1.一种利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:所述培育方法包括有种子的采集与处理、诱导培养、增殖培育、生根培育、炼苗、染色体加倍和移栽、倍性鉴定和利用分子标记检测病毒的脱毒率,具体包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s1步骤中,采集辣椒果实后取出种子,先将种子用40~45℃的清水浸泡2~4天,然后用0.1~0.2%高锰酸钾溶液进行消毒5~8min,再用75~80%的乙醇浸泡8~12s,最后用无菌水冲洗3~5次即可。
3.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s2步骤中,所述诱导培养基选择添加有1~3mg/l三十烷醇、0.05~0.1mg/lkt(激动素)和0.05~0.1mg/l naa(萘乙酸)的ms培养基,其中ms培养基包含有质量浓度为3%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。
4.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s3步骤中,所述增殖培养基选择添加有2~4mg/l2 ,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)、0.5~1mg/l 6-ba(6-苄氨基嘌呤)和0.05~0.1mg/l naa(萘乙酸)的ms培养基,其中ms培养基包含有质量浓度为3%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。
5.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s3步骤中,所述继代培养的方法是将长出的嫩芽剪下转入至增殖培养基中,在温度为25±1℃,光照时长8~12h/d,光照强度2800~3500lx条件下的光照培养箱中进行继代培养2~4次,至获得继代培养组织,其中,每次继代培养的时间为7~10天。
6.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s4步骤中,所述生根培养基选择添加有0.5~1mg/liba(吲哚丁酸)和1.0~1.5mg/liaa(吲哚乙酸)的1/2ms培养基,其中1/2ms培养基包含有质量浓度为1.5%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。
7.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s5步骤中,所述染色体加倍处理为将炼苗5~7天后的小苗取出,清洗根部的培养基,用浓度为0.2~0.4%的秋水仙素浸泡根系36小时,进行染色体加倍。
8.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s6步骤中,所述倍性鉴定采用流式细胞仪,以正常二倍体辣椒为对照,剔除单倍体和多倍体植株。
9.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述步骤s7中,利用分子标记的正反向引物进行pcr扩增反应时,其中所述正向引物的核苷酸序列为:5’-ctgtgatatggaaggggaacc-3’,而所述反向引物的核苷酸序列为5’-aactcgctgggaaaagaatg-3’。
10.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:其中所述诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均在121℃温度下灭菌30分钟,并在灭菌前调整其ph值为5.6~5.8。