使用配备了恒温 器的水浴加热至70 °C。
[0125] 2?测量并记录温度。
[0126] 3.将称重的样品引入到水（NaCl溶液，0. 9% )中，并且立刻开始测量时间。
[0127] 4.精确地5分钟后，从水浴中取出玻璃烧杯并将其冷却降至40°C。
[0128] 5.使用振荡器将经微胶囊化的细菌粒料的样品彻底溶解大约0.25小时至4小时， 这取决于热敏感的形成凝胶的包衣层的质量增加。
[0129] 6.进行计数测试并计算CFU/gr。
[0130] 用于对照样品的步驟
[0131] 1.准确测量10克益生菌样品（根据本发明的经微胶囊化的细菌粒料或未经微胶 囊化的细菌）。
[0132] 2.将称重的样品在室温分散到100ml水（NaCl溶液，0? 9% )中。
[0133] 3.使用振荡器将经微胶囊化的细菌粒料的样品彻底溶解大约0.25小时至4小时， 这取决于热敏感的形成凝胶的包衣层的质量增加。
[0134] 4.进行计数测试并计算CFU/gr。
[0135]实例 4
[0136] 在婴儿奶中的热祗抗测试方法
[0137] 配制品悬浮液
[0138] Jii
[0139] 评估根据本发明的经微胶囊化的细菌的生存率。该测试通过以下方式进行：将经 微胶囊化的细菌粒料的样品分散到70°C的婴儿奶配制品悬浮液中，持续5分钟。
[0140] 该方法的原理
[0141] 1.将经微胶囊化的益生菌粒料的样品以颗粒分散在70°C的婴儿奶配制品悬浮液 中，持续5分钟。
[0142] 2. 5分钟后，将婴儿奶配制品悬浮液冷却降至40°C以下。
[0143] 3.振荡该婴儿奶配制品悬浮液，以便溶解经微胶囊化的益生菌粒料。
[0144] 4.进行计数测试，以便确定在该样品中每克细菌含量中的菌落形成单位（CFU/ g)〇
[0145] 用于对照样品的步驟
[0146] 1.将210ml水加热至70°C，并且置入烧瓶中。
[0147] 2.将样品与婴儿奶粉末的混合粉末分散到该烧瓶中。
[0148] 3.密闭该烧瓶，垂直旋转，上下摇晃30次。
[0149] 4.将奶冷却，将烧瓶在室温放置，直到奶温度为37°C(缓慢冷却）；时间估计： 30min〇
[0150] 5.进行计数测试并计算CFU/gr。
[0151] 制备样品与婴儿奶粉末的混合粉末
[0152] 混合粉末I，3. 2g样品与28. 8g婴儿奶粉末，
[0153] 混合粉末II，9. 6g样品与22. 4g婴儿奶粉末，
[0154] 混合粉末III，16g样品与16g婴儿奶粉末。
[0155]实例 5
[0156] 方法-微胶囊化讨稈和配制品
[0157] 首先，使用InnojetVentilus包衣机，将经干燥益生菌粉末、麦芽糊精与一种在纯 水中的羟丙基甲基淀粉（HPS)(测试2、3和5-8)或羟丙基甲基纤维素（HPC)(测试4)的溶 液进行颗粒化。然后使用如下表所示的在纯水中的HPC(测试4)或HPS或HPS与乙酰化磷 酸双淀粉（ADSP)组合的溶液将得到的颗粒包衣。随后在纯水中的粉末状婴儿配方（PIF) 分散液中针对抗热性测试（存活测试）来测试所得到的微胶囊。
[0158]
[0159]
[0160] 粉末状婴儿配方（PIF)分散液的存活测试方法
[0161] 用于短双歧杆菌（B.Breve)在PIF中的生存率的测试方法是改编自由WHO与 联合国FA0发布的新指南（世界卫生组织，粉末状婴儿配方的安全制备、存储和加工，指 南 2007(WorldHealthOrganization.SafePreparation,StorageandHandlingof PowderedInfantFormula.Guidelines2007))。通常，通过将之前制备的经微胶囊化的细 菌粒料样品与PIF的混合物在不同温度下分散在一个塑料婴儿瓶中的一定体积的纯化预 热水中来进行该测试。然后将瓶子盖上并且不断地连续上下摇晃，持续不同时间段。接着 通过允许将PIF分散液置于室温来冷却至37°C。随后在分散液的整个体积上进行计数测试 以测定细菌在PIF分散液中的CFU。
[0162] 测试1-6的结果
[0163] 不同的微胶囊化配制品相比于原样短双歧杆菌（未微胶囊化的）的计数测试的结 果示于下表。
[0164]
[0165] 测试7和8的结果
[0166] 对于具有不同包衣层厚度的两个批次在40°C和70°C下（在Aptamil中5分钟） 的CFU/g细菌的结果总结于下表中。
[0167]测试 7 (批次#l3-〇359_0134+_B)
[0168]
[0169]
[0170] ND-未测定
[0171] 测试 8(批次 #13-0387-0134+_B)
[0172]
[0173] 尽管本发明在一些特定实例方面已经进行说明，很多修改和变体是可能的。因此， 应该理解在所附的权利要求范围内，除了如特定说明的之外，本发明可以被实现。
【主权项】
1. 一种用于制备抵抗热和潮湿的益生菌的组合物，这些益生菌处于稳定的益生菌颗粒 形式，用于基于液体的婴儿食品，该组合物包含： i) 核心颗粒，包含益生菌、至少一种基质、以及任选地其他食物级成分； ii) 包衣所述核心颗粒的至少一个层，包含一种基于淀粉的聚合物。2. 如权利要求1所述的组合物，其中该基于淀粉的聚合物包括选自下组的组分，该组 由以下各项组成：天然淀粉、热塑性淀粉、改性淀粉、淀粉衍生物、部分预凝胶化淀粉以及预 凝胶化淀粉；和/或角叉菜胶、瓜尔胶和角豆胶（又称刺槐豆胶）中的一种或多种；或其组 合。3. 如权利要求2所述的组合物，其中该改性淀粉包括以下的一种或多种：酸处理淀 粉（E1401)、碱处理淀粉（E1402)、漂白淀粉（E1403)、氧化淀粉（E1404)、淀粉、酶处理淀 粉（E1405)、磷酸单淀粉（E1410)、甘油双淀粉（E1411)、用三偏磷酸钠酯化的磷酸双淀粉 (E1412)、磷酸化的磷酸双淀粉（E1413)、乙酰化磷酸双淀粉（E1414)、用醋酸酐酯化的醋酸 淀粉（E1420)、用醋酸乙烯酯酯化的醋酸淀粉（E1421)、乙酰化己二酸双淀粉（E1422)、乙酰 化甘油双淀粉（E1423)、羟丙基淀粉（E1440)、磷酸羟丙基双淀粉（E1442)、羟丙基甘油双淀 粉（E1443)、以及辛烯基琥珀酸淀粉钠（E1450)。4. 如权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中该基于淀粉的聚合物选自下组，该组 由以下各项组成：羟丙基淀粉、磷酸化的磷酸双淀粉和乙酰化磷酸双淀粉。5. 如权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中这些核心被两层包衣，一个内层和一 个外层。6. 如权利要求5所述的组合物，其中该外层在比该内层高的温度下变得可溶。7. 如权利要求6所述的组合物，其中该外层任选地在70°C下变成粘性凝胶，而该内层 在70 °C下可溶。8. 如权利要求6所述的组合物，其中，在该内层和该外层变得可溶的温度之间存在至 少5°C、至少10°C、至少15°C、至少20°C、至少25°C、或至少30°C的差异。9. 如权利要求6-8中任一项所述的组合物，其中在一个特定层变得可溶的每个温度 下，溶解在至少30秒、1分钟、2分钟、3分钟、4分钟或5分钟后发生。10. 如权利要求9所述的组合物，其中溶解以两个阶段发生：一个最初凝胶形成阶段和 一个所述凝胶分散阶段，并且其中所述时间段涉及用于两个阶段发生的经过时间。11. 如权利要求6-9中任一项所述的组合物，其中通过形成一种粘性凝胶，该内层和该 外层保护在70°C下处于一种水性介质中的这些益生菌至少30秒、1分钟、2分钟、3分钟、4 分钟或5分钟。12. 如权利要求6-11中任一项所述的组合物，其中该外层在至少30秒、1分钟、2分钟、 3分钟、4分钟或5分钟后溶解于70°C下的一种水性介质中。13. 如权利要求6-12中任一项所述的组合物，其中该内层包含羟丙基淀粉。14. 如权利要求6-13中任一项所述的组合物，其中该外层包含磷酸化的磷酸双淀粉、 乙酰化磷酸双淀粉或其组合。15. -种液体食品，包含含有益生菌、至少一种基质以及任选地其他食品级成分的核心 颗粒；一个包含羟丙基淀粉的内层；以及一个包含磷酸化的磷酸双淀粉、乙酰化磷酸双淀 粉或其组合的外层。16. -种用于制备抵抗热和潮湿的益生菌的方法，这些益生菌处于稳定的益生菌颗粒 形式，用于基于液体的婴儿食品，该方法包括： i) 制备核心颗粒，这些核心颗粒包含益生菌、至少一种基质、以及任选地其他食物级成 分； ii) 通过至少一个包含基于淀粉的聚合物的层包衣所述核心颗粒； 由此获得稳定的益生菌颗粒，用于混合至一种基于液体的婴儿食品中，所述益生菌颗 粒包含抵抗热和抵抗潮湿的益生菌。17. 如权利要求16所述的方法，其中所述基于液体的婴儿食品是一种粉末状婴儿配 方。18. 如权利要求16所述的方法，其中所述基于液体的婴儿食品是一种即用型液体婴儿 配方。19. 如权利要求16-18中任一项所述的方法，进一步包括 i) 将所述稳定的益生菌颗粒混合至含有粉末状婴儿配方的半成品婴儿产品中，由此获 得一种包含稳定益生菌颗粒的益生菌粉末状婴儿配方；并且 ii) 在所述益生菌粉末状婴儿配方的预期消费之前的短时间内，向所述产品加入冷水 并且加热或可替代地加入热水，同时将该混合物在一个预先确定的温度保持一段预先确定 的时间，并且冷却之后消费。20. 如权利要求16-18中任一项所述的方法，进一步包括 i) 将所述稳定的益生菌颗粒混合至一种半成品婴儿食品中，由此获得一种包含稳定益 生菌颗粒的益生菌食品；并且 ii) 在所述益生菌婴儿食品的预期消费之前的短时间内，向所述食品加入冷水并且加 热或可替代地加入热水，同时将该混合物在一个预先确定的温度保持一段预先确定的时 间。21. -种用于制备基于液体的食品的方法，包括一个加热步骤，该产品包含活性益生 菌，该方法包括 i) 制备根据以上权利要求中任一项所述的稳定的益生菌颗粒； ii) 将所述稳定的益生菌颗粒混合至一种半成品婴儿产品中； iii) 将所述益生菌颗粒与所述基于液体的半成品的婴儿产品在一个预先确定的温度 加热，并且持续一段预先确定的时间；并且 iv) 通过冷却所述混合物完成含有所述益生菌颗粒的所述基于液体的婴儿食品，由此 获得含有活性益生菌的所述基于液体的食品。22. 如权利要求15所述的液体食品，其中所述食品是一种粉末状婴儿配方。23. 如权利要求15所述的液体食品，其中所述食品是一种即用型液体婴儿配方。24. 如权利要求15所述的液体食品，其中所述食品是一种液体浓缩婴儿配方。25. 如权利要求16所述的方法，其中通过形成一种粘性凝胶，该内层和该外层保护在 280°F(138°C)下处于一种水性介质中的这些益生菌至少8秒、30秒、1分钟、2分钟、3分 钟、4分钟或5分钟。
【专利摘要】在此披露一种液体食品，包含核心颗粒，这些核心颗粒被含有基于淀粉的聚合物的至少一个层包衣，所述颗粒含有抵抗热和潮湿的益生菌。还披露一种用于制备抵抗热和潮湿的益生菌的组合物，这些益生菌处于稳定的益生菌颗粒形式，用于基于液体的婴儿食品；以及一种用于制备所述组合物的方法。
【IPC分类】A23C9/123, C12R1/225, A23C9/127, C12N1/20
【公开号】CN105228457
【申请号】CN201480029216
【发明人】阿德尔·彭哈西
【申请人】迪格玛斯玛特有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2014年4月19日
【公告号】CA2909466A1, EP2986131A1, US20160081940, WO2014170904A1