一种利用分子标记的辣椒快速培育方法

文档序号:34860789发布日期:2023-07-23 07:30阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:所述培育方法包括有种子的采集与处理、诱导培养、增殖培育、生根培育、炼苗、染色体加倍和移栽、倍性鉴定和利用分子标记检测病毒的脱毒率,具体包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s1步骤中,采集辣椒果实后取出种子,先将种子用40~45℃的清水浸泡2~4天,然后用0.1~0.2%高锰酸钾溶液进行消毒5~8min,再用75~80%的乙醇浸泡8~12s,最后用无菌水冲洗3~5次即可。

3.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s2步骤中,所述诱导培养基选择添加有1~3mg/l三十烷醇、0.05~0.1mg/lkt(激动素)和0.05~0.1mg/l naa(萘乙酸)的ms培养基,其中ms培养基包含有质量浓度为3%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。

4.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s3步骤中,所述增殖培养基选择添加有2~4mg/l2 ,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)、0.5~1mg/l 6-ba(6-苄氨基嘌呤)和0.05~0.1mg/l naa(萘乙酸)的ms培养基,其中ms培养基包含有质量浓度为3%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。

5.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s3步骤中,所述继代培养的方法是将长出的嫩芽剪下转入至增殖培养基中,在温度为25±1℃,光照时长8~12h/d,光照强度2800~3500lx条件下的光照培养箱中进行继代培养2~4次,至获得继代培养组织,其中,每次继代培养的时间为7~10天。

6.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s4步骤中,所述生根培养基选择添加有0.5~1mg/liba(吲哚丁酸)和1.0~1.5mg/liaa(吲哚乙酸)的1/2ms培养基,其中1/2ms培养基包含有质量浓度为1.5%的蔗糖,质量浓度为6g/l的琼脂。

7.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s5步骤中,所述染色体加倍处理为将炼苗5~7天后的小苗取出,清洗根部的培养基,用浓度为0.2~0.4%的秋水仙素浸泡根系36小时,进行染色体加倍。

8.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述s6步骤中,所述倍性鉴定采用流式细胞仪,以正常二倍体辣椒为对照,剔除单倍体和多倍体植株。

9.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:在所述步骤s7中,利用分子标记的正反向引物进行pcr扩增反应时,其中所述正向引物的核苷酸序列为:5’-ctgtgatatggaaggggaacc-3’,而所述反向引物的核苷酸序列为5’-aactcgctgggaaaagaatg-3’。

10.根据权利要求1所述的利用分子标记的辣椒快速培育方法,其特征在于:其中所述诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均在121℃温度下灭菌30分钟,并在灭菌前调整其ph值为5.6~5.8。


技术总结
本发明公开了一种利用分子标记的辣椒快速培育方法,所述培育方法包括有种子的采集与处理、诱导培养、增殖培育、生根培育、炼苗、染色体加倍和移栽、倍性鉴定和利用分子标记检测病毒的脱毒率。采用本发明所述的培育方法,不受季节、温度和地域影响,培育大量的无菌苗,有效提升辣椒的生长发育速度,提升辣椒的产量,改善种植栽培的效益,极具市场竞争力,同时,通过在短期内繁殖大量种苗,利用分子标记,筛选出符合目标要求的纯合植株,为辣椒种质资源创制提供数据支撑,另外,通过对辣椒无菌繁殖体系的建立,为后续研究辣椒主要风味物质的分析和鉴定,以及辣椒风味的遗传解析及辣椒风味改良的分子育种提供理论基础和技术支持,具有十分重要意义。

技术研发人员:覃成,罗希榕,李靖,李唐燕,陀海燕,辛晏竹
受保护的技术使用者:遵义职业技术学院
技术研发日:
技术公布日:2024/1/13
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