顠体虫高密度培养方法

本发明涉及顠体虫高密度培养领域，特别涉及顠体虫高密度培养方法。


背景技术：

在废水生物处理系统中，往往存在大型的环节动物，如仙女虫、顠体虫等。其中顠体虫不仅有助于改善废水生物处理性能，而且具有高效的剩余污泥减量作用。由于利用微型动物减少剩余污泥量是一种生态的环境友好的方法，这种方法在废水生物处理领域中一直受到了高度的重视。发挥顠体虫在废水生物处理中的作用的关键技术之一是建立在生物处理系统外低成本和高效率的顠体虫培养方法，从而可以通过向废水生物处理系统接种大量培养的顠体虫的方法，即人工干预的方法使顠体虫成为废水生物处理系统中的优势种类。中国专利(cn102499185a)公开了利用超声破碎浸泡后的大米产生的上清液大量培养红斑顠体虫生长繁殖的方法。不过，开创提高顠体虫生长密度和促进顠体虫生长速度的培养方法仍是值得努力的研究题目。有鉴于此，本发明专利要解决的技术问题就是提供一种既能促进顠体虫生长、又能提高顠体虫生长密度的培养方法。


技术实现要素：

发明的目的在于提供顠体虫高密度培养方法，解决了背景技术中的问题。本发明是这样实现的，顠体虫高密度培养方法，该顠体虫高密度培养方法包括以下步骤：a、顠体虫分离纯化；b、小球藻粉作为生长促进剂的顠体虫高密度培养；c、小球藻提取液作为生长促进剂的顠体虫高密度培养。本发明的进一步技术方案是：所述的顠体虫为环节动物门寡毛纲近孔寡毛目体虫科微型动物，包括红斑顠体虫。本发明的进一步技术方案是：所述步骤a中，顠体虫分离纯化的方法为：从废水生物处理装置中采集活性污泥或生物膜样品，吸取适量样品于培养皿中，在显微镜放大倍数为4～20倍下用移液枪将顠体虫从培养皿内的样品中吸出后置于去离子水中，摇晃培养皿10～20次；将培养皿置于实体显微镜下用移液枪将顠体虫从培养皿溶液中吸出后移入其他含有去离子水的培养皿中，摇晃培养皿10～20次；重复上述过程3次，以获得无其他微型动物存在的顠体虫。本发明的进一步技术方案是：所述步骤b中的小球藻粉作为生长促进剂的顠体虫高密度培养方法为：向含有培养液的培养容器中接种所述步骤a中所获得的纯化的顠体虫以及接种从活性污泥中分离纯化的细菌；培养容器为圆罐或水槽，当培养容器的有效容积大于0.5m3时设置搅拌装置，搅拌速度为5～30rpm；用重量比分别为0.1％胰化蛋白胨、0.05％酵母提取物、0.05％氯化钠与99.8％蒸馏水配制成培养液；以小球藻粉为促进顠体
虫繁殖的生长促进剂，小球藻粉的浓度为5～20mg/l、投加频率为1～3次/周；在温度20～28℃、静止或振荡的条件下培养顠体虫。本发明的进一步技术方案是：所述小球藻粉的制备方法如下：通过蒸发的方法干化新鲜培养的小球藻，用研磨机粉碎干燥的小球藻，用100目筛子过筛干燥的小球藻粉，取过筛的小球藻粉为顠体虫生长促进剂。本发明的进一步技术方案是：所述步骤c中的小球藻提取液作为生长促进剂的顠体虫高密度培养方法为：向含有培养液的培养容器中接种步骤a所获得的纯化的顠体虫以及接种从活性污泥中分离纯化的细菌；培养容器为圆罐或水槽，当培养容器的有效容积大于0.5m3时设置搅拌装置，搅拌速度为5～30rpm；用重量比分别为0.1％胰化蛋白胨、0.05％酵母提取物、0.05％氯化钠与99.8％蒸馏水配制成培养液；以小球藻提取液为促进顠体虫繁殖的生长促进剂；小球藻提取液的容积比为0.5％～5％、投加频率为1～3次/周；在温度20～28℃、静止或振荡的条件下培养顠体虫。本发明的进一步技术方案是：所述小球藻提取液的制备方法为：将新鲜培养的小球藻配成1～2g/l的小球藻液；将小球藻粉液于70～90℃下水浴1～2h，用100目以上的筛网或过滤器过滤，滤过液即为小球藻提取液。本发明的有益效果：本发明的顠体虫高密度培养方法具有的显著的优点：1)顠体虫来自于废水生物处理装置中的活性污泥或生物膜，具备快速适应废水环境的能力；2)以小球藻粉和小球藻粉提取液作为顠体虫的促进剂，价格低廉，用量少，不会对废水环境产生较大影响；3)以小球藻粉和小球藻提取液作为生长促进剂，在顠体虫生长繁殖过程中，同时消耗小球藻粉，不造成二次污染。4)在圆罐或水槽等较大培养容器中培养顠体虫，更加接近实际污水处理装置的环境。
附图说明
图1是本发明提供的顠体虫高密度培养方法的投加小球藻粉作为生长促进剂时顠体虫生长曲线；图2是本发明提供的顠体虫高密度培养方法的投加小球藻提取液作为生长促进剂时顠体虫生长曲线。
具体实施方式
实施例一：图1为利用小球藻作生长促进剂达成顠体虫高密度培养方法，按以下步骤进行：顠体虫分离纯化方法：从废水生物处理装置中采集活性污泥或生物膜样品，吸取适量样品于培养皿中，在显微镜放大倍数为20倍下用移液枪将顠体虫从培养皿内的样品中吸出后置于去离子水中，摇晃培养皿15次；将培养皿置于实体显微镜下用移液枪将顠体虫从培养皿溶液中吸出后移入其他含有去离子水的培养皿中，摇晃培养皿15次；重复上述过程3次，以获得无其他微型动物存在的顠体虫。小球藻粉液制备方法：通过蒸发的方法干化新鲜培养的小球藻，用研磨机粉碎干燥的小球藻，用100目筛子过筛干燥的小球藻粉，取过筛的小球藻粉为顠体虫生长促进剂。小球藻粉作为生长促进剂的顠体虫高密度培养方法：向含有培养液的培养容器中
接种纯化的顠体虫以及接种从活性污泥中分离纯化的细菌；培养容器为圆罐，有效容积为0.5m3，搅拌器搅拌速度为25rpm；用重量比分别为0.1％胰化蛋白胨、0.05％酵母提取物、0.05％氯化钠与99.8％蒸馏水配制成培养液；以小球藻粉为促进顠体虫繁殖的生长促进剂，小球藻粉的浓度为10mg/l、投加频率为1～3次/周；在温度25℃、静止条件下培养顠体虫。顠体虫生长繁殖曲线分析：由图1可知，圆罐中添加小球藻粉作为生长促进剂(a组)，圆罐中无生长促进剂(b组)，与未添加小球藻粉的对照组相比，a组从第二天开始，顠体虫数量持续增长且高于对照组，繁殖至第5天种群密度已达180ind/ml，对照组第5天顠体虫的种群密度为120ind/ml，明显少于a组；表明一定范围浓度内的小球藻粉具有明显促进顠体虫生长繁殖的作用。实施例二：图2为利用小球藻提取液作生长促进剂达成顠体虫高密度培养方法，按以下步骤进行：顠体虫分离纯化方法：从废水生物处理装置中采集活性污泥或生物膜样品，吸取适量样品于培养皿中，在显微镜放大倍数为20倍下用移液枪将顠体虫从培养皿内的样品中吸出后置于去离子水中，摇晃培养皿15次；将培养皿置于实体显微镜下用移液枪将顠体虫从培养皿溶液中吸出后移入其他含有去离子水的培养皿中，摇晃培养皿15次；重复上述过程3次，以获得无其他微型动物存在的顠体虫。小球藻提取液制备方法：将新鲜培养的小球藻配成1g/l的小球藻液；将小球藻粉液于75℃下水浴1h，用100目的筛网过滤，滤过液即为小球藻提取液。小球藻提取液作为生长促进剂的顠体虫高密度培养方法：向含有培养液的培养容器中接种纯化的顠体虫以及接种从活性污泥中分离纯化的细菌；培养容器为圆罐，有效容积为0.5m3，搅拌器搅拌速度为25rpm；用重量比分别为0.1％胰化蛋白胨、0.05％酵母提取物、0.05％氯化钠与99.8％蒸馏水配制成培养液；以小球藻提取液为促进顠体虫繁殖的生长促进剂；小球藻提取液的容积比为2％、投加频率为2次/周；在温度25℃、静止的条件下培养顠体虫；
30.顠体虫生长繁殖曲线分析：
31.由图2可知，圆罐中添加小球藻粉作为生长促进剂(a组)，圆罐中无生长促进剂(b组)，与未添加小球藻粉的对照组相比，a组从第二天开始，顠体虫数量持续增长且高于对照组，繁殖至第5天种群密度已达202ind/ml，对照组第5天顠体虫的种群密度为126ind/ml，明显少于a组。表明一定范围浓度内的小球藻提取液具有明显促进顠体虫生长繁殖的作用。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。