一种NK细胞原液在制备治疗皮肤病药物中的应用的制作方法

文档序号:12728806阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种NK细胞原液在制备治疗皮肤病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的一种NK细胞原液在制备治疗皮肤病药物中的应用,其特征在于,将NK细胞原液与外用药用辅料混合,制备获得外用液体制剂或外用膏状制剂,将外用药物制剂和/或外用膏状制剂涂抹于患处,达到治疗皮肤病的目的,其中,将所述外用液体制剂命名为SNK液,将所述外用膏状制剂命名为SNK膏。

3.根据权利要求1所述的一种NK细胞原液在制备治疗皮肤病药物中的应用,其特征在于,先使用SNK液喷洒于患处,再使用SNK膏涂抹于患处,进行混合治疗。

4.根据权利要求1所述的一种NK细胞原液在制备治疗皮肤病药物中的应用,其特征在于,所述NK细胞原液的制备方法,包括以下步骤:

步骤一:取新鲜血液,提取血液中的外周血单核细胞PBMC;

步骤二:在RPMI-1640基础培养基中加入200U/ml的白介素IL-2、80U/ml的庆大霉素和10%重量百分比的胎牛血清,获得NK细胞培养液;

步骤三:取3.0×107-4.0×107个PBMC于一细胞培养瓶中,加入20-30ml的NK细胞培养液和2ml的浓度为1.0×107个/ml的NK扩增试剂,获得起始培养液;

步骤四:将NK细胞接种于起始培养液中培养1-2天,培养期间根据细胞生长状态添加NK细胞培养液;当培养至第3天时,将培养液离心,获得的细胞沉淀中加入NK细胞培养液继续培养;

步骤五:当NK细胞数量达1.5×108个/瓶以上时,加入2ml的NK扩增试剂和NK细胞培养液进行扩大培养,培养过程中根据细胞生长状态增加NK细胞培养液并进行分袋培养,使细胞浓度在1.0×106个/ml,当培养至第12天时,控制加液量,使细胞浓度为2.0×106个/ml;

步骤六:继续培养至第14天后,收集细胞培养液,获得NK细胞原液。

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