一种慢阻肺炎症大鼠模型的建立方法及其应用

文档序号:37543283发布日期:2024-04-08 13:44阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种慢阻肺炎症大鼠模型的建立方法,以研究六味补气方在治疗慢阻肺上的医药用途和药理作用,六味补气方中的中药为人参、黄芪、益智仁、玉竹、陈皮和肉桂,其特征在于:包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的建立方法,其特征在于:所述步骤二中复制copd肺气虚证大鼠模型的具体操作方法为;

3.根据权利要求1-2任意一项所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:通过六味补气方调控copd炎症免疫网络的关联分子机制,包括以下方面:

4.根据权利要求3所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:所述大鼠宏观情况检测分析,结合证候要素观察六味补气方对各组大鼠进食情况、毛发、呼吸、体重、大小便等临床表征、大鼠肺功能检测、he染色及透射电镜观察肺组织病理等,明确六味补气方对应的干预作用。

5.根据权利要求3所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:所述肺-肠轴微生态群检测,取大鼠肺泡灌洗液和肠道内容物用于提取dna,经dna的完整性检验后,取合格样品进行16srdna扩增、测序,分析生物多样性,并结合宏基因组高通量测序技术,进行cog、kegg等功能注释分析,明确肺-肠轴特定微生态群移植和六味补气方对copd肺-肠轴微生态群的调节特征。

6.根据权利要求3所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:所述免疫细胞群及细胞因子检测,采用单细胞测序结合空间转录组技术分析大鼠肺泡灌洗液样本和肺组织及肠道组织中的免疫细胞群,筛选组间差异免疫细胞群,分析大鼠肺泡灌洗液的免疫细胞群改变及其差异转录本,采用elisa技术检测外周血及肺泡灌洗液中细胞因子的表达,明确六味补气方对copd肺部免疫细胞群的调控作用,并联合wgcna分析获取关联靶微生态群与免疫细胞群的关键分子与通路,以阐明六味补气方调控肺-肠轴特定菌群与炎症免疫改善的相关性。

7.根据权利要求3所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:所述关键代谢通路分子检测,采用qpcr技术检测大鼠肺组织中关键通路代谢分子转录水平的表达;采用westernblot结合免疫组化技术检测大鼠肺组织中关键蛋白的表达,了解六味补气方对所靶向关键代谢通路分子表达的影响及组织定位。

8.根据权利要求3所述的一种慢阻肺炎症大鼠模型的应用,其特征在于:所述针对单细胞测序研究所得的结果进行相关分析,包括以下方面:


技术总结
本发明提供一种慢阻肺炎症大鼠模型的建立方法,以研究六味补气方在治疗慢阻肺上的医药用途和药理作用,六味补气方中的中药为人参、黄芪、益智仁、玉竹、陈皮和肉桂。本申请通过六味补气方对应调控COPD炎症免疫网络的关联分子机制和调控肺‑肠微生态轴与炎症免疫网络的关联分子机制,为六味补气方的辨证施治策略提供依据。以重大疾病中医优势阶段的高发证候为切入点,立足临床需求,在前期临床研宄的基础上,运用scRNA‑seq、CBA、宏基因组等多种技术方法从调控COPD肺肾气虚证大鼠肺部免疫微环境和肺泡巨噬细胞极化的角度探讨六味补气方通过调控肺部微生态,改善气道免疫炎症的分子机制,并通过体外实验进一步研究与验证了其作用机制作用。

技术研发人员:童佳兵,李泽庚,韩明向,杨程,高雅婷,朱洁,方莉,童祥丽,杨勤军,王新汝
受保护的技术使用者:安徽中医药大学第一附属医院(安徽省中医院)
技术研发日:
技术公布日:2024/4/7
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