具有高药物装载的中链甘油三酯的药物组合物及其相关方法与流程

具有高药物装载的中链甘油三酯的药物组合物及其相关方法
1.优先权
2.根据u.s.c.
§
119(e)本申请要求享有2018年3月15日提交的发明名称为“具有高药物装载的中链甘油三酯的药物组合物及其相关方法”的美国临时申请顺序号no.62/643,479的权益，通过引用将该文献整体并入本说明书。
发明领域
3.本公开涉及包含高药物装载的中链甘油三酯的药物组合物以及制备这类组合物的方法和使用这类组合物的方法。
4.发明背景
5.中链甘油三酯(mct)包含链长在5
‑
12个碳之间的脂肪酸。mct已被广泛研究并且具有已知的营养和药物用途。mct具有在室温为液态的熔点。此外，mct相对小，在生理ph可电离，因此通常可溶于水溶液中。
6.当被预期用作药物组合物时，通常将在室温以液体形式存在的活性成分(例如mct)的组合物制备成固体剂型更合乎需求。
7.因此，本领域中对mct的固体剂型组合物，特别是具有对于药物用途而言足够高的活性成分比赋形剂水平(在本申请中称为药物装载)的mct的固体剂型组合物存在需求。
8.发明概述
9.在一方面，本公开涉及药物组合物，其包含高药物装载的mct，例如辛酸甘油三酯，和至少一种基质形成剂。在某些实施方案中，基质形成剂可以为甘油酯、天然蜡或其组合。该组合物可以形成离散颗粒，包括高药物装载的mct和基质形成剂。在某些实施方案中，所述的颗粒具有例如约50μm至约350μm的平均直径。在其它实施方案中，所述的颗粒表现出小于10％的流动性卡尔(carr)指数。该组合可以进一步包括溶出促进剂、助流剂、硬化剂及其组合。
10.在某些方面，mct为辛酸甘油三酯，其可以以占总组合物重量的至少约30％、约30％至约60％等的量存在。在某些实施方案中，基质形成剂可以为甘油酯、天然蜡或其组合。在某些实施方案中，基质形成剂以占总组合物重量的约20％至约70％、约40％至约70％等的量存在。
11.在其它方面，甘油酯可以选自甘油山萮酸酯、甘油二山萮酸酯、甘油三肉豆蔻酸酯、甘油三月桂酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油棕榈硬脂酸酯和甘油三乙酸酯及其组合。天然蜡可以包括标准天然蜡和氢化油，例如，包括氢化蓖麻油(hco)、巴西棕榈蜡、米糠蜡等。
12.在某些方面，溶出促进剂选自由如下各项组成的组：聚(乙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(丙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(乙二醇)共聚物、聚乙二醇共聚物、淀粉、米淀粉、卵磷脂、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚氧乙烯甘油酯、聚乙烯吡咯烷酮
‑
乙酸乙烯酯共聚物(pvp
‑
va)、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、醋酸琥珀酸羟丙甲纤维素(hpmcas)、低取代的羟丙基纤维素(l
‑
hpc)、山梨坦酯、聚乙二醇、脱水山梨糖醇脂肪酸酯及其组合。
13.在还其它方面，助流剂选自由如下各项组成的组：无定形硅胶、二氧化硅气凝胶、硅酸铝镁、硅酸钙、有序中孔型二氧化硅、微粉化滑石粉及其组合。
14.在还其它方面，硬化剂选自由如下各项组成的组：巴西棕榈蜡、小烛树蜡及其组合。
15.在还其它方面，当使用usp
‑
ii漏槽酸暴露后方法对药物组合物进行溶出测定时，至少40％但不超过60％的辛酸甘油三酯在前60分钟内从组合物中释放，至少60％但不超过80％的辛酸甘油三酯在120分钟内从组合物中释放，且至少80％的辛酸甘油三酯在前240分钟内从组合物中释放。在其它实施方案中，当使用usp
‑
ii漏槽酸暴露后方法对药物组合物进行溶出测定时，至少90％的辛酸甘油三酯在前360分钟内从组合物中释放。
16.在还其它方面，本公开涉及在有此需要的受试者中治疗与认知功能降低相关的疾病或障碍的方法，该方法包括以有效升高所述受试者中酮体浓度的量向受试者施用本公开的药物组合物，由此治疗所述疾病或障碍。在某些实施方案中，与认知功能降低相关的疾病或障碍选自阿尔茨海默病和年龄相关的记忆障碍。
17.虽然公开了多个实施方案，但是根据以下详细说明，本公开的其他实施方案对于本领域技术人员将变得明显，以下详细说明显示了并描述了本公开的示范实施方案。将会认识到，本发明能够在各方面进行改变而全部不脱离本公开的精神和范围。因此，以下详细本质上被看作是举例说明而非限制。
18.附图简述
19.提供下列实施例仅用于举例说明目的，而并不预期它们限制本发明的范围。
20.图1a
‑
d说明了根据本公开实施方案的示范药物制剂lmp
‑
1、lmp
‑
2、lmp
‑
3和lmp
‑
4的粒径和形态。图1a描述了在6x放大倍数下lmp
‑
1(50/50辛酸甘油三酯/微晶蜡)的颗粒图像。图1b描述了在5x放大倍数下lmp
‑
2(50/50辛酸甘油三酯/甘油二山萮酸酯)的颗粒图像。图1c描述了在5x放大倍数下lmp
‑
3(50/50辛酸甘油三酯/kolliphor csl)的颗粒图像。图1d描述了在5x放大倍数下lmp
‑
4(50/50辛酸甘油三酯/dynasan 118)的颗粒图像。
21.图2a
‑
d说明了在50x放大倍数下根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
1(图2a)、lmp
‑
2(图2b)、lmp
‑
3(图2c)和lmp
‑
4(图2d)的扫描电子显微镜检查(sem)图像。
22.图3a
‑
d说明了在200x放大倍数下根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
1(图3a)、lmp
‑
2(图3b)、lmp
‑
3(图3c)和lmp
‑
4(图3d)的sem图像。
23.图4a
‑
d说明了在200x放大倍数下根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
1(图4a)、lmp
‑
2(图4b)、lmp
‑
3(图4c)和lmp
‑
4(图4d)的sem图像。
24.图5a
‑
c说明了根据本公开方面的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的示差扫描量热法(dsc)热流。图5a描述了作为变温速率的函数的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的冷却dsc热流。图5b描述了显示了熔化前放热的作为变温速率的函数的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的加热dsc热流。图5c描述了作为变温速率的函数的显示了熔化比较的辛酸甘油三酯的加热dsc热流。
25.图6说明了根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
1、lmp
‑
2和lmp
‑
3的熔点曲线。
26.图7a
‑
c说明了根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
1、lmp
‑
2和lmp
‑
3与赋形剂(微晶蜡、compritol 888或kolliphor csl)和辛酸甘油三酯(miglyol 808)比较的色谱图。
27.图8显示了在～37℃、～25℃和～5℃示范制剂lmp
‑
1、lmp
‑
2和lmp
‑
3在0.25％sls
溶液中的溶出目视结果。图8还显示了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
1在～37℃、～25℃和～5℃在0.5％sls溶液中的溶出目视结果。
28.图9显示了根据本公开方面的辛酸甘油三酯(miglyol 808)在水溶液、0.25％sls溶液和0.25％sls溶液中的溶出目视结果。
29.图10a
‑
d说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5(图10a)、lmp
‑
7(图10b)、lmp
‑
9(图10c)和lmp
‑
11(图10d)在50x放大倍数下的sem图像。
30.图11a
‑
d说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5(图11a)、lmp
‑
7(图11b)、lmp
‑
9(图11c)和lmp
‑
11(图11d)在1500x放大倍数下的sem图像。
31.图12说明了根据本公开方面的50％装载的lmp
‑
2、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的示范制剂的热
‑
冷dsc扫描。
32.图13说明了根据本公开方面的50％装载的lmp
‑
2、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的示范制剂的冷
‑
热dsc扫描。
33.图14a
‑
h说明了根据本公开方面的涂覆了赋形剂的示范制剂lmp
‑
2、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的冷
‑
热和热
‑
冷dsc扫描。
34.图15a
‑
d说明了根据本公开实施方案的示范制剂lmp
‑
5(图15a)、lmp
‑
7(图15b)、lmp
‑
9(图15c)和lmp
‑
11(图15d)的色谱图。
35.图16说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的漏槽溶出速率。
36.图17a
‑
c说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5(图17a)和lmp
‑
11(图17b)在5℃、25℃和40℃1个月后和lmp
‑
5如本说明书中所述的1个月储存+在环境条件下1周储存后的漏槽溶出速率(图17c)。
37.图18a
‑
h说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5在储存前(图18a
‑
b)和储存1个月后(图18c
‑
h)的sem图像。
38.图19a
‑
h说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
11在储存前(图19a
‑
b)和储存1个月后(图19c
‑
h)的sem图像。
39.图20a
‑
h说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1650
‑
155(500x)、
‑
156(500x)、
‑
157(500x)、
‑
158(500x)、
‑
160(500x)、
‑
161(500x)、
‑
162(500x)、
‑
156(100x)和
‑
161(100x)的sem图像。
40.图21说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
155、
‑
156、
‑
160、
‑
161和
‑
162的漏槽溶出速率。
41.图22比较了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
2、lmp
‑
5、lmp brec1690
‑
155、
‑
156和
‑
162的漏槽溶出速率。
42.图23比较了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
11、lmp brec1690
‑
160和
‑
161的漏槽溶出速率。
43.图24说明了根据本公开方面的示范制剂lmp
‑
5和lmp brec1690
‑
156、
‑
157和
‑
162(lmp
‑
156、
‑
157和
‑
162)的体外消化曲线。
44.图25说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
156初始、在25℃/60％rh和40℃/75％rh 2周后和在25℃/60％rh和40℃/75％rh 1个月后的体外消化曲线。
45.图26说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
162初始、在25℃/60％rh
和40℃/75％rh 2周后和在25℃/60％rh和40℃/75％rh 1个月后的体外消化曲线。
46.图27a
‑
h说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
156在储存前(图27a)和储存2周后(图27b
‑
d)的sem图像。
47.图28a
‑
d说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
162在储存前(图28a)和储存2周后(图28b
‑
d)的sem图像。
48.图29a
‑
d说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
156在储存前(图29a)和储存一个月后(图29b
‑
d)的sem图像。
49.图30a
‑
d说明了根据本公开方面的示范制剂lmp brec1690
‑
162在储存前(图30a)和储存一个月后(图30b
‑
d)的sem图像。
50.图31a
‑
c显示了根据本公开方面的50/35/15mct/巴西棕榈蜡/gelucire 50/13lmp在50x(图31a)、300x(图31b)和1500x放大倍数(图31c)下的sem图像。
51.图32a
‑
c显示了根据本公开方面的40/40/20mct/巴西棕榈蜡/gelucire 50/13lmp在50x(图32a)、300x(图32b)和1500x放大倍数(图32c)下的sem图像。
52.图33a
‑
c显示了根据本公开方面的50/50mct/米糠蜡lmp在50x(图33a)、300x(图33b)和1500x放大倍数(图33c)下的sem图像。
53.图34a
‑
c显示了根据本公开方面的50/40/10mct/compritol/pvp
‑
17lmp在50x(图34a)、300x(图34b)和1500x放大倍数(图34c)下的sem图像。
54.图35a
‑
c显示了根据本公开方面的40/48/12mct/compritol/pvp
‑
17lmp在50x(图35a)、300x(图35b)和1500x放大倍数(图35c)下的sem图像。
55.发明详述
56.以背景而言，中链甘油三酯(“mct”)以不同于更常见的长链甘油三酯(lct)的方式被代谢。特别地，当与lct相比时，mct更易于消化以释放中链脂肪酸(mcfa)，其表现出肝门吸收速率增加并且进行专性氧化作用。相对于lct，mct的小尺寸和降低的疏水性增加了消化和吸收的速率。摄入mct时，它们首先要被脂肪酶加工，脂肪酶从甘油骨架上裂解脂肪酸链。十二指肠前的某些脂肪酶相对于lct优先水解mct，然后释放的mcfa部分被胃粘膜直接吸收。那些在胃中未被吸收的mcfa被直接吸收到门静脉中，并且不会被组装成脂蛋白。由于血液运输比淋巴运输要快得多，因此mcfa迅速到达肝脏。在肝脏中mcfa发生专性氧化。
57.相反，源自正常饮食脂肪的长链脂肪酸(lcfa)被重新酯化成lct，并被包装成乳糜微粒以在淋巴中运输。相对于mct，这极大地减慢了lct的代谢。在进食状态下，lcfa在肝脏中几乎不发生氧化，这主要由于丙二酰
‑
coa的抑制作用所致。当条件有利于脂肪储存时，丙二酰
‑
coa被生产作为脂肪生成中的中间体。丙二酰
‑
coa变构抑制肉碱棕榈酰基转移酶i，从而抑制lcfa转运到线粒体中。这种反馈机制防止了脂肪分解和脂肪生成的无效循环。
58.mcfa在很大程度上不受控制lcfa氧化的规则约束。mcfa无需使用肉碱棕榈酰基转移酶i即可进入线粒体，因此mcfa绕过此调节步骤并且被氧化，与生物体的代谢状态无关。重要的是，由于mcfa迅速进入肝脏并且被迅速氧化，因此容易从mcfa中产生大量的酮体。因此，口服大剂量的mct(例如约20ml至40ml)将导致持续的高酮血症。
59.一般而言本公开涉及包含高装载的至少一种mct的药物组合物和制备和使用这类组合物的方法。在某些实施方案中，mct为如本说明书中所述的辛酸甘油三酯。
60.在本公开的某些方面，所述药物组合物提供在使用者的下胃肠道中优先释放高药
物装载的mct。不想受理论的限制，与标准施用的未配制的mct油相比，mct在下胃肠道(包括结肠)中的优先释放可提供减少的胃部不适和相关不良事件。此外，与未配制的mct油的标准施用相比，mct的改善的生物利用度通常可导致体内酮体产生增加。
61.在某些方面，本公开的药物组合物为包含高药物装载的mct，例如辛酸甘油三酯和基质形成赋形剂的药物组合物。在某些实施方案中，基质形成剂可以为甘油、天然蜡或其组合。该组合物可以形成离散颗粒，其包括高药物装载的mct和基质形成赋形剂。该组合物可以进一步包括溶出促进剂、助流剂、硬化剂及其组合。该药物组合物可以包含如本说明书中所述量的成分。
62.本公开的药物组合物提供小的、离散的颗粒，其具有直径例如在约50μm和约350μm之间、在约100μm和约300μm之间等的平均粒径。
63.在某些方面，本公开的药物组合物提供离散的颗粒，其形成可流动的粉末。在某些实施方案中，可流动的粉末表现出小于约20％、15％、10％等的卡尔指数。
64.在某些实施方案中，所述的药物组合物可以包括高药物装载的至少一种mct，例如辛酸甘油三酯，其占总组合物的至少约25％，占总组合物的至少约30％重量，占总组合物的至少约40％重量，占总组合物的约30％重量至占总组合物的约65％重量、占总组合物的约30％重量至占总组合物的约60％重量、占总组合物的约40％重量至占总组合物的约50％重量，占总组合物的约40％重量至占总组合物的约45％重量。
65.除非有其它说明，否则如本说明书中所用，“％重量”是指“总组合物的重量％”。
66.在本公开的某些方面，mct是指与三个脂肪酸分子酯连接的任意甘油分子，每个脂肪酸分子具有5
‑
12个碳的碳链。在某些实施方案中，所述的药物组合物可以包含由如下通式表示的mct：
[0067][0068]
其中r1、r2和r3为在酯化至甘油骨架的碳骨架上具有5
‑
12个碳的脂肪酸。
[0069]
本公开的mct可以通过本领域中已知的任意方法制备，例如直接酯化、重排、分级分离、转酯化等。mct的来源包括任意适合的来源，半合成、合成或天然。mct的天然来源的实例包括植物来源，例如椰子和椰子油，棕榈仁和棕榈仁油；以及动物来源，例如来自多个物种任意一种例如山羊的奶。例如，可以通过使植物油例如椰子油重排制备脂质。链长的长度和分布可以根据来源油的不同而改变。例如，包含1
‑
10％c6、30
‑
60％c8、30
‑
60％c10、1
‑
10％c10的mct通常来源于棕榈和椰子油。
[0070]
根据本公开的某些实施方案，本公开的药物组合物可以包含mct，其在r1、r2和r3上具有大于约95％c8，并且在本说明书中称作辛酸甘油三酯(“ct”)。ct的示范来源包括808或895。在某些方面，ct可以得自通过辛酸半合成酯化至甘油等制成的椰子或棕榈仁油。
[0071]
在其它实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3为含有六碳主链(三
‑
c6:0)的脂肪酸。在许多动物模型系统中，三
‑
c6:0mct被胃肠道非常迅速吸收。高吸收速率导致肝脏的快速灌注和有效的生酮反应。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3为含有8
‑
碳主链(三
‑
c8:0)的脂肪酸。在另一个实施方案中，所
述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3为含有10
‑
碳主链(三
‑
c10:0)的脂肪酸。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可包含mct，其中r1、r2和r3为c8:0和c10:0脂肪酸的混合物。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3为c6:0、c8:0、c10:0和c12:0脂肪酸的混合物。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中大于95％的r1、r2和r3的长度为8个碳。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3碳链为6
‑
碳或10
‑
碳链。在另一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中约50％的r1、r2和r3的长度为8个碳，且约50％的r1、r2和r3的长度为10个碳。在一个实施方案中，所述的药物组合物可以包含mct，其中r1、r2和r3为6、8、10或12个碳链长度或其混合物。
[0072]
在某些方面，本公开的药物组合物包括至少一种基质形成剂。在某些实施方案中，基质形成剂可以为甘油、天然蜡或其组合。基质形成剂可以以足以提供期望的颗粒形成的用量存在。例如，在某些实施方案中，基质形成剂可以以占总组合物重量的约20％至约70％、约40％至约70％、约50％至约60％等的量存在。
[0073]
本领域中已知提供期望的颗粒形成的任意适合的甘油酯可以用作基质形成剂。作为实例，甘油酯可以为甘油山萮酸酯、甘油二山萮酸酯、甘油三肉豆蔻酸酯、甘油三月桂酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油棕榈硬脂酸酯和甘油三乙酸酯等。在某些实施方案中，甘油酯为甘油二山萮酸酯，例如888。
[0074]
本领域中已知提供期望的颗粒形成的任意适合的天然蜡可以用作基质形成剂。作为实例，天然蜡可以包括标准天然蜡和氢化油，例如，包括氢化蓖麻油(hco)、巴西棕榈蜡、米糠蜡等。
[0075]
如上所讨论，在某些实施方案中，药物组合物可以包括溶出促进剂、助流剂、硬化剂及其组合。
[0076]
不想受到限制，溶出促进剂通常可通过增加水渗透到组合物中的速率促进高药物装载的mct溶出。可以使用本领域中已知的提供期望的颗粒形成和溶出性质的任意适合的溶出促进剂。作为实例，溶出促进剂可以选自聚(乙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(丙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(乙二醇)共聚物、聚乙二醇共聚物、淀粉、米淀粉、卵磷脂、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚乙烯吡咯烷酮
‑
乙酸乙烯酯共聚物(pvp
‑
va)、聚氧乙烯甘油酯、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、醋酸琥珀酸羟丙甲纤维素(hpmcas)、低取代的羟丙基纤维素(l
‑
hpc)、山梨坦酯、聚乙二醇、脱水山梨糖醇脂肪酸酯及其组合。在某些实施方案中，溶出促进剂为聚(乙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(丙二醇)
‑
嵌段
‑
聚(乙二醇)共聚物。示范的溶出促进剂包括407、50/13等。任意适量的溶出促进剂可以用于实现期望的mct溶出度。在某些实施方案中，溶出促进剂以占总组合物重量的约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约2％至约20％、约2％至约15％等的量存在。
[0077]
在某些方面，本公开的药物组合物还包括助流剂。可以使用本领域中已知提供期望的颗粒形成和流动性的任意适合的助流剂。在某些实施方案中，助流剂为二氧化硅类化合物，例如胶体二氧化硅无定形硅胶颗粒状二氧化硅二氧化硅气凝胶、硅酸铝镁硅酸钙和有序中孔结构的硅酸盐。助流剂可以
以任意适合于提供期望的流动性的量存在于组合物中。例如，在某些实施方案中，助流剂可以以至少约2％重量，至少约5％重量，至少约10％重量，至少约15％重量，至少约20％重量，至少约25％重量，至少约30％重量、约2.0％至约30％重量、约2.0％至约20％重量等的量存在。
[0078]
在某些方面，本公开的药物组合物还包括助流剂。在某些实施方案中，助流剂为二氧化硅类化合物，例如胶体二氧化硅氧化硅类化合物，例如胶体二氧化硅无定形硅胶颗粒状二氧化硅二氧化硅气凝胶、硅酸铝镁硅酸钙和有序中孔结构的硅酸盐。在某些实施方案中，助流剂可以为无定形硅胶、二氧化硅气凝胶、硅酸铝镁、硅酸钙、有序中孔型二氧化硅、微粉化滑石粉及其组合。在某些实施方案中，助流剂包含微粉化滑石粉。助流剂可以以提供期望的流动性的任意适合的量存在于组合物中。例如，在某些实施方案中，助流剂可以以至少约2％重量，至少约5％重量等的量存在。在某些实施方案中，助流剂各自可以以约0.1％％至5.0％、约0.1wt％至约4.0wt％、约0.1wt％至约3.0wt％等的量存在。
[0079]
在某些方面，本公开的药物组合物还包括硬化剂。可以使用本领域中已知提供期望的颗粒形成的任何适合的硬化剂。在某些实施方案中，硬化剂可以为巴西棕榈蜡、小烛树蜡及其组合。在某些实施方案中，硬化剂为巴西棕榈蜡。任意适量的硬化剂可以用于实现期望的颗粒形成。在某些实施方案中，硬化剂以占总组合物重量的约1％至约60％、约5％至约60％、约10％至约60％、约20％至约60％等的量存在。
[0080]
在某些实施方案中，所述的药物组合物可以包含高药物装载的至少一种mct，例如辛酸甘油三酯，和至少一种基质形成剂。该组合物可以形成离散颗粒，其包括高药物装载的mct和基质形成剂。在某些实施方案中，基质形成剂可以选自甘油酯、天然蜡及其组合。甘油酯可以选自甘油山萮酸酯、甘油二山萮酸酯、甘油三肉豆蔻酸酯、甘油三月桂酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、甘油棕榈硬脂酸酯和甘油三乙酸酯及其组合。天然蜡可以包括标准天然蜡和氢化油，并且可以选自氢化蓖麻油(hco)、巴西棕榈蜡、米糠蜡及其组合。在某些实施方案中，所述的颗粒具有例如约50μm至约350μm的平均直径，在其它实施方案中，所述的颗粒具有小于10％的流动性卡尔指数。该组合物可以进一步包括溶出促进剂、助流剂、硬化剂及其组合。
[0081]
可以使用制备本公开药物组合物的任意适合的方法。在本公开的某些方面，已经发现，可以通过改变本说明书实施例中举例说明的制备方法控制再现性、粒径和形态以及收率。
[0082]
在某些方面，本公开涉及治疗有需要的受试者中与认知功能下降相关的疾病或障碍的方法，该方法包括以有效升高所述受试者中酮体浓度的量向该受试者施用本公开的药物组合物，从而治疗所述疾病或障碍。在某些实施方案中，本公开的药物组合物可以在生酮饮食的环境之外施用。例如，在本公开的上下文中，碳水化合物可以与本说明书所公开的药物组合物同时消费。
[0083]
根据本公开的某些方面，所述与认知功能下降相关的疾病和障碍包括：h年龄相关记忆障碍(aami)，阿尔茨海默病(ad)，帕金森病，弗里德里希共济失调(frda)，glut1缺陷性癫痫，矮妖精貌综合征和rabson
‑
mendenhall综合征，冠状动脉旁路移植(cabg)痴呆，麻醉
诱导的记忆丧失，亨廷顿病和许多其它疾病和障碍。
[0084]
在另一个实施方案中，患者患有由神经元代谢减少引起的疾病相关的认知功能下降，例如，与阿尔茨海默病(ad)、帕金森病、弗里德里希共济失调(frda)、glut1缺陷性癫痫、矮妖精貌综合征和rabson
‑
mendenhall综合征、冠状动脉旁路移植(cabg)痴呆、麻醉诱导的记忆丧失、亨廷顿病和许多其它疾病和障碍有关的认知功能下降，或处于发生所述认知功能下降的风险中。
[0085]
如本说明书中所用，神经元代谢减少是指可能导致神经元代谢减少的所有可能的机制。这些机制包括但不限于线粒体功能障碍，自由基攻击，活性氧种类(ros)生成，ros诱导的神经元凋亡，葡萄糖转运或糖酵解不良，膜离子电势失衡，钙通量功能障碍等。
[0086]
根据本发明，高血酮体水平将为具有葡萄糖代谢受损的脑细胞提供能量来源，导致认知功能的改善性能。如本说明书中所用，“受试者”和“患者”可互换使用，并且是指任何哺乳动物，包括人，他们可能受益于与神经元代谢减少有关或由其引起的疾病和病症的治疗。
[0087]“有效量”是指如本说明书中所述的化合物、材料或药物组合物有效实现特定生物学结果的量。可以通过来自至少一种神经心理学试验的改进结果来评估治疗上述病症的有效性。这些神经心理学试验是本领域中已知的，并且包括临床变化的总体印象(cgic)，莱氏听觉言语学习试验(ravlt)，姓名联想试验(fln)，电话拨号试验(tdt)，记忆评定诊所自测评分量表(mac
‑
s)，符号数字编码(sdc)，sdc延缓回忆任务(drt)，分配性注意试验(dat)，目视序列比较(vsc)，dat双重任务(dat dual)，简短精神状态检查(mmse)和老年抑郁量表(gds)等。
[0088]
术语“认知功能”是指脑的特殊、正常或适当的生理活动，包括但不限于以下的至少一种：心理稳定性，记忆/回忆能力，解决问题的能力，推理能力，思考能力，判断能力，学习能力，感知，直觉，注意力和意识。“增强的认知功能”或“改善的认知功能”是指脑的特殊、正常或适当的生理活动，包括但不限于以下的至少一种的任何改善：心理稳定性，记忆/回忆能力，问题解决能力，推理能力，思考能力，判断能力，学习能力，感知，直觉，注意力和意识，其可以通过本领域中适合的任何方式测定。“认知功能降低”或“认知功能受损”是指脑的特殊、正常或适当的生理活动的任何下降。
[0089]
在另一个实施方案中，本发明的方法进一步包含确定患者的基因型或特定等位基因。在一个实施方案中，确定患者的载脂蛋白e基因的等位基因。已经发现，当用mct诱导酮体水平升高时，非e4携带者的表现优于具有e4等位基因的携带者。而且，那些具有e4等位基因的人具有较高的禁食酮体水平，并且该水平在两个小时的时间间隔内持续上升。因此，e4携带者可能需要更高的酮体水平或增加使用现有酮体能力的药剂。
[0090]
在一个实施方案中，本公开的药物组合物通过口服施用。治疗剂的治疗有效量可以是足以带来期望的效果的任何量或剂量，并且部分取决于病情的严重程度和阶段，患者的身材和状况以及对于本领域技术人员其他已知的因素。如本说明书其他地方所讨论的，所述剂量可以例如以单剂量或几个剂量的形式在几周的过程中分配给予。
[0091]
在一个实施方案中，以将血酮体增加至治疗和/或预防任何与疾病相关或年龄相关的认知下降(例如ad，aami等)发生所需水平所需的剂量施用本公开的药物组合物。本领域技术人员可以确定适当的剂量。
[0092]
在一个实施方案中，本公开的药物组合物的口服施用导致高酮血症。在一个实施方案中，即使在葡萄糖存在的情况下，高酮血症也导致酮体也被利用为大脑提供能量。另外，高酮血症导致脑血流量显著增加(39％)(hasselbalch，s.g.等人，changes in cerebral blood flow and carbohydrate metabolism during acute hyperketonemia，am j physiol，1996，270:e746
‑
51)。据报道，高酮血症减轻正常人与系统性低血糖有关的认知功能障碍(veneman，t.等人，effect of hyperketonemia and hyperlacticacidemia on symptoms，cognitive dysfunction，and counterregulatory hormone responses during hypoglycemia in normal humans，diabetes，1994，43:1311
‑
7)。请注意，系统性低血糖不同于任何与疾病相关或年龄相关的认知能力下降(例如，ad，aami等)中发生的葡萄糖代谢的局部缺陷。
[0093]
例如，可以每月一次，每周一次，每天一次或每天多次在根据需要或期望的基础上施用。类似地，施用可以是每隔一天、一周或一个月，每三天、一周或一个月，每四天、一周或一个月等进行。每天可以施用多次。当用作普通饮食要求的补充剂时，可将组合物直接施用于患者，或以其他方式每天与进食或食物接触或混合。
[0094]
在一个实施方案中，本申请中提供的药物组合物旨在用于“长期”消费，有时在本说明书中称为“延长”期限。本说明书中所用的“长期”施用通常是指超过一个月的期限。超过两个、三个或四个月的期限构成了本发明的一个实施方案。还包括的是包含更延长期限的实施方案，它们包括长于5、6、7、8、9或10个月。还包括超过11个月或1年的期限。本申请还考虑了超过1、2、3年或更多年的更长期限。本说明书中所用的“定期基础”是指至少每周一次，以组合物给药或消费组合物。包括更频繁的给药或消费，例如每周两次或三次。还包括包含每天至少一次消费的方案。本领域技术人员将理解，所获得的酮体或特定酮体的血液水平可能是给药频率的有价值的量度。本申请中可以将允许被测量化合物的血液水平维持在可接受的范围内的任何频率(无论是否在本申请中明确举例说明)认为是有用的。本领域技术人员将理解，给药频率是所消费或施用的组合物的函数，并且一些组合物可能需要更频繁或更不频繁施用以维持被测量化合物(例如，酮体)的所期望的血液水平。
[0095]
例如，可以作为患者治疗方案的一部分定期进行施用。治疗方案可以包含导致患者定期以有效增强患者的认知功能、记忆和行为的量摄入本公开的药物组合物。定期摄入可以是每天一次，或者每天两次，三次，四次或更多次，以每天或每周为基础进行。类似地，定期施用可以是每隔一天或周，每三天或周，每四天或周，每五天或周，或每六天或周，并且在这种方案中，施用可以每天多次。如本说明书中所举例说明的，定期施用的目标在于为患者提供最佳剂量的本公开的药物组合物。
[0096]
本发明组合物，例如包含mct组合物的剂量，可以以有效量有效施用，以增加患有神经元代谢降低的疾病的患者的认知能力，例如在患有任何疾病
‑
或与年龄相关的认知能力下降的患者中，例如ad，aami等。
[0097]
在一个实施方案中，本发明的组合物导致体内酮体浓度升高，并且在该实施方案中，以有效诱导高酮血症的量施用所述组合物。在一个实施方案中，高酮血症会导致酮体被利用为大脑中的能量。
[0098]
在一个实施方案中，所述的组合物增加了哺乳动物或患者体内至少一种类型酮体的循环浓度。在一个实施方案中，循环酮体是d
‑
β
‑
羟基丁酸酯。可以在施用后多个时间测量
循环酮体的量，并且在一个实施方案中，在一个预计接近血液中峰值浓度的时间测量，但也可以在预计峰值血液浓度水平之前或之后测量。然后可选地调整这些离峰时间测量的量，以反映预计峰值时间时的预测水平。在一个实施方案中，预计峰值时间约为2小时。峰值循环血液水平和时机可根据本领域技术人员已知的因素而变化，包括本领域技术人员已知的个体消化率，食物、饮料等的共摄取或摄取前或摄取后等。在一个实施方案中，所达到的d
‑
β
‑
羟基丁酸酯峰值血液水平约为0.05毫摩尔浓度(mm)至约50mm。确定d
‑
β
‑
羟基丁酸酯的血液水平是否升高至约0.05至约50mm的另一种方法是测量d
‑
β
‑
羟基丁酸酯的尿排泄量为在约5mg/dl至约160mg/dl的范围内的值。在其它实施方案中，峰值血液水平升高至约0.1至约50mm、约0.1至约20mm、约0.1至约10mm、约0.1至约5mm，更优选升高至约0.15至约2mm、约0.15至约0.3mm和约0.2至约5mm，尽管例如如上所述根据组合物和宿主的不同必然会发生变化。在其它实施方案中，所达到的d
‑
β
‑
羟基丁酸酯的峰值血液水平为至少约0.05mm，至少约0.1mm，至少约0.15mm，至少约0.2mm，至少约0.5mm，至少约1mm，至少约1.5mm，至少约2mm，至少约2.5mm，至少约3mm，至少约4mm，至少约5mm，至少约10mm，至少约15mm，至少约20mm，至少约30mm，至少约40mm和至少约50mm。
[0099]
本发明组合物的化合物(即能够以有效治疗或预防由神经元代谢减少引起的认知功能丧失的量升高酮体浓度的化合物)的剂量的有效量对于本领域技术人员而言是显而易见的。如上所讨论，可以根据所公开的血酮水平确定这种有效量。在一个实施方案中，如果能够提高酮体浓度的化合物是mct，则mct剂量在约0.05克/千克/天至约10克/千克/天的mct。在其它实施方案中，所述剂量在约0.25克/千克/天至约5克/千克/天的mct。在其它实施方案中，所述剂量在约0.5克/千克/天至约2克/千克/天的mct。在其它实施方案中，所述剂量在约0.1克/千克/天至约2克/千克/天。在其它实施方案中，mct的剂量为至少约0.05克/千克/天，至少约0.1克/千克/天，至少约0.15克/千克/天，至少约0.2克/千克/天，至少约0.5克/千克/天，至少约1克/千克/天，至少约1.5克/千克/天，至少约2克/千克/天，至少约2.5克/千克/天，至少约3克/千克/天，至少约4克/千克/天，至少约5克/千克/天，至少约10克/千克/天，至少约15克/千克/天，至少约20克/千克/天，至少约30克/千克/天，至少约40克/千克/天和至少约50克/千克/天。
[0100]
便利的单位剂量容器和/或制剂包括片剂、胶囊剂、锭剂、糖锭、硬糖、营养棒、营养饮料、计量喷雾剂、霜剂和栓剂等。所述的组合物可以与药学上可接受的赋形剂例如明胶、油和/或其他药物活性剂组合。例如，所述的组合物可以有利地与不同于主题化合物的其他治疗剂或预防剂组合和/或组合使用。在许多情况下，与主题组合物联合施用增强这类药剂的功效。例如，所述的化合物可以有利地与抗氧化剂、增强葡萄糖利用效率的化合物及其混合物结合使用。
[0101]
可以根据每千克体重(bw)哺乳动物mct的克数测定mct的每日剂量。mct的每日剂量可以在约0.01g/kg至约10.0g/kg bw的哺乳动物。优选地，mct的每日剂量可以在约0.1g/kg至约5g/kg bw的哺乳动物。更优选地，mct的每日剂量可以在约0.2g/kg至约3g/kg的哺乳动物。仍然更优选地，mct的每日剂量可以在约0.5g/kg至约2g/kg的哺乳动物。
[0102]
在一些实施方案中，本发明的化合物可以与碳水化合物共同施用，或者与碳水化合物共同配制。碳水化合物可以包括超过一种类型的碳水化合物。适合的碳水化合物在本领域中是已知的，并且包括单糖，例如葡萄糖，果糖，蔗糖等，其来自常规来源，例如玉米糖
浆，甜菜等。如果共同配制，则碳水化合物的使用量可以包括至少约0.1g，至少约1g，至少约10g，至少约50g，至少约100g，至少约150g，至少约200g，至少约250g，至少约300g，至少约400g。肉碱的量可以为至少约1g，至少约50g，至少约100g。所述的组合物可包含约15％至约40％的碳水化合物，以干重计。该碳水化合物的来源包括谷粒或谷物，例如大米，玉米，高粱，苜蓿，大麦，大豆，芸苔，燕麦，小麦或其混合物。所述的组合物还任选地包含其他成分，该其他成分包含碳水化合物，例如干乳清和其他乳制品或副产品。
实施例
[0103]
提供下列实施例仅用于举例说明目的，而并不想它们限制本发明的范围。
[0104]
实施例1
–
药物制剂
‑
lmp
‑
1、lmp
‑
2、lmp
‑
3、lmp
‑4[0105]
如本说明书中所述和下表1
‑
a中反映的，制备了示范性和对比性药物制剂。
[0106][0107]
表1
‑
a
[0108]
使用配备有热夹套熔化罐的雾化器旋转式圆盘加工单元制备了制剂。使用配备有通用1.25英寸直径工作头的silverson高剪切混合机搅拌该罐。雾化器是由变温电动机驱动的4英寸旋转式圆盘。将产品盛装并收集在充气的8英尺直径一次性袋子中。
[0109]
将赋形剂与辛酸(miglyol 808)油一起放入热夹套熔化罐中并使其熔化。当成分大部分熔化时，将高剪切混合头降低入熔化物中。转子以900
‑
1000rpm的转速运转约1小时，以使活性物质在熔化物中均匀分散。停止混合机，将压力盖置于罐上。仅通过压力头将熔化物输送到旋转式圆盘雾化器。通过这种设置，熔化物输送到旋转式圆盘雾化器的速度取决于熔化物粘度和罐上的压力。旋转式圆盘雾化器由尼龙制成，并随着熔化物在其上流动而在数秒之内被加热到温度。从旋转式圆盘雾化器的边缘流出的熔化物形成小的球形液滴，这些液滴在撞击收纳袋之前会凝结并硬化。所得的粒度分布受熔化物粘度和流向所述盘的流速的影响，但主要受旋转式圆盘雾化器的转速影响。
[0110]
在上述旋转式圆盘装置上制造了4种制剂。表1
‑
b显示了所有运行的制造概述。使用4”尼龙雾化器和带有压头的加压罐作为进料系统，在旋转式圆盘设备上处理了所有4种制剂。lmp
‑
1产生最硬的颗粒，而lmp
‑
4产生最软的颗粒。
[0111][0112]
表1
‑
b
[0113]
除lmp
‑
4外，收集了足够的材料用于制剂的全面表征。对于lmp
‑
4，粉末处理性能较差。颗粒看起来很粘且柔软，在某些情况下会在设备和包装表面上残留看起来是油脂残留物的物质。
[0114]
实施例2
–
制剂lmp
‑
1、lmp
‑
2、lmp
‑
3和lmp
‑
4的表征
[0115]
对表1
‑
a中所述的制剂的粒度和形态，密度和流动性，熔化和凝结特性，熔点以及效价和纯度进行了表征。
[0116]
使用光学显微镜评估了颗粒形状和形态。图1a(lmp
‑
1)、图1b(lmp
‑
2)、图1c(lmp
‑
3)和图1d(lmp
‑
4)显示了图像。所有批次产生的球形颗粒几乎没有非球形缺陷。一般而言，所有制造的颗粒的直径范围均为在制剂之间观察到粒度的一些变化。lmp
‑
1明显大于lmp
‑
2。颗粒大小可以通过调整盘速来控制。lmp 3和4出现了结块。
[0117]
sem成像用于评估粒度、形状和形态。图2a
‑
2d、图3a
‑
3d和图4a
‑
4d(a组中的lmp
‑
1、b组中的lmp
‑
2、c组中的lmp
‑
3和d组中的lmp
‑
4)显示了颗粒的sem图像。所有批次均产生直径为50
–
350μm的球形颗粒。大小和形状与光学显微镜一致。在图4a
‑
4d中以1000倍的放大倍率可以清楚地看到每种lmp制剂的表面形态。
[0118]
lmp
‑
1颗粒
‑
具有微晶蜡基质
‑
具有相对光滑的表面与几个小的圆形凸起。基于compritol的lmp
‑
2具有非常粗糙的表面，但缺乏compritol的特征性表面形态。compritol典型地显示了具有六边形表面晶体的光滑表面。形态上的差异表明辛酸正在改变compritol的晶体结构。lmp
‑
4的表面非常不典型。表面看起来是相分离的。一个相可能主要
是液态油，这解释了油性表面和团聚的肉眼观结果。
[0119]
使用accupyc 1330比重瓶测量了所选lmp的真密度。参见表2
‑
a。微晶蜡lmp(lmp
‑
1)的真密度小于1，如果颗粒漂浮在水中，则可能会导致溶出过程中出现问题。compritol 888(甘油二山萮酸酯)lmp(lmp
‑
2)稍大于1。当悬浮在0.25％sls/水溶液中时，漂浮的lmp
‑
1和lmp
‑
2部分沉没，这与accupyc真密度数据一致。
[0120][0121]
表2
‑
a
[0122]
通过差示扫描量热法(dsc)测试了lmp、赋形剂和活性辛酸(miglyol 808)油的热特性，以进一步理解其熔化和凝结特性。辛酸甘油三酯(miglyol 808)的热特性通过使用一定范围的进行油的凝结以及随后的热和熔化事件的变温速率范围进行分析。由于凝结温度通常取决于冷却速率，因此使用10、5、2、1和0.2℃/min的变温速率。如图5a所示，辛酸甘油三酯(miglyol 808)的凝结温度高度依赖于冷却速率。当以10℃/min(接近dsc仪器的最大速率)冷却时，在
‑
60.5℃观察到发生单次放热，其中焓变为28.4j/g。随着变温速率的降低，凝结起始温度升高，并且凝结曲线变得更加复杂，这可能是由于形态变化所致。
[0123]
如图5b和5c所示，在加热周期中，观察到多种放热现象，表明固体形式发生变化。对于所有变温速率，固体在10
‑
11℃熔化，这表明到截止到辛酸甘油三酯(miglyol 808)的熔点，所有物理形式辛酸甘油三酯(miglyol 808)熔化之前均已转变为相同的多晶型物。数据显示，制造含辛酸甘油三酯(miglyol 808)的lmp过程中的冷却速率可能会影响凝结固体的物理形式。使用两种方法：1)热
‑
冷却和2)冷
‑
热在ta q2000dsc上通过dsc分析了lmp样品及其相应的赋形剂。使用在环境条件下密封的30μl pe密封盘和盖。样品质量范围在5
–
15mg。表2
‑
b中列出了热
‑
冷和冷
‑
热法。
[0124][0125]
表2
‑
b
[0126]
热
‑
冷法的主要目标在于测量基质的熔点和相应的凝固点。冷
‑
热法的主要目标在于检测固态lmp基质中任何游离的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的凝结现象
‑
提示相分离的油
‑
并在辛酸甘油三酯(miglyol 808)熔点之前鉴别放热
–
表明形式更改。此外，相对于各自的纯成分，比较了辛酸甘油三酯(miglyol 808)油和赋形剂的熔点。
[0127]
比较这3种lmp制剂，明显lmp 1和2具有比lmp
‑
3更理想的特性，这归因于熔点为33℃的低温开始，且凝结开始在44℃(参见表2
‑
c)。这些低温将给加工带来挑战，并限制最终形式的lmp的存储和使用。最终，这种见解消除了将kolliphor csl用作含辛酸甘油三酯的lmp的主要赋形剂成分的考虑。从热的角度看，lmp 1和2显示了出将辛酸甘油三酯配制成稳定的多颗粒药物制剂的承诺，因为样品基质的融化和凝结开始足够高，以便在室温加工成稳定的制剂。
[0128][0129]
表2
‑
c
[0130]
热数据显示大部分辛酸甘油三酯与赋形剂材料相分离。如果存在完全可混溶的系统，则预期只有一个熔点。情况远非如此，因为所有3种lmp均在10℃表现出辛酸甘油三酯的熔点和随后赋形剂的熔化。由于所有3种lpm均为50％辛酸甘油三酯，因此熔化事件的最大预期焓为对于lmp
‑
1、2和3，辛酸甘油三酯熔化物的焓分别为50、50和61j/g(参见表2
‑
d和2
‑
e)，这提示>85％的辛酸甘油三酯在lmp中相分离。
[0131][0132]
表2
‑
d&e
[0133]
使用自动化熔点仪(srs optimelt)以2℃/min收集了目视熔点数据。由于dsc发生了广泛的热事件，通过在加热时对lmp进行目测评估获得的见识允许更大程度地区分制剂，而仅热量分析数据可能会忽略这些制剂。
[0134]
如通过光强度所分析的，熔化曲线(图6)显示，lmp
‑
2具有3种lmp中最尖锐的熔点曲线，起始熔点为62℃，熔化终点为75℃。该观察结果与当置于戴着手套的手指之间时lmp看起来熔化的观察结果形成鲜明对比。根据该数据，在不希望受任何理论束缚的情况下，lmp
‑
2compritol基质可能会因高含油量而受损，并且由于手指相互摩擦而在压力下会发生物理断裂。lmp
‑
1在43℃时开始变为半透明，但是直到64℃时，才观察到材料的收缩。lmp
‑
3从40℃的起点开始立即熔化。一旦熔化，则该材料仍然是不透明的，并且直到140℃才变得完全透明，这可能归因于来自赋形剂(kolliphor csl)的sls直到那时都没有完全溶解在熔化物中。
[0135]
通过hplc
‑
cad分析了lmp制剂的效力和纯度。简言之，通过以下方法制备了样品：将10mga粉末称入20ml闪烁瓶中；加入10ml lmp稀释剂；50/50acn/ipa；声处理10分钟；平衡到室温(rt)；向配备0.2μm 25mm尼龙过滤器的bd注射器中装入5ml；弃去4ml，将第5ml收集到hplc小瓶中。色谱条件如表2
‑
f中所述。
[0136]
[0137][0138]
表2
‑
f
[0139]
通过rrt＝1.32的杂质没有显著变化，除了lmp
‑
2，其在rrt＝1.11具有0.27％的峰值。rrt＝1.36
‑
2.55的所有峰都可能是未从单独纯赋形剂中提取的赋形剂的峰。不受任何特定理论约束，认为辛酸甘油三酯(miglyol 808)可以用作为赋形剂的助溶剂起作用，从而与用作对照的单独纯成分相比，有助于从基质中提取另外的成分。
[0140]
所有3种制剂的含量测定值接近100％理论值，值的范围为97.2
–
99.6％的标签声称(lc)。表2
‑
g包含相对于3种lmp制剂的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的列表峰数据。图7a
‑
7c显示了3种lmp与赋形剂和辛酸甘油三酯(miglyol 808)对照的举例色谱图。缩放色谱图，并显示了由于赋形剂引起的峰的显著贡献。另外，不受任何一种理论约束，rrt 0.31和0.34处的峰可以是c
‑
8甘油二酯，因此作为杂质被包括在内。
[0141]
rrt峰idmiglyol 808％lmp
‑
1％lmp
‑
2％lmp
‑
3％0.31 0.16％0.17％0.20％0.16％0.34 0.10％0.10％0.14％0.10％0.54 ndnd0.07％nd0.65 0.06％0.06％0.06％0.06％0.80c6:c8:c8<loq<loq<loq<loq0.91 0.06％0.06％0.06％0.06％1.00辛酸甘油三酯98.39％97.70％96.97％97.22％1.10 0.11％0.11％0.09％0.10％1.11 ndnd0.27％*nd1.19c10:c8:c80.98％0.98％0.97％0.95％1.30 0.06％0.06％nd0.06％1.32 0.07％0.07％nd0.09％1.36 ndndnd0.34％2.12 nd0.07％ndnd
2.20 nd0.17％ndnd2.28 nd0.15％ndnd2.33 ndndnd0.19％2.38 nd0.19％ndnd2.49 nd0.11％ndnd2.50 ndndnd0.41％2.55 ndndnd0.26％
‑‑‑
总杂质1.61％2.30％2.44％2.78％ 含量测定(％lc)na97.2％99.6％98.7％
[0142]
loq>0.05％
[0143]
*面积与compritol对照进行了校正的峰。
[0144]
表2
‑
g
[0145]
实施例3
–
lmp
‑
1、lmp
‑
2、lmp
‑
3的溶出
[0146]
使用20ml闪烁瓶对lmp制剂1至3进行小规模的目视溶出研究。该测试在37℃、25℃和5℃下使用0.25％月桂基硫酸钠(sls)在水中进行。在本研究中使用加热的铝块和加热的搅拌板。将500mg(250mga，25mga/ml)的每种lmp制剂添加到10ml预先加热的0.25％sls溶液中。使用特氟隆搅棒在加热的搅拌板上搅拌样品以维持温度20分钟。20分钟后，使lmp悬浮液沉降并目测评估。
[0147]
溶出度测试的图像如图8中所示。搅拌20分钟后，含有lmp
‑
1的小瓶保持澄清，这提示未释放辛酸甘油三酯(miglyol 808)油。lmp
‑
2和lmp
‑
3测试瓶均不透明，这提示油释放或lmp熔化。lmp
‑
3测试样品瓶的粘度显著增加。然而，在其他制剂中未观察到这一点。
[0148]
当在室温和5℃进行溶出测试时，观察到相似的结果。与37℃的溶出度相比，含有lmp
‑
1的样品瓶在较低的温度下更浑浊。但是，它们比lmp
‑
2和lmp
‑
3的浑浊少得多。与37℃时相比，lmp
‑
2在5℃时更混浊，但在室温较少混浊。lmp
‑
3在三个温度之间未观察到有差异。结果表明混浊不是由于熔化造成的，因为脂质在室温和5℃为固体。
[0149]
最终仅使用lmp
‑
1和0.5％sls/水溶液重复了测试以检查另外的表面活性剂是否通过增加油在水中的溶解度而有助于表观溶出度。结果类似于0.25％sls溶出度，这提示没有浑浊，因此溶出度不受油/水溶解度的驱动。
[0150]
进行了油溶出度对照测试，以确定辛酸甘油三酯(miglyol 808)油如何溶解到sls/水溶液中。制备了两种sls储备溶液，分别在水中为0.25％和0.5％sls。将10ml的每种sls溶液用磁搅棒添加到闪烁瓶中。将250mg辛酸甘油三酯(miglyol 808)油加入每个小瓶中并搅拌20分钟。10分钟和2天后拍摄图像。图像如图9中所示。大部分的油漂浮在水上而不是进入溶液。在10分钟的照片中，小瓶确实显得有些浑浊，表明某些油可能会在水相中乳化。2天后，浊度降低，这可能是因为乳化的辛酸甘油三酯(miglyol)分离成油相。
[0151]
未观察到lmp
‑
1的油相，强烈暗示未释放辛酸甘油三酯(miglyol 808)。对于lmp
‑
2和3，也未观察到油相，然而，该油可能已经与脂质载体一起在水相中乳化，或者在拍摄图像时相没有分离。lmp溶出度测试中的浑浊是脂质载体而不是油的结果。
[0152]
将lmp 1、2和3与辛酸甘油三酯(miglyol 808)油一起在usp ii型漏槽溶出实验中进行测试。将500mga的制剂定量加入1000ml容器中，该容器中包含900ml ph 6.8缓冲液中
的2.0wt％sls。在30分钟和17.5小时时取样。将方法参数在表3
‑
a和3
‑
b中列出。结果列于表3
‑
c中。
[0153][0154]
表3
‑
a
[0155]
[0156][0157]
表3
‑
b
[0158][0159]
表3
‑
c
[0160]
可以预期对照样品，辛酸甘油三酯(miglyol 808)，将实现100％释放，因为剂量是所选介质的3倍漏槽。然而，情况并非如此，因为离心样品仅实现了30％的收率。观察到油分散到肉眼容易观察到的宏观液滴中。这些液滴的大小和数量看起来没有随时间变化。不受任何一种理论约束，油滴可以通过介质中的sls稳定，并且在动力学上比溶解在sls胶束中更为稳定。与溶解度相比，该油的剂量明显过量(80x)。对于溶解度实验，大量过量的油可能已经克服了动力学成分，并促使溶解度达到其热力学溶解度。
[0161]
lmp
‑
1具有释放差的辛酸甘油三酯(miglyol 808)，没有可测到的峰(loq>0.5％lc，约)。17.5小时后，所有3种分离技术均导致1.6％的lc释放。lmp
‑
2在3种所测试的lmp制剂中表现出最佳的总体性能，在17.5小时后具有75
–
91％lc释放，表明具有理想的体内释放特性的可能性。
[0162]
在首轮溶出测试之后，使用spex freezer/mill将lmp
‑
1的一部分低温研磨以使lmp破裂以暴露颗粒的内部，以及增加表面积。与完整的lmp相比，溶出度增加了约4倍，然而，不受任何一种理论约束，这可以仅归因于表面积的增加所致。该数据支持以下推定：辛
酸甘油三酯分配入微晶蜡，并且不会释放到漏槽溶出介质中，从而有效地消除了微晶蜡成为包含辛酸甘油三酯的lmp制剂中的主要成分。
[0163]
实施例4
–
助流剂
[0164]
如上表1
‑
1a所述，对lmp
‑
1筛选两种助流剂，以评估流动性的改善。将微粉化滑石粉和胶体二氧化硅分别以2wt％的水平与50克小批量的lmp
‑
1进行干混。这通过添加助流剂，在turbula中共混，通过600μm筛过筛该混合物并完成最终的turbula共混来进行。通过目视，使用胶体二氧化硅的流动性和处理性能没有变化，而使用微粉化滑石粉的流动性和处理性能却明显改善。随后，将其余的每批(lmp
‑
2、lmp
‑
3、lmp
‑
4，如表1
‑
a中所述)各自与2wt％的滑石粉共混。在此过程中，来自lmp
‑
4的物料在共混步骤中会自动团聚。这提示柔软度水平是不可恢复的。在有或没有助流剂的情况下进一步表征剩余的3种lmp批次。
[0165]
如实施例2中所述测量了具有2％滑石粉的lmp
‑
1和lmp
‑
2的真密度。数值在表2
‑
a中。
[0166]
对选定的lmp制剂测量了堆密度和拍实密度，以量化在添加2％滑石粉作为流动助剂之前和之后的流动性。在计算描述粉末流动性的卡尔指数时，使用了堆体积和拍实体积。具有卡尔指数大于25的粉末典型地具有较差的流动性，而低于15的数值具有良好的流动性。对经滑石粉处理和未经滑石粉处理的lmp
‑
1和lmp
‑
2以及经滑石粉处理的lmp
‑
3进行了bsv/tsv测试。没有测试lmp
‑
4，因为它会聚集成团。结果如表3
‑
a中所示。添加2％滑石粉显著改善lmp
‑
1和lmp
‑
2的流动性。在添加滑石粉的情况下，lmp运行1和2的卡尔指数相应地从31降至10和从18降至6。卡尔指数值与流动性的目测评估一致。未经滑石粉处理的物料流动不良，而经滑石粉处理的lmp流动良好。也对lmp
‑
3滑石粉处理的颗粒进行了bsv/tsv，且产生的卡尔指数为21，这表明lmp
‑
3的流动性不及lmp
‑
1或
‑
2。
[0167][0168]
表4
‑
a
[0169]
实施例5
–
硬化剂
[0170]
硬化剂旨在增加制剂的硬度和熔化温度以改善可操作性和物理稳定性。硬化剂具有高硬度和高熔化温度。检查了硬化剂巴西棕榈蜡和小烛树蜡。巴西棕榈蜡具有约为82℃的熔融化度，并且具有极高的硬度。小烛树蜡具有约为68℃的熔化温度，并且以硬化其他蜡而闻名。选择巴西棕榈蜡和小烛树蜡作为硬化剂是因为它们具有与微晶蜡相似的结构，但具有较短的链长。类似的结构旨在改善lmp的处理特性，但避免lmp
‑
1的不良溶出性能。将筛选的制剂列于表5
‑
a中。
[0171][0172]
表5
‑
a
[0173]
进行了熔化物筛选。使赋形剂和辛酸甘油三酯(miglyol 808)油在100℃下熔化并充分混合。将小液滴轻弹到玻璃板上以观察冷却速率。收集凝结的液滴，并在感觉可操作性的手指之间摩擦。最后，将一个小的称量舟皿充满熔化物并使其固化。观察固化的熔化物是否出油。检查每种制剂的以下特征：赋形剂相是否分离；液滴冷却多快；操作时固化后的熔化物是否有污迹或油腻感；熔化物固化有多难；以及固化熔化物的“出”油。包括lmp
‑
2样品作为对照以与制剂进行比较。
[0174]
将lmp按物理特性排序。结果如表5
‑
b中所示。降低辛酸甘油三酯(miglyol 808)的装载显著提高了熔化物的可处理性。30％和40％装载的制剂比50％装载好得多，而45％的装载仅稍好一点。30％和40％的辛酸甘油三酯(miglyol)制剂在手指上不油腻，且非常坚硬。30％的辛酸甘油三酯(miglyol)药物装载是性能最好的制剂，而40％的装载位列第三。小烛树蜡制剂柔软且易于涂抹没有往前进行。表5
‑
c中显示了详细的熔化物筛选结果。
[0175]
[0176]
表5
‑
b
[0177][0178]
表5
‑
c
[0179]
50％药物装载的巴西棕榈蜡制剂具有与30％和40％辛酸甘油三酯(miglyol 808)/compritol制剂相似的可处理性特征，但是稍更软和稍更油腻。辛酸甘油三酯(miglyol 808)的制剂较硬，且具有较蜡状的质地。然而，巴西棕榈蜡制剂没有显示出油，而辛酸甘油三酯(miglyol 808)/compritol制剂却有。辛酸甘油三酯(miglyol 808)/compritol出油随着药物装载的降低而降低。在包含巴西棕榈蜡的制剂中未见出油。不受任何一种理论约束，lmp
‑
2的结块和不良流动性可能是由在颗粒之间形成的形成液桥的表面油造成。
[0180]
对lmp
‑
5、6、9和11进行了测试以发现熔化物开始混浊或固化的温度，以便标称旋转式圆盘的加工温度。使制剂在100℃下熔化，然后将温度以5℃的增量降低，并保持最少15分钟。下表5
‑
d中显示了每个熔化物混浊的温度范围。
[0181]
制剂lmp5lmp6lmp9lmp11浑浊温度65
‑
70℃70
‑
75℃65
‑
70℃80
‑
85℃
[0182]
表5
‑
d
[0183]
lmp
‑
5、6和9全部在单相中冷却并且具有65
‑
75℃的浑浊温度。在lmp
‑
11中观察到潜在的相分离。根据两相的颜色，在80
‑
85℃下，大约一半的熔化物固化，下半部分看起来富含巴西棕榈蜡，而上半部分为辛酸甘油三酯(miglyol 808)。将熔化物冷却至室温后，从顶部刮去少量，操作时感觉油腻且容易涂抹。当产生大的熔化物块时，未观察到这种相分离，这提示相分离缓慢并且在旋转式圆盘装置生产过程中可能不会发生。
[0184]
基于熔化物筛选结果，在compritol中具有较低药物装载的制剂最可能具有良好的溶出性能并具有改善的可操作性。巴西棕榈蜡改善了熔化物的物理特性，同时维持50％的有效载荷。
[0185]
实施例6
–
药物制剂
‑
lmp
‑
5、lmp
‑
7、lmp
‑
9、lmp
‑
11
[0186]
如本说明书中所述和在下表6
‑
a中所反映，制备了另外的药物制剂。
[0187][0188]
表6
‑
a
[0189]
旋转式圆盘装置设置几乎与实施例1相同，除外用加热的不锈钢盘替代尼龙盘。在每次运行开始之前，将不锈钢盘加热至熔化温度，并将其用于按比例放大批次。每种制剂的熔化温度高于来自表5
‑
d的浊点约10
‑
15℃。在添加辛酸甘油三酯(miglyol)之前，使赋形剂熔化并使其达到期望的熔化温度。加入油，并以2500rpm高剪切混合约10分钟，直至达到熔化温度。
[0190]
实施例7
–
制剂lmp
‑
5、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的表征
[0191]
对表6
‑
a中描述的制剂的物理特性、粒径和形态、密度和流量、熔点以及效价和纯度进行了表征。
[0192]
物理表征主要通过目视和物理观察来完成。在其收集袋中观察到核，并对它们的流动程度以及lmp核结块的趋势进行排序。核的物理稳定性通过在人的手指之间处理和摩擦核来确定。将物理观察结果列于表7
‑
a中。
[0193][0194]
表7
‑
a
[0195]
使用光学显微镜评估粒度分布。将lmp铺展到载玻片上的均匀层上，并使用校准的粒度分析软件测量约200
‑
300个颗粒。通过测量视野内的每个粒子，可以将选择偏差最小化。d10、d50、d90和d4,3统计量使用质量加权基准计算，因为来自激光衍射和筛分分析的历史lmp尺寸数据为质量/体积加权平均值。分布统计信息如表7
‑
b中所示。粒径在预期范围内，其中d50在150
‑
200μm。跨距
‑‑
范围从约0.6到大于0.9，这对于制造规模来说是典型的。
[0196]
制剂d10(μm)d50(μm)d90(μm)d4，3(μm)跨距lmp51101492051550.633lmp71291692381790.641lmp91361833002010.897lmp111401933182150.925
[0197]
表7
‑
b
[0198]
使用扫描电子显微镜检查(sem)使lmp成像以评估粒度、形状和形态。图9和图10以不同的放大倍数显示了代表性图像。对粒径和形状进行定性评估，并且在图10中以最佳方式观察到。粒径范围为直径50
‑
350μm，与使用光学显微镜测定与尺寸一致。大多数lmp为球形的，其中几乎没有小颗粒或卫星颗粒，表明雾化良好。
[0199]
图11显示了表面形态。形态与lmp
‑
1、2、3和4一致。基于compritol的lmp制剂lmp
‑
5、lmp
‑
7和lmp
‑
9具有粗糙的表面与表面起伏明显，没有明显的图案。单独的compritol典型地显示了出带有六边形表面晶体的光滑表面。该形态表明，辛酸甘油三酯(miglyol)改变了compritol的晶体结构。lmp
‑
2的制剂具有相似的表面形态，然而，与在lmp
‑
2上观察到的相比，lmp
‑
5上的表面皱纹更多。基于巴西棕榈蜡的lmp
‑
11具有完全不同的形态。lmp
‑
11显然更像是放气的气泡而非皱纹表面。形态与喷雾层化的涂层而不是与旋转式圆盘装置更一致。总体而言，lmp的形态并不典型。然而，该形态与lmp
‑
1、2、3和4一致。
[0200]
测量堆密度和拍实密度，并计算卡尔指数以量化与2％滑石粉作为流动助剂干混的lmp的流动性。结果如表7
‑
c中所示。4种制剂的堆密度相似，在0.49
‑
0.55g/cm3之间变化。最大卡尔指数为10，表明流动性良好。这与每种制剂的良好或非常好的流动性的目测观察
结果一致(参见表7
‑
a)。
[0201][0202]
表7
‑
c
[0203]
通过dsc对制剂进行表征，并与包括辛酸甘油三酯(miglyol 808)和赋形剂compritol 888和巴西棕榈蜡(参见表2
‑
c)的单个成分的热特性进行比较。使用实施例2中所述和表2
‑
b中概述的热
‑
冷却和冷
‑
热dsc法分析lmp样品。表7
‑
d包含每个样品的三个重复样本的平均值。
[0204]
[0205][0206]
表7
‑
d
[0207]
图12和图13显示了lmp
‑
2、7、9和11的热成像图叠加层，它们都包含50％的辛酸甘油三酯(miglyol 808)与compritol 888和/或巴西棕榈蜡。含有compritol和巴西棕榈蜡的lmp
‑
7和9具有较低的凝结和熔化温度，并且还显示了出最低的可操作性、较差的流动性和适度的团聚。具有最高的巴西棕榈蜡含量的lmp
‑
11表现出有较高的凝结温度和熔点，并且易于处理且流动性更好。有意义地的是，不含巴西棕榈蜡的lmp
‑
2的熔点高于分别含20％和10％巴西棕榈蜡的lmp
‑
7和9的熔点。此外，50％辛酸甘油三酯的lmp
‑
2的熔点稍高于40％辛酸甘油三酯的lmp
‑
5的熔点。与仅包含compritol和巴西棕榈蜡的lmp
‑
7和9相比，lmp
‑
2、5和11(仅包含compritol或巴西棕榈蜡的制剂)均显示了出更好的可操作性和流动性。对于包含两种赋形剂的制剂，这可能归因于熔点降低或与熔点降低有关。
[0208]
图14a
‑
h比较了lmp制剂与传入赋形剂(compritol 888和/或巴西棕榈蜡)。数据显示，对于所有4种制剂，添加辛酸甘油三酯(miglyol808)均降低赋形剂的熔点，表明至少具有部分混溶性。lmp
‑
7和9表现出与每种单独的赋形剂(compritol 888和巴西棕榈蜡)一致性的独特的热熔模式，表明这些赋形剂彼此不溶混，并可能在固态下发生相分离。观察到，含有两种赋形剂的lmp
‑
7和9的处理性能比含有一种赋形剂的lmp
‑
2、5和11的处理性能差。这将提示不利的混合导致基质的熔点降低。
[0209]
如实施例2所述，通过hplc
‑
cad分析了lmp制剂的效力和纯度(也参见表2
‑
f)。所有rrt＝1.36
‑
2.55的峰均可能是由未从纯赋形剂对照中提取的赋形剂引起的峰。不希望受任何一种理论约束，辛酸甘油三酯(miglyol 808)可以作为赋形剂的助溶剂起作用，与仅作为对照的纯成分相比，有助于从lmp基质中提取其他成分。
[0210]
将分析结果概括在表7
‑
e中。每个lmp的实施例色谱图如图14a
‑
14d所示。与lmp
‑
1、2和3的纯度分析相比，测得的辛酸甘油三酯(miglyol 808)的纯度曲线略有变化。
[0211]
进入辛酸甘油三酯(miglyol 808)中存在的所有杂质的量均保持不变，除了lmp
‑
5的rrt＝0.31&0.34，其分别显示了增加0.10％&0.12％。许多峰在低水平存在，并且可能与辛酸甘油三酯的降解或compritol 888或巴西棕榈蜡中存在的次要成分的提取差异有关。不希望受限于任何一种理论，这些峰可能与赋形剂有关。包括总杂质中的未确定峰，相对于lmp
‑
1、2和3中的辛酸甘油三酯(miglyol)的潜在杂质的量为0.83
–
2.00％。
[0212]
rrt峰idmiglyol 808％lmp
‑
5％lmp
‑
7％lmp
‑
9％lmp
‑
11％0.17 ndndndnd<loq0.27 nd<loqndndnd0.31 0.34％0.44％0.37％0.36％0.36％0.34 0.20％0.32％0.21％0.21％0.21％0.54 nd0.22％0.09％0.11％nd0.62 <loq0.06％0.06％0.06％0.06％0.65 0.07％0.07％0.06％0.07％0.06％0.69 nd0.09％0.21％ndnd0.80 nd0.43％0.13％nd0.08％0.83 ndndnd0.19％nd0.89 ndnd<loqndnd0.91c6:c8:c80.06％0.06％0.06％0.07％0.06％0.98 nd<loqndndnd1.00辛酸甘油三酯98.45％96.62％97.52％97.40％97.78％1.07 ndndnd0.07％nd1.10 0.08％0.09％0.09％0.08％0.10％1.11 ndndndnd0.06％1.19c10:c8:c80.80％0.82％0.81％0.82％0.83％1.25 nd0.08％ndndnd1.29 nd0.07％ndndnd1.30 ndndnd<loq0.06％1.32 <loq<loq<loqnd<loq1.36 ndndnd0.07％0.40％1.41 ndnd0.06％nd0.06％1.43 nd0.05％0.05％0.06％nd1.47 nd0.05％ndndnd1.90 nd0.09％0.07％<loq0.05％1.99 nd0.15％0.08％<loqnd2.09 nd0.44％0.18％0.11％nd2.12 nd<loq0.18％0.14％nd2.20 ndndnd0.24％nd
‑‑‑
总杂质1.55％3.55％2.72％2.67％2.37％ 含量测定(％lc)na96.1％95.9％94.3％94.1％
[0213]
loq>0.05％
[0214]
*对compritol对照中的面积校准的峰
[0215]
表7
‑
e
[0216]
使用实施例3(表3
‑
a，3
‑
b)中概述的方法在usp ii型进入溶出实验进入性能测试中测试lmp
‑
5、7、9和11制剂。图16显示了lmp
‑
5、7和9截止到24小时释放至100
±
2％lc。如预期的，释放速率趋势为，在lmp基质中添加更多的巴西棕榈蜡会减缓溶出。这是因为巴西棕榈蜡比compritol 888更具疏水性。lmp
‑
11显示了的性能不理想，并且在24小时不完全释放。在基本的lmp
‑
11制剂中添加成孔剂可通过提高水渗透性同时维持期望的物理和处理特性来提高溶出性能。
[0217]
lmp
‑
5(40/60辛酸甘油三酯(miglyol)/compritol)和lmp
‑
11(50/50辛酸甘油三酯(miglyol)/巴西棕榈蜡)在4种制剂中具有最佳的可处理性和物理稳定性。lmp
‑
11的流动性最初在制造后较差，但到第二天显著改善。油从表面至核的重新分布或晶体向蜡基质的变化可以解释这种现象。与两种重量百分比的滑石粉共混改善每种lmp制剂的流动性。lmp
‑
7(50/30/20辛酸甘油三酯/丙二醇/巴西棕榈蜡)和lmp
‑
9(50/40/10辛酸甘油三酯(miglyol)/丙二醇/巴西棕榈蜡)的可操作性和物理稳定性令人失望。处理时，核呈蜡质、结块且易于涂抹；lmp
‑
9比lmp
‑
7更容易。
[0218]
实施例8
–
制剂lmp
‑
5、lmp
‑
7、lmp
‑
9和lmp
‑
11的稳定性
[0219]
在一个、三个和六个月内检查了lmp
‑
5和lmp
‑
11的稳定性。将约8克lmp装入ldpe袋中，并用扎带将其密封。将样品上样至适合的腔室，使其不密封或不添加干燥剂即可打开。时间点和条件如表8
‑
a中所示。在取样之前，将样品拉出并使其平衡到实验室的环境条件。在分析期间和之后，将样品存储在环境条件下。
[0220][0221]
*偶然性条件
[0222]
表8
‑
a
[0223]
lmp
‑
5稳定性样品的溶出度表明lmp
‑
5在储存1个月后发生了物理变化，导致性能变化。lmp
‑
5的溶出结果如图17a所示。在40℃/75％rh下存储的lmp
‑
5与初始性能最相似。储存在5℃的lmp
‑
5在60分钟内具有相似的溶出速率，随后速率和程度降低，24小时后仅溶出了65％lc。在25℃/65％rh的温度下存放1个月后，溶出速率显著提高，导致截止到约3小时完全释放。储存后lmp的肉眼观察表明，在25℃/60％rh和40℃/75％rh下储存的lmp的外观
和流动性与初始样品相似。储存在5℃的lmp
‑
5会聚集并且显示了为油状，且流动性极差。
[0224]
在稳定储存1个月后，lmp
‑
11表现出与lmp
‑
5不同的行为。lmp
‑
11的结果如图17b中所示。25℃/60％rh和40℃/75％rh样品的释放速率和程度与初始lmp
‑
11相似。然而，在5℃下储存的lmp
‑
11样品具有更快的溶出速率。不希望受任何理论约束，辛酸甘油三酯的凝结或结晶可能已经在整个巴西棕榈蜡基质中形成了孔，从而提高了溶出速率。
[0225]
将lmp
‑
51个月稳定性样品在环境条件下放置1周后进行测试，以测试是否会对任何稳定性样品进行额外的退火处理。与初始测试相比，结果如图17c中所示。对于25℃/60％rh或40℃/75％rh的样品，未观察到溶出度差异，表明在1个月的储存后所有退火均已完成，并且在环境条件下储存后未发生变化。5℃的样品确实有所改善。不受任何理论约束，由于辛酸甘油三酯的凝结而在储存过程中逸出compritol基质的油可能已迁移回lmp基质中，而不是迁移至颗粒表面的游离油中。
[0226]
图18a
‑
h显示了在5℃1个月时lmp
‑
5形态的sem图像，与最初相比，具有一定的结节表面略多，并且在25℃/60％rh和40℃/75％rh下保存1个月的lmp
‑
5表面显然比最初的光滑一些。图19a
‑
h显示了最初和存放1个月后lmp
‑
11的sem图像。与初始温度相比，在5℃下储存的lmp
‑
11具有更光滑的表面，而在25℃/60％rh和40℃/75％rh下储存1个月的lmp
‑
11具有稍微更粗糙的表面。
[0227]
表8
‑
b中概括了在初始和1个月后lmp
‑
5和lmp
‑
11的热分析。储存后lmp
‑
5的热性能变化很小，但是存在一些小的差异。相对于初始制剂，所有样品的赋形剂熔化均在稍高的温度下发生，但是熔化和凝结事件的熔化热的振幅相似。不希望受任何理论约束，这些小的差异表明了如下可能性：样品的稳定性可能发生了物理变化，并且与初始样品相比，油与compritol的相分离更多。
[0228]
lmp
‑
11的关于稳定性的热信号与初始样品非常相似。一个可观察到的差异在于，在5℃样品中，冷
‑
热法中辛酸甘油三酯的熔化幅度比其他样品高得多。这种增加支持了溶出度数据的推定，即在5℃时辛酸甘油三酯已与巴西棕榈蜡发生相分离。
[0229]
[0230][0231]
表8
‑
b
[0232]
在储存1个月后，测试lmp
‑
5的效力和纯度的稳定性。结果显示了在表8
‑
c中。lmp
‑
5的初始纯度数据在1个月时的稳定性没有明显变化。
[0233]
rrt峰idlmp
‑
5,初始lmp
‑
5,5clmp
‑
5,25c/60％rhlmp
‑
5,40c/75％rh0.31 0.44％0.29％0.38％0.36％0.34 0.32％0.20％0.31％0.25％0.41 nd0.06％0.06％0.06％0.54 0.22％0.16％0.15％0.15％0.62 0.06％ndndnd0.65 0.07％0.06％0.06％0.07％0.69 0.09％ndndnd0.80 0.43％0.45％0.45％0.44％0.91c6:c8:c80.06％0.06％0.07％0.07％0.98 <loqndndnd1.00辛酸甘油三酯96.62％97.44％97.23％97.47％1.10 0.09％0.12％0.10％0.10％1.19c10:c8:c80.82％0.99％1.00％1.00％1.25 0.08％0.08％0.08％0.08％1.26 ndndnd0.15％1.29 0.07％0.06％0.05％0.06％1.32 <loq0.07％nd0.07％1.43 0.05％nd0.07％nd1.47 0.05％ndndnd1.90 0.09％ndndnd1.99 0.15％ndndnd
2.09 0.44％ndndnd2.12 <loqndndnd
‑‑‑
总杂质3.38％2.56％2.77％2.72％ 含量测定(％lc)96.1
±
0.3％97.2
±
2.1％99.5
±
0.0％99.4
±
0.3％
[0234]
nd＝未检测到
[0235]
loq>0.05％
[0236]
表8
‑
c
[0237]
lmp
‑
5和lmp
‑
11制剂在1个月的稳定性后的主要观察结果为，在5℃下储存可能引起相分离，这影响了溶出性能。
[0238]
实施例9
–
溶出促进剂
[0239]
lmp
‑
5和lmp
‑
11具有良好的可操作性和物理特性，但是溶出速率并非最佳。lmp
‑
5和lmp
‑
11分别在3小时和>24小时内释放了80％的api。添加溶出速率促进剂以维持或改善可操作性，同时增加溶出速率。溶解促进剂为水溶性或亲水性赋形剂，其通过增加水渗透到lmp中的速率和/或增加api从lmp制剂中的转运来加速溶出。制造方法遵循与前述相同的方法。
[0240]
制造了7种lmp制剂。表9
‑
a和表9
‑
b中显示了制造概述和可操作性等级。将lmp与2wt％的滑石粉共混，并根据可操作性和流动性进行排序。通过将lmp颗粒压在一根手指和配重船(weight boat)之间以确定颗粒保持得如何而确定硬度。通过在手指之间摩擦lmp并评估颗粒如何聚集、涂抹和软化来确定涂抹。
[0241]
除外brec1690
‑
155(40/50/10 ac
‑
1204/compritol/卵磷脂)和brec1690
‑
161(60/30/10 ac
‑
1204/巴西棕榈蜡/pvp k17)，添加成孔剂改善了所有制剂相对于lmp
‑
5的可处理性。即使当药物装载增加到50％，基于p407和pvp k17的lmp仍显示了出优异的物理特性。只有将药物装载提高到60％时，可操作性才变得不可接受。与熔化物筛选一致，p407制剂的流动性和物理特性显然在制造后的第二天有所改善。pvp
‑
va 64颗粒非常坚硬，然而，在制造过程中，它们显然彼此粘附并且与收集锥粘附在一起。在按比例扩大规模时，这可能会导致重大的制造问题。由于这个原因，这种制剂期望度较低。卵磷脂90g产生非常柔软的lmp颗粒，这在以物理方式处理时无法很好地流动或保持。
[0242][0243][0244]
表9
‑
a
[0245][0246]
表9
‑
b
[0247]
使用光学显微镜评估粒度分布。将lmp铺展到载玻片上的均匀层中，并使用校准的颗粒分级软件测量颗粒。通过测量视野内的每个粒子，可以将选择偏差最小化。d10、d50、
d90和d4,3统计量使用质量加权基准计算，因为来自激光衍射和筛分分析的历史lmp尺寸数据是质量/体积加权平均值。粒度分布统计数据如表9
‑
c所示。粒径在预期范围内，其中d50在150
‑
250μm。跨距约为0.4到大于0.7，其非常紧密，表明粒度分布均匀。
[0248][0249]
表9
‑
c
[0250]
使用扫描电子显微镜对颗粒成像以评估不同制剂的颗粒形态和表面特性。所有制剂的颗粒形态与光学显微镜观察结果一致，因为所有制剂均具有球形颗粒。两种最柔软的制剂(brec1690
‑
155，161)的表面看上去更柔软、油腻且刚性较低。这两种最柔软制剂唯一不同于lmp
‑
5、7、9和11的表面结构。代表性的图像如图20a
‑
h中所示。
[0251]
测量堆密度和拍实密度，并计算卡尔指数以量化与2％滑石粉作为助流剂干混的lmp的流动性。结果显示了在下表9
‑
d中(对于10ml量筒中的所有样品，n＝2)。7种制剂的堆密度相似，在0.49
‑
0.54g/cm3之间变化。最大carr指数为10，表明具有良好的流动性，然而，在通过目视，流动性最差的lmp制剂(brec1690
‑
161)的卡尔指数与其他制剂相同，并且流动性不好。所有其他制剂在目视上流动都很好。还对两种前导制剂brec1690
‑
156和brec1690
‑
162进行flowdex测量。结果见下表9
‑
d。flowdex是一种粉末流量测量值，其中目的在于找到材料将自由流过的孔的尺寸。将材料倾入带有落杆的圆柱容器中，并放置30秒以确保两次测试之间的一致性。然后将控制杆放下，其不会干扰材料，然后材料流过孔，或者不流过孔。为了通过该测试，材料必须连续3次流经相同尺寸的孔。
[0252][0253]
表9
‑
d
[0254]
使用本说明书在实施例3(表3
‑
a和3
‑
b)中概述的方法，在进入溶出性能测试中测试制剂brec1690
‑
155、156、160、161和162。通过添加水溶性成分(pvp 17pf、pvp
‑
va 64或泊洛沙姆p407)可以提高溶出速率。对制剂brec1690
‑
155、156、160、161和162测试溶出度。结果如图21所示。图22中显示了在先基于compritol的lmp(lmp
‑
2和lmp
‑
5)和brec1690
‑
155、156和162与溶出促进剂的比较。图23中显示了在先的巴西棕榈蜡lmp
‑
11和巴西棕榈蜡制剂与溶出促进剂的比较。
[0255]
对于所有5种制剂，与没有溶出促进剂的对照制剂相比，添加溶出促进剂改善了溶出速率。尽管含有巴西棕榈蜡的制剂改善显著，但性能最好的巴西棕榈蜡制剂的释放仍然比lmp
‑
5缓慢。额外的优化可能会导致基于巴西棕榈蜡的制剂更快的释放速率，但可能没有一种与具有溶出促进剂的基于compritol的制剂一样快。
[0256]
通过体外消化测试lmp
‑
5和brec1690
‑
156、
‑
157和162。消化介质的组成如表9
‑
e中所述。
[0257]
成分浓度250ml的质量(g)牛黄去氧胆酸钠(natdc)3mm0.43磷脂酰胆碱(pc)0.75mm0.16消化缓冲液至体积 [0258]
表9
‑
e
[0259]
消化缓冲液如表9
‑
f中所述。
[0260]
成分浓度1l缓冲液的质量(g)三
‑
马来酸酯2mm0.47氯化钠150mm8.77氯化钙二水合物1.4mm0.21氢氧化钠适量至ph 6.5
±
0.1 软化水达到体积 [0261]
表9
‑
f
[0262]
胰酶悬浮液在消化缓冲液中包含0.2g/ml猪胰酶(8x usp规格)的上清液。溶出方法使用0.6n naoh滴定剂，在37.0
±
1.0℃和ph值为6.5的条件下搅拌。
[0263]
图24显示了基于brec1690
‑
156、157和165compritol的制剂的体外消化曲线彼此非常相似，并且与辛酸甘油三酯(miglyol 808)油对照样品非常相似，并且都比lmp
‑
5体外消化快得多。检查了brec1690
‑
156和162的效力。其范围在96.9％lc
‑
98.1％lc。
[0264]
实施例10
–
brec1690
‑
156和162的稳定性
[0265]
在2周和1个月时检查了brec1690
‑
156和162的稳定性。将brec1690
‑
156和162添加到ldpe袋中，并用扎带将其封闭。在以下存储条件下，每个包装大约添加9克：25℃/60％rh，30℃/65％rh和40℃/75％rh，在5℃和
‑
20℃应急存储条件下每个包装添加6.5克。将样品放置在适当的稳定室中，该稳定室应保持开放状态，而无需密封或添加干燥剂。在取样进行测试之前，将样品拉出并使其平衡至环境条件。应变样品分别存储在5℃和
‑
20℃，并在每个时间点进行评估，并观察其外观。
[0266]
稳定储存2周后，测试两种制剂的25℃/60％rh和40℃/75％rh条件样品的体外消化性能。结果显示了在图25和图26中。含有泊洛沙姆p407的批次brec1690
‑
156与初始消化曲线相比无明显变化，表明可能没有退火作用。消化速率和程度也与辛酸甘油三酯(miglyol 808)对照样品非常相似。对于25℃/60％rh的样品，含有pvp 17pf的brec1690
‑
162 lmp批次几乎没有变化，然而，与初始/t0样品相比，在40℃/75％rh的条件下存储的样品显示了出更快的初始消化速率。消化大于p407 lmp，并且类似于辛酸甘油三酯(miglyol 808)对照。基于这些数据，p407 lmp可能在制造后不需要退火步骤，而pvp 17pf制剂可能需要退火。
[0267]
通过sem和照相机获得了brec1690
‑
156和162的2周稳定性样品的图像。(图27a
‑
d，图27a
‑
d)。lmp的表面结构对稳定性的外观可归因于初始sem图像中不存在的滑石粉。brec1690
‑
156 lmp的稳定性变化很小，而brec1690
‑
162 lmp的表面粗糙度却有明显增加。对于许多稳定性样品都观察到结块。但是，除了5℃的样品仍然略带油腻和结块外，所有样品在适度搅拌后都容易破碎并返回到自由流动的粉末中。
[0268]
稳定保存一个月后，测试两种制剂的25℃/60％rh和40℃/75％rh条件样品的体外消化性能。结果显示了在图24和图25中。含有泊洛沙姆p407的brec1690
‑
156 lmp批次相对于初始消化图谱没有明显变化，表明可能没有退火作用。消化速率和程度也与辛酸甘油三酯(miglyol 808)对照样品非常相似。对于25℃/60％rh的样品，含有pvp17pf的brec1690
‑
162 lmp批次几乎没有变化，但是与初始/t0样品和类似样品相比，在40℃/75％rh的条件下存储的样品显示了出更快的初始消化速率，并且与相同条件下储存的2周样品类似。消化大于p407 lmp，并且类似于辛酸甘油三酯(miglyol 808)对照。基于这些数据，p407 lmp可能不需要在制造后进行退火步骤，而pvp 17pf制剂可能需要进行小于或等于2周的退火处理，因为从2周分析开始消化速率没有明显变化。
[0269]
对于brec1690
‑
156和162的1个月稳定性样品，通过sem和照相机获得图像。(图29a
‑
d和图30a
‑
d)。brec1690
‑
156 lmp的稳定性变化很小，而brec1690
‑
162 lmp的表面粗糙度却有明显增加。对于许多稳定性样品都观察到结块。但是，除了5℃的样品仍然略带油腻和结块外，所有样品在适度搅拌下都容易破碎并返回到自由流动的粉末中。
[0270]
实施例11
–
另外的基质形成赋形剂
[0271]
根据以上实施例中描述的旋转式圆盘方法制备了另外的药物制剂，并通过初始熔化物筛选进行了评估。将测试制剂的生存力与50/40/10mct/compritol/pvp
‑
17(brec1690
‑
162)的基线样品进行比较。评估了基质和赋形剂比例不同的大约20种独特配方。手工测试测试制剂的柔软度，并根据brec1690
‑
162的物理属性进行衡量。如果测试制剂具有与brec1690
‑
162相差无几的快速凝结行为和物理稳定性，则会产生阳性结果。中间结果是具有可接受的物理稳定性的制剂可能不完全释放mct，阴性结果是手中的制剂过于柔软。
[0272]
总之，熔化物筛查显示了仅氢化蓖麻油(hco)不能提供期望的基质形成特性，但是当与其他蜡和赋形剂组合使用时确实提供了良好的结果。米糠蜡和巴西棕榈蜡单独或组合均显示了出良好的性能。
[0273]
基于熔化物筛选实验的结果，示范制剂如本说明书中所述并且反映在下表11
‑
a中。
[0274]
制剂50/25/25mct/hco/巴西棕榈蜡50/40/10mct/米糠蜡/pvp
‑
1750/30/20mct/巴西棕榈蜡/gelucire 50/1350/50mct/米糠蜡
[0275]
表11
‑
a
[0276]
除50/40/10mct/米糠蜡/pvp
‑
17外，所有上述制剂均与熔化状态的活性物质具有良好的混溶性，其迅速相分离成所出现的物质(基于相的颜色)，为pvp/mct相和熔化的米糠蜡相，其中一些pvp悬浮在米糠蜡相中。mct油在纯米糠蜡中的混溶性极佳至无需搅拌即可形成连续相的点。有意思的是，hco/巴西棕榈蜡系统很容易在液态下形成连续相，但在凝结时显然经历了赋形剂的相分离。
[0277]
在所有上述制剂中，热熔“轻拂”期间的凝结动力学相差无几，其中液滴的凝结在尺寸方面与在1
‑
2秒内迅速凝结的lmp的目标直径相差无几。
[0278]
单独的hco的不良性能是令人惊讶的，因为已知其高的熔化温度在凝结材料的硬度中起很大作用。hco(根据usp32
‑
nf27，tm＝85
‑
88℃)具有高于在先证实为良好的基质形成剂compritol(根据pheur 6.0，tm＝65
‑
77℃，usp
‑
nf中未指定)的熔化温度，在50/40/10mct/compritol/pvp
‑
17制剂中具有良好的硬度。
[0279]
不受理论约束，认为这提示甘油酯基质的脂肪酸链长度以及甘油酯的酯化水平在潜在机制中起作用，通过该机制，compritol/pvp
‑
17系统能够有效地封装mct油并形成硬颗粒。compritol是山萮酸(c22)的甘油一酸酯、甘油二酸酯和甘油三酯的混合物，而hco主要是羟基硬脂酸酯(c18)的甘油三酯。脂肪酸链中醇基团的存在也可能在hco制剂的柔软度中起作用。还值得注意的是，compritol能够溶解一定比例的pvp
‑
17，而hco则不能分散该聚合物，溶解少得多。这提示pvp
‑
17溶解在compritol中可能会进一步增加所观察到的制剂的物理稳定性。
[0280]
观察到基于巴西棕榈蜡/gelucire的制剂最初是柔软的和稍微柔韧性的，但是在室温储存过夜后显著硬化。不受理论的限制，认为这是由于额外的时间、使得巴西棕榈蜡的长链重排并更紧密地堆积的结果。在hco/巴西棕榈蜡系统中未注意到这种更改。通过gelucire 50/13的乳化作用可以减轻这种影响。在先基于巴西棕榈蜡的制剂利用了亲水性更高得多的溶出促进剂泊洛沙姆407。
[0281]
当对材料施加显著压力时，两种基于米糠蜡的制剂都散发出液态油，但是在固态
下没有油泄漏。此外，但不限于此，这说明mct油在基质凝结时分布在液体油囊中的整个米糠蜡基质中，而不是与基质混溶。
[0282]
实施例12
–
另外的溶出促进剂
[0283]
评估了增加水平的溶出促进剂以及可替代选择的亲水性溶出促进剂50/13以研究和改善mct油从lmp中的释放。选择50/13作为示范聚氧化乙烯甘油酯。它比泊洛沙姆更具疏水性，但维持足够的亲水性以使其能够溶解在水性介质中。
[0284]
具有50％mct装载的示范制剂如下表12
‑
a中所示。
[0285][0286]
表12
‑
a
[0287]
50/30/20mct/巴西棕榈蜡/p407过软而不能进一步测试，但是可以用硬化剂增强。50/40/10mct/微晶蜡/p407系统被认为是“中间”结果，因为尽管制剂的物理稳定性是可以接受的，但在这种相对较低的表面活性剂装载下，不太可能具有良好的溶出性能。
[0288]
实施例13
–
额外的制剂优化
[0289]
选择本说明书中所述的选择制剂以通过熔喷凝结(msc)方法进行进一步研究和生产。示范制剂如下表13
‑
a中所示。
[0290][0291]
表13
‑
a
[0292]
除米糠蜡/pvp
‑
17/gelucire 50_13系统外，所有测试的制剂迅速凝结并固化至足以用于msc加工的原型的硬度。除45/35/10/5mct/米糠蜡/pvp
‑
17/gelucire 50_13和40/50/10mct/米糠蜡/gelucire 50_13外，以上所有制剂均与熔化状态的活性物质具有良好的混溶性，观察到它们形成细雾状的细乳液。
[0293]
将gelucire 50_13添加到50/40/10mct/米糠蜡/pvp
‑
17中以将成分稳定成单相，但是pvp
‑
17形成硬附聚物并且不能分散。因这种观察结果，该测试已暂停。仍然可以使用溶出促进剂泊洛沙姆407测试这种方法，溶出促进剂泊洛沙姆407的亲水性比gelucire 50_13更像pvp
‑
17。先前的测试表明，少量的泊洛沙姆可以改善pvp
‑
17在熔化物中的分散性。
[0294]
根据初始测试结果，制造了6种制剂。制造的制剂如下表13
‑
b中所示。
[0295]
ꢀꢀ
brec2131
‑
06550/40/10mct/compritol/pvp
‑
17brec2131
‑
06640/48/12mct/compritol/pvp
‑
17brec2131
‑
05750/35/15mct/巴西棕榈蜡/gelucire 50_13brec2131
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05840/40/20mct/巴西棕榈蜡/gelucire 50_13brec2131
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05950/50mct/米糠蜡brec2131
‑
06050/50mct/微晶蜡
[0296]
表13
‑
b
[0297]
下表13
‑
c中给出了上述6种制剂的原型生产的生产概述。
[0298][0299]
*由于采购相同等级材料的供应链问题，批量减少。熔化物筛分剩余的总样品量用于生产原型
[0300]
表13
‑
c
[0301]
通过高速照相机评估了所有制剂的雾化。通过观察丝带状和均匀雾化进一步证实了所有制剂在生产条件下均可加工。
[0302]
通过sem评估了每种制剂的颗粒形状和表面形态，并将它们显示在图31a
‑
35c中。图31a
‑
c显示了50/35/15mct/巴西棕榈蜡/gelucire50/13lmp在50x(图31a)、300x(图31b)和1500x放大倍数(图31c)下的sem图像。图32a
‑
c显示了40/40/20mct/巴西棕榈蜡/gelucire50/13lmp在50x(图32a)、300x(图32b)和1500x放大倍数(图32c)下的sem图像。图33a
‑
c显示了50/50mct/米糠蜡lmp在50x(图33a)、300x(图33b)和1500x放大倍数(图33c)下的sem图像。图34a
‑
c显示了50/40/10mct/compritol/pvp
‑
17lmp在50x(图34a)、300x(图34b)和1500x放大倍数(图34c)下的sem图像。图35a
‑
c显示了40/48/12mct/compritol/pvp
‑
17lmp在50x(图35a)、300x(图35b)和1500x放大倍数(图35c)下的sem图像。
[0303]
通过引用将本说明书中引用的所有出版物和专利申请并入本说明书，就如同具体
和单独地显示了通过引用将每个单独的出版物或专利申请并入一样。
[0304]
尽管已经参照典型实施方案描述了本发明，但是本领域技术人员将理解，在不脱离本发明范围的情况下，可以进行各种改变并且可以用等同特征代替其要素。另外，在不脱离本发明的实质范围的情况下，可以做出许多变型以使特定的情况或要素适应本教导。因此，预期本发明不限于作为预期用于实施本发明的最佳方式而公开的特定实施方案，而是本发明将包括落入所附权利要求书范围内的所有实施方案。