所述解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌的质量比为(2~3):(2~3)。

3.根据权利要求1所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:所述植物免疫诱抗剂为烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液。

4.根据权利要求3所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:还包括表面活性剂,所述表面活性剂为吐温80、有机硅、乙氧基改性聚三硅氧烷或丁二酸二脂磺酸钠。

5.根据权利要求4所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:所述表面活性剂的质量占溶液质量的1%~3%。

6.根据权利要求5所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,其特征在于:所述吐温80的质量百分比为3%,或所述有机硅的质量百分比为2%,或所述乙氧基改性聚三硅氧烷的质量百分比为1%,或所述丁二酸二脂磺酸钠的质量百分比为1.5%。

7.根据权利要求4至6任意一项所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,

s1制备微生物混合菌剂各菌种的种子液,将所述种子液分别进行发酵扩繁,将所述扩繁产物按照配比均匀混合;

s2在烟草花叶病毒溶液中加入乙酸,混匀后静置,离心去除rna沉淀,然后将上清液经过脱盐柱分离,去除乙酸,将所得到的溶液在去离子水中透析12至24h,离心,将所得到的沉淀用磷酸缓冲溶液复溶,得到烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液;

s3使用所述步骤s2中获得的烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液喷淋烟草植株的叶片,待所述烟草植株产生免疫反应后,摘取植株叶片,粉碎后采用水提取法获得提取混合液,然后滤除固体杂质得到叶片提取液;

s4将所述步骤s1至s3中的获得产物按照配比均匀混合,得到混合溶剂;

s5向所述步骤s4中的混合溶剂内按照配比加入表面活性剂,搅拌1至2h即可。

8.根据权利要求7所述的一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂的制备方法,其特征在于:在所述步骤s3中,待向烟草植株的叶片喷淋烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液1至2h后,提取叶片提取液,然后通过离子分离色谱和高效液相色谱的方法,从所述叶片提取液中分离出单一组分,并利用质谱鉴定的方法得到该单一组分的组成,以鉴定所述烟草植株是否产生免疫反应产物。


技术总结
本发明提出了一种防治烟草花叶病毒的微生物制剂,包括微生物混合菌剂、植物免疫诱抗剂和叶片提取液,叶片提取液为喷淋植物免疫诱抗剂后产生免疫反应的烟草植株的叶片提取液,微生物混合菌剂、植物免疫诱抗剂和叶片提取液的质量百分比为微生物混合菌剂5%~10%、植物免疫诱抗剂3%~5%和叶片提取液10%~15%,余量为无菌水,植物免疫诱抗剂为烟草花叶病毒衣壳蛋白溶液;本发明中的植物免疫诱抗剂起到了免疫激发因子的作用,会引发植物免疫系统产生应激性免疫反应,诱导其产生针对于烟草花叶病毒的免疫抗性,同时叶片提取液内含有大量的能够限制病毒增殖的生物化学物质,在植株自身的免疫反应还未完全发挥效力时,起到一定的病毒防治作用。

技术研发人员:徐维烈;周继鑫;詹巧春;杨涛;袁庆丰;汪杰;刘阳;张业成
受保护的技术使用者:武汉合缘绿色生物股份有限公司
技术研发日:2020.06.30
技术公布日:2020.10.16
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