>[0023] 所谓"生物负荷"，是指可能存在于乳中的微生物污染物和病原体（通常是活体）， 例如病毒、细菌、霉菌、真菌等。
[0024] 本文引用的全部专利、专利申请和参考文献均全文以引用方式并入本文。除非另 有定义，否则本文使用的科技术语具有与本领域技术人员通常理解的含义相同的含义。
[0025] 人乳脂组合物
[0026] 本文描述的高脂人乳组合物亦称人乳脂组合物是由全脂人乳制成的。在一个实施 例中，该人乳脂组合物含有约2. 0千卡/毫升至约3. 0千卡/毫升或更多。在一个优选的 实施例中，该人乳脂组合物含有约2. 5千卡/毫升。设想到该人乳脂组合物可包含约18% 至约30%或更多的脂肪（即脂质）。在一个实施例中，该人乳脂组合物约含25%的脂肪。
[0027] 设想本文描述的人乳脂组合物可以包含一种或多种附加组分，以使该组合物具有 期望的含热量和/或期望的脂肪百分比。因此，在一个实施例中，该人乳脂组合物包含添加 的人脱脂乳透过液。脱脂乳透过液（"透过液"）是超滤脱脂人乳（传统观念认为脱脂人乳 是制造人乳强化剂过程中生成的废料）得到的液体。在另一个实施例中，该人乳脂组合物 除高脂人乳外还含有去离子（DI)水。
[0028] -般来讲，将该人乳脂组合物冷冻保存和/或运输，在使用前解冻。
[0029] 制作人乳脂组合物的方法
[0030] 本文描述的人乳脂组合物是由全脂人乳制成的。人乳可能来源于婴儿的生母，也 可能来源于一位或多位捐赠者。在某些实施例中，汇集人乳以提供人乳的集合。举例来说， 人乳的集合含有来自两位或更多位（如十位或更多位）捐赠者的乳。又如，人乳的集合含 有来自一位捐赠者的两次或更多次捐赠。
[0031] 获得捐赠者的乳
[0032] -般来讲，人乳是捐赠者提供的。首先会预先筛选捐赠者，符合标准方可批准其 捐赠者的乳。使用多种技术识别适宜的捐赠者，授予捐赠资格。审批程序的一部分是，可 能获得捐赠资格的捐赠志愿者必须首先得到其保健医生和其孩子的儿科医师的许可。此 步骤尤其有助于确保捐赠者没有慢性疾病，并且她的孩子不会因其捐赠母乳而受损失。监 测乳的收集和分配并证明其合格的方法和系统在例如美国专利申请No. 12/728, 811 (U. S. 2010/0268658)中有描述，该专利全文以引用方式并入本文。捐赠者的捐赠行为可能是有 偿的，也可能是无偿的。
[0033] 通常情况下，筛选捐赠者包括让其填写生活方式和病史综合问卷，内容包括评估 其服用过的处方药和非处方药；检测其是否有滥用药物史，并检测其是否有某些病原体感 染。可以对捐赠者进行多种病毒筛查，例如人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1)、人类免疫缺 陷病毒2型（HIV-2)、人类嗜T淋巴细胞病毒1型（HTLV-I)、人类嗜T淋巴细胞病毒2型 (HTLV-II)、乙型肝炎病毒（HBV)、丙型肝炎病毒（HCV)和梅毒病毒。
[0034] 可能会定期重新授予捐赠志愿者捐赠资格。举例来说，如果捐赠者希望继续捐赠， 每隔四个月就会要求其接收筛选，筛选程序与其首次获得捐赠资格所经历的筛选程序相 同。没有重新接受筛选或未能再次获得捐赠资格的前捐赠者只有在重新接受筛选，或是再 次获得捐赠资格时才能继续捐赠；如果重新筛选的结果判定其不再适合捐赠，其不能再继 续捐赠。在后一种情况下，储库中由这名捐赠者提供的所有剩余的乳都将被清除并销毁，或 仅用于研究目的。
[0035] 捐赠者可以在指定机构（例如乳库办公室）捐乳，或者在一个优选的实施例中在 家中挤乳。如果捐赠者在家中挤乳，那么，其应当使用（例如）指定机构提供的温度计测量 冰箱温度，确保冰箱内的低温足以将人乳冷存以便通过批准。
[0036] 检验捐赠者身份
[0037] 在捐赠者获得捐赠资格后，因为捐赠者捐赠的乳可能是在自己家中挤出而不是乳 库机构中收集的，所以要将捐赠的人乳与捐赠者身份匹配。在一个具体实施例中，可对每位 捐赠者捐赠乳进行采样，检测其中的遗传标记物（例如DNA标记物），确保这份乳的确来自 这位获得捐赠许可的捐赠者。此类捐赠者身份识别技术是本领域已知的（参见例如国际申 请序列号PCT/US2006/36827,该申请以引用方式全文并入本文）。可将捐赠的乳存储起来 (存储温度例如为零下20°C或更低的温度），在检验结果出来之前将其隔离放置。
[0038] 举例来说，本文公开的方法可包括从潜在的人乳捐赠者采集生物参考样本的步 骤。这种样本可通过本领域已知的方法获得，例如但不限于颊拭子细胞样本、抽取的血样， 乳样本、唾液样本、发根组织样本或其他方便采集的组织样本。可从任何方便采集的生物样 本中分离出参考捐赠者核酸（如基因组DNA)的样品，所述方便采集的生物样本包括但不限 于乳、唾液、颊黏膜细胞、发根组织、血液，以及含有完整的分裂间期细胞核或分裂中期细胞 的任何其他适宜的细胞或组织样本。样本标记有独一无二的编号。可在获得样本后立即分 析其中的一种或多种标记物，也可以过一段时间再分析，这些标记物可以识别潜在的捐赠 者的身份。可将分析结果保存在（例如）计算机可读介质中。作为另外一种选择或除此之 外，可将样本储存起来，择期再分析其中用于识别身份的标记物。
[0039] 设想到，生物参考样本可以是采用本领域已知方法分型的DNA，这些方法例如是分 析STR基因座的STR分析法，分析HLA基因座的HLA分析法，或是分析个体基因/等位基因 的多基因分析法。将参考样本的DNA类型图谱记录并存储在（例如）计算机可读介质中。
[0040] 还设想到，可以使用本领域已知的抗体或其他方法检测生物参考样本的自体抗 原，由此确定自体抗原图谱。随后可将该自体抗原（或另一种肽）图谱记录并存储在（例 如）计算机可读介质中。
[0041] 取得人乳试验样本，用于识别其中的一种或多种身份标记物。分析捐赠的人乳样 本中与这名捐赠者的参考样本的一种或多种标记物相同的那些标记物。将参考生物样本和 捐赠的乳样本的标记物图谱进行比较。如果标记物匹配（并且没有任何额外的不匹配标记 物），则说明捐赠的乳与参考样本来自同一个体。如果标记物不匹配（或者说出现了额外的 不匹配标记物），则说明捐赠的乳要么来自未经检验的捐赠者，要么已被未经检验的捐赠者 的体液污染。
[0042] 可以检测捐赠的人乳样本和捐赠的参考生物样本中的不止一种标记物。举例来 说，可检测每份样本中的多种DNA标记物和/或肽标记物。然而，需要检测这两份样本中的 至少一部分相同标记物，才能对每份样本的标记物进行比较。
[0043] 因此，可检测参考样本和捐赠的人乳样本，判断是否存在不同的身份标记物图谱。 如果没有出现不同于预期的捐赠者的身份标记物图谱的身份标记物图谱，通常说明没有来 自他人或动物的体液（如乳汁）污染这份捐赠的人乳。如果出现了与这位捐赠者的预期信 号不同的信号，则表明这份样本已被污染。一旦判定样本被污染，这份捐赠者的乳就不合 格。
[0044] 可以在捐赠机构和/或乳加工机构对参考样本和捐赠的人乳进行检测。可将参考 样本的检测结果存储起来，用于和同一名捐赠者的任何将来的捐赠进行比较。
[0045] 筛杳污染物
[0046] 接下来检测乳中的病原体。可例如采用聚合酶链反应（PCR)对乳进行遗传学筛 查，识别其中是否例如有病毒，比如HIV-UHBV和HCV。还可使用微生物检测板监测污染物， 这种微生物检测板可用于通过培养来筛查各种细菌物种、真菌和霉菌。举例来说，微生物检 测板可用于检测需氧菌总数、錯状芽孢杆菌（Bacillius cereus)、大肠杆菌（Escherichia coli)、沙门氏菌（Salmonella)、假单胞菌（Pseudomonas)、大肠菌群、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、酵母菌和霉菌。具体地讲，錯状芽孢杆菌是不能被巴氏灭菌法 杀灭的病原菌。可以在巴氏灭菌前，也可以在巴氏灭菌后执行病原体筛查。
[0047] 除筛查病原体外，还可检测捐赠者的乳中是否有滥用药物（例如可卡因、鸦片剂、 合成阿片类药物（如羟考酮/羟吗啡酮）、甲基苯丙胺、苯二氮、安非他明和THC)和/或掺 杂物例如非人源蛋白。例如，可使用酶联免疫吸附试验（ELISA)检测捐赠者的乳中是否存 在非人源蛋白如牛源蛋白，由此例如确保提供有偿捐赠的捐赠者没有因为想要增加捐赠量 而向人乳中添加牛乳或婴儿配方牛奶。
[0048] 加工人乳
[0049] 在人乳通过筛查后，将其加工成高脂产品，例如人乳脂组合物。人乳捐赠机构和人 乳加工机构可以是同一家机构，也可以是不同的机构。可以加工大量人乳，例如，每批加工 约75公升至约2, 000公升原始人乳。
[0050] 由人乳制得为病人提供营养的含脂质组合物的方法在提交于2007年12月10日 的PCT申请PCT/US07/86973(W0 2008/073888)中有描述，该申请的内容全文并入本文。
[0051] 在如上所述仔细分析人乳以鉴定其来源可靠且不含污染物后，过滤该乳（例如使 用200微米滤器），再对其进行热处理。举例来说，可用约63°C或更高的温度处理该组合物 大约30分钟或更长时间。随后将该乳转移到分离器（如离心机）中，将乳脂（即脂肪部 分）分离出来，得到脱脂乳。可将脱脂乳转移到第二加工罐中，该脱脂乳在罐中保持约2°C 至8°C的温度，之后再行过滤。任选地，可将从脱脂乳分离出的乳脂再次放入分离器中分离， 以便进一步脱除脱脂乳。
[0052] 在将乳脂和脱脂乳分开之后，进一步过滤（例如超滤）脱脂乳部分。该步骤将水 滤除，从而使脱脂乳中的营养物质浓缩。浓缩期间获得的水称为透过液。可进一步加工得 到的脱脂乳部分，制出人乳强化剂和/或标准化人乳配方奶粉。
[0053] 加工人乳获得人乳强化剂（例如由人乳制得并含有不同浓度的营养成分的 ?肋1^(^?〇]51￥人乳强化剂，如？1?01^(^+41￥、？1?01^(^+6"、？1?01^(^+8"和/或？1?01^(^+10?) 和强化剂组合物的方法在提交于2007年11月29日的美国专利申请