一种小麦原浆的制备方法及其产品和应用与流程

文档序号:21180057发布日期:2020-06-20 17:44阅读:343来源:国知局
本发明属于化妆品
技术领域
,具体涉及一种小麦原浆的制备方法及其产品和应用。
背景技术
:肌肤屏障是由角质层和皮脂膜共同构建的一层保护性结构,其既可以缓冲理化刺激、有效抑制细菌滋生、阻隔细菌、病毒、真菌对肌肤的伤害,又可以锁住水分,防止水分蒸发,从而实现保持水分的功能。近年来随着环境污染及医美的盛行,大大削弱了肌肤屏障,使得肌肤对外界刺激的耐受性大大降低;同时一些婴幼儿,由于皮肤未发育成熟,所以免疫系统功能弱,不能像大人那样成为人体抵抗致病菌的第一道防线,所以需要一种安全温和的、能够改善肌肤耐受性的产品,构建肌肤屏障,抵御外界刺激。小麦胚芽中的蛋白质不仅含量丰富,而且其质量十分优良。蛋白质中氨基酸比例合理,含有人体中所必须的氨基酸,是一种完全蛋白质。小麦胚芽含人体必需的8种必需氨基酸,特别是在这些氨基酸中,蛋氨酸和组氨酸的含量都较高,尤其是一般谷物中短缺的能有效促进幼儿生长和发育的人类第一限制性氨基酸-赖氨酸的含量高达1.3-1.77%(水分含量14%),远远高于大米﹑面粉。然而长期以来,由于麦胚中抗营养因子植酸会明显降低矿物质与氨基酸的生物利用率,而且谷物中限制性氨基酸如赖氨酸和蛋氨酸在加工过程中易被破坏,因此含量往往都很低;导致小麦胚芽一直没有找到很好的开发途径,造成优质植物蛋白资源巨大浪费,小麦胚芽发酵不充分或发酵过程中出现氧化酸腐败现象,造成其在化妆品中的添加量抑制无法进一步得到提高。cn105831598a公开了一种混菌发酵小麦胚芽的制备方法,所述制备技术,包括以下步骤:(1)选取优质小麦,对小麦进行发芽,待麦芽刚萌发之后,干燥;(2)接种产香酵母、植物乳杆菌进行发酵;(3)发酵结束后,低温烘干;(4)对烘干后的小麦进行脱胚。该方法直接使用产香酵母、植物乳杆菌对小麦胚芽进行发酵,无法充分有效分解小麦的大分子物质,如纤维和大分子蛋白,提取率低,造成其得到的产品中低聚糖、多肽、氨基酸含量较低。因此,开发一种工艺简单、提取率高的小麦原浆的制备方法,使提取到的小麦原浆在化妆品中的添加量能够得到显著提升,以提高小麦原浆的利用率,在化妆品领域具有重要的意义和广阔的市场前景。技术实现要素:针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种小麦原浆的制备方法及其产品和应用。本发明所述小麦原浆的制备方法简单、提取率高,使提取到的小麦原浆在化妆品中的添加量能够得到显著提升,以提高小麦原浆的利用率;本发明所述原浆本身具体抑制致病菌功能,避免了添加量在50%以上应用时化妆品需要二次添加防腐剂的问题。为达此目的,本发明采用以下技术方案:第一方面,本发明提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:对小麦进行发芽培养,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的麦芽发酵培养基中加入蛋白胨和葡萄糖,再接种酵母菌,调节ph,进行发酵,得到小麦原浆。本发明本着“药食同源”的理念,选取优质小麦,对小麦进行发芽,待麦芽刚萌发之后,接种酵母菌进行发酵,发酵结束后,得到小麦原浆。提供一种源自小麦的、有效地提高皮肤的水分保持功能,并且能够改善肌肤微生态平衡,提高肌肤耐受力的小麦原浆。本发明中先加入蛋白胨和葡萄糖,再接种酵母菌,是由于三者相互配合,协同增效,蛋白胨和葡萄糖可以促进酵母菌发酵过程,时小麦胚芽中大分子蛋白质在内源性蛋白酶作用下水解为多肽及小肽,小肽在外肽酶作用下继续水解为游离氨基酸,从而使游离氨基酸的含量得到有效提升;同时增强了植酸酶活力,降低了抗营养因子植酸的含量;同时有效降低脂肪酶和脂肪氧化酶活力,使小麦原浆中多种活性成分如低聚糖、有机酸、多肽、谷胱甘肽、维生素e含量达到最高。优选地,步骤(1)中,所述发芽培养在人工气候箱中进行。优选地,步骤(1)中,所述发芽培养的温度为15-25℃,例如可以是15℃、16℃、17℃、18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃等。优选地,步骤(1)中,所述发芽培养的湿度为60-70%,例如可以是60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%等。优选地,步骤(1)中,所述发芽培养的时间为40-45h,例如可以是40h、40.5h、41h、41.5h、42h、42.5h、43h、43.5h、44h、44.5h、45h。优选地,步骤(1)中,所述麦芽发酵培养基的含水量为45-55wt%,例如尅是45wt%、46wt%、47wt%、48wt%、49wt%、50wt%、51wt%、52wt%、53wt%、54wt%、55wt%。合适的麦芽发酵培养基的含水量能进一步促进麦芽的发酵,提高其营养成分含量。若含水量过高,导致蛋白质基质颗粒间孔隙率的降低、粘性增加,增加了氧的传质阻力;而含水量过低,导致麦芽发酵培养基中营养成分溶解度的下降及较低的基质膨润度,微生物生长受抑制。优选地,步骤(2)中,以麦芽发酵培养基总质量为100%计,所述蛋白胨的添加量为0.1-0.5%,例如可以是0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%等。优选地,步骤(2)中,以麦芽发酵培养基总质量为100%计,所述葡萄糖的添加量为1-5%,例如可以是1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%等。优选地,步骤(2)中,所述蛋白胨和葡萄糖的质量比为(0.1-0.4):1,例如可以是0.1:1、0.15:1、0.2:1、0.25:1、0.3:1、0.35:1、0.4:1。蛋白胨和葡萄糖在此比例下能够最大程度地发挥酵母菌的发酵能力,从而进一步提高小麦原浆低聚糖、有机酸、多肽、谷胱甘肽、氨基酸和维生素e含量优选地,步骤(2)中,以麦芽发酵培养基总质量为100%计,所述酵母菌的接种量为1-5%,例如可以是1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%等。优选地,步骤(2)中,调节ph所用溶剂包括乙酸-乙酸钠缓冲液、磷酸钾缓冲液或柠檬酸钠缓冲液中的任意一种或至少两种的组合。优选地,步骤(2)中,所述ph为5-7。优选地,步骤(2)中,所述发酵的温度为25-35℃,例如可以是25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃等。优选地,步骤(2)中,所述发酵的时间为35-40h,例如可以是35h、36h、37h、38h、39h、40h等。优选地,步骤(2)中,所述发酵在摇床中进行,所述摇床的转速为50-150r/min,例如可以是50r/min、60r/min、70r/min、80r/min、90r/min、100r/min、110r/min、120r/min、130r/min、140r/min、150r/min等。优选地,步骤(2)发酵培养后还包括步骤(3)离心:将步骤(2)得到的小麦原浆离心,弃沉淀,收集上清液,优选地,步骤(3)中,所述离心的转速为4000-6000r/min,例如可以是4000r/min、4200r/min、4400r/min、4600r/min、4800r/min、5000r/min、5200r/min、5400r/min、5600r/min、5800r/min、6000r/min等,优选为5000r/min。优选地,步骤(3)中,所述离心的半径为8-12cm,例如可以是8cm、9cm、10cm、11cm、12cm等,优选为10cm。优选地,步骤(3)中,所述离心的时间为20-40min,例如可以是20min、22min、24min、26min、28min、30min、32min、34min、36min、38min、40min等。优选地,步骤(3)离心后还包括步骤(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过微滤膜进行过滤;优选地,步骤(4)中,所述微滤膜的孔径为0.1-5μm,例如可以是0.1μm、0.5μm、1μm、1.5μm、2μm、2.5μm、3μm、3.5μm、4μm、4.5μm、5μm等。优选地,步骤(4)中,所述过滤的压力为0.10-0.15mpa,例如可以是0.10mpa、0.11mpa、0.12mpa、0.13mpa、0.14mpa、0.15mpa。优选地,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为15-25℃,培养的湿度为60-70%,培养的时间为40-45h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为45-55wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为45-55wt%麦芽发酵培养基中加入0.1-0.5%的蛋白胨和1-5%的葡萄糖,再接种1-5%的酵母菌,调节ph至5-7,在摇床中以50-150r/min的转速,在25-35℃发酵35-40h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为4000-6000r/min,离心的半径为8-12cm的条件下,离心20-40min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为0.1-5μm的微滤膜,在操作压力为0.10-0.15mpa下过滤,得到所述小麦原浆。第二方面,本发明提供一种小麦原浆,所述小麦原浆由如第一方面所述的小麦原浆的制备方法制得。第三方面,本发明提供一种化妆品,所述化妆品包括如第二方面所述的小麦原浆。由本发明所述制备方法制备得到的小麦原浆能更为简单快捷的被肌肤常见的益生菌的代谢活动吸收利用,而不被肌肤中常见的致病菌(如:座疮丙酸杆菌、金黄葡萄球菌)吸收利用,从而帮助肌肤中的益生菌群健康成长,并竞争性抑制致病菌生长繁殖,建立有益于肌肤的良好益生菌生态环境;具有快速激活皮肤细胞,抑制皮肤炎症、强化肌肤角质保护屏障的功效。同时,本发明所述原浆本身具体抑制致病菌功能,可以不添加防腐剂进行保存,避免了在50%以上应用时化妆品二次添加防腐剂,引起肌肤过敏的可能性,为大规模配方应用提供了技术保障。优选地,所述小麦原浆的添加量为化妆品总重量的55-90%,例如可以是55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%或90%等。优选地,所述化妆品包括面膜、乳液、护肤霜、化妆水、洗发水、沐浴露或护发素。相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:(1)本发明所述小麦原浆的制备方法工艺简单,将蛋白胨和葡萄糖,再接种酵母菌相结合,用于小麦原浆的发酵,发酵结束后离心灭活,微滤膜膜分离,显著提高了小麦原浆中各活性物质的含量;(2)本发明所述制备方法使得小麦原浆可以在化妆品配方中添加量提高至到90%,从而明显能够有效提高肌肤耐受性,肌肤水分保持能力,改善肌肤微生态平衡;(3)本发明所述制备方法使得小麦原浆中赖氨酸含量增至1000μg/g以上,蛋氨酸含量增至200μg/g以上;由其制得的小麦原浆乳,在使用4h后,保湿效果好,皮肤含水量保持在35%以上,同时还能够显著的皮肤屏障修复功能,能够提升肌肤对刺激的耐受性,皮肤在sds溶液刺激后完整度仍能保持在80%以上。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。实施例1本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为20℃,培养的湿度为65%,培养的时间为42h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为50wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为50wt%麦芽发酵培养基中加入0.2%的蛋白胨和2%的葡萄糖,再接种3%的酵母菌,使用磷酸钾缓冲液调节ph至5,在摇床中以100r/min的转速,在30℃发酵36h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为5000r/min,离心的半径为10cm的条件下,离心30min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为0.1μm的微滤膜,在操作压力为0.12mpa下过滤,得到所述小麦原浆。实施例2本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为20℃,培养的湿度为65%,培养的时间为42h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为50wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为50wt%麦芽发酵培养基中加入0.5%的蛋白胨和3%的葡萄糖,再接种3%的酵母菌,使用磷酸钾缓冲液调节ph至6,在摇床中以100r/min的转速,在30℃发酵36h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为5000r/min,离心的半径为10cm的条件下,离心30min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为0.2μm的微滤膜,在操作压力为0.12mpa下过滤,得到所述小麦原浆。实施例3本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为20℃,培养的湿度为65%,培养的时间为42h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为50wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为50wt%麦芽发酵培养基中加入1%的蛋白胨和4%的葡萄糖,再接种3%的酵母菌,使用磷酸钾缓冲液调节ph至7,在摇床中以100r/min的转速,在30℃发酵36h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为5000r/min,离心的半径为10cm的条件下,离心30min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为0.5μm的微滤膜,在操作压力为0.12mpa下过滤,得到所述小麦原浆。实施例4本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为20℃,培养的湿度为65%,培养的时间为42h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为50wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为50wt%麦芽发酵培养基中加入4%的蛋白胨和10%的葡萄糖,再接种3%的酵母菌,使用磷酸钾缓冲液调节ph至6,在摇床中以100r/min的转速,在30℃发酵36h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为5000r/min,离心的半径为10cm的条件下,离心30min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为2μm的微滤膜,在操作压力为0.12mpa下过滤,得到所述小麦原浆。实施例5本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,所述小麦原浆的制备方法包括如下步骤:(1)发芽培养:在人工气候箱中对小麦进行发芽培养,培养的温度为20℃,培养的湿度为65%,培养的时间为42h,待麦芽刚萌发后,粉碎,得到含水量为50wt%麦芽发酵培养基;(2)发酵培养:向步骤(1)得到的含水量为50wt%麦芽发酵培养基中加入4%的蛋白胨和10%的葡萄糖,再接种3%的酵母菌,使用磷酸钾缓冲液调节ph至7,在摇床中以100r/min的转速,在30℃发酵36h,得到小麦发酵液;(3)离心:将步骤(2)得到的小麦发酵液在转速为5000r/min,离心的半径为10cm的条件下,离心30min,弃沉淀,收集上清液;(4)过滤:将步骤(3)得到的上清液通过孔径为5μm的微滤膜,在操作压力为0.12mpa下过滤,得到所述小麦原浆。实施例6本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述麦芽发酵培养基的含水量为40wt%,其他制备步骤同实施例1。实施例7本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述麦芽发酵培养基的含水量为60wt%,其他制备步骤同实施例1。实施例8本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述蛋白胨的添加量为0.1%,所述葡萄糖的添加量为5%,其他制备步骤同实施例1。实施例9本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述蛋白胨的添加量为0.5%,所述葡萄糖的添加量为1%,其他制备步骤同实施例1。实施例10本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述酵母菌的接种量为1%,其他制备步骤同实施例1。实施例11本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,所述酵母菌的接种量为5%,其他制备步骤同实施例1。实施例12本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(4)不采用微滤膜过滤,而采用纱布过滤,其他制备步骤同实施例1。实施例13本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(4)微滤膜的孔径为0.05μm,其他制备步骤同实施例1。实施例14本实施例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(4)微滤膜的孔径为6μm,其他制备步骤同实施例1。对比例1本对比例提供一种玉米原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,将小麦原料替换为玉米,其他制备步骤同实施例1。对比例2本对比例提供一种绿豆原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,将小麦原料替换为绿豆,其他制备步骤同实施例1。对比例3本对比例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(2)麦芽发酵培养基中不添加蛋白胨,所述葡萄糖含量增至2.2%,其他制备步骤同实施例1。对比例4本对比例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(2)麦芽发酵培养基中不添加葡萄糖,所述蛋白胨含量增至2.2%,其他制备步骤同实施例1。对比例5本对比例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,将酵母菌替换为乳酸菌,其他制备步骤同实施例1。对比例6本对比例提供一种小麦原浆的制备方法,与实施例1的区别仅在于,步骤(2)省略调节ph步骤,此时测得发酵培养基中的ph为7.5,其他制备步骤同实施例1。应用实施例1本应用实施例提供一种小麦原浆乳,所述小麦原浆乳按重量百分含量计包括如下各组分:所述小麦原浆乳的制备方法如下:(1)将a相原料加热至80℃,搅拌分散均匀,待用;(2)将b相原料加热至80℃,搅拌溶解均匀;(3)抽a相原料抽入b相进行均质搅拌,搅拌均匀后降温;(4)降温至45℃加入c相原料,搅拌分散均匀。抽真空脱泡,得到小麦原浆乳。应用实施例2本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例2制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例3本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例3制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例4本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例4制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例5本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例5制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例6本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例6制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例7本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例7制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例8本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例8制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例9本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例9制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例10本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例10制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例11本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例11制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例12本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例12制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例13本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例13制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用实施例14本应用实施例提供一种小麦原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为实施例14制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例1本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例1制备的玉米原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例2本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例2制备的绿豆原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例3本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例3制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例4本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例4制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例5本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例5制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。应用对比例6本应用实施例提供一种原浆乳,与应用实施例1的区别在仅于,将实施例1制备的小麦原浆分别替换为对比例6制备的小麦原浆,其他组分含量及制备方法不变。试验例1安全性能测试对实施例1-14和对比例3-6制备的小麦原浆,对比例1玉米原浆、对比例2绿豆原浆及应用实施例1-14制备的小麦原浆乳进行安全性能测试,方法如下:1)红细胞溶血实验红细胞悬液的制备:选择健康家兔,心脏取血9ml,加入2%的草酸钾溶液1ml,离心,弃去上清液,用20mmol/l的pbs溶液将沉淀物稀释至20ml,4℃保存备用。选择样品用pbs溶液稀释至不同浓度,每个样品设置5个浓度梯度。取10ml待测样品的稀释液,加入200μl上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/ml),以蒸馏水作为全溶血对照,pbs溶液作为阴性对照,轻轻混匀,37℃下孵育30min,在2000r/min的转速下离心10min,取上清液,用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(a560),按如下公式计算溶血率;绘制溶血率~样品浓度标准曲线,计算50%红细胞发生溶血时的样品浓度(hd50)。(2)蛋白变性实验:将样品用pbs溶液稀释至10g/l,取10ml待测样品的稀释液,加入200μl上述红细胞悬液,以蒸馏水作为空白对照,1mg/ml十二烷基硫酸钠(sds)溶液作为阳性对照,轻轻混匀,37℃下孵育30min,在2000r/min的转速下离心10min,取上清液,用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度a540和a575,按照如下公式计算蛋白变性指数(di);其中,r1=空白对照组a575/空白对照组a540,r2=实验组a575/实验组a540,r3=阳性对照组a575/阳性对照组a540。根据l/d值对待测样品的刺激性进行评价,其中l/d值为hd50/di,红细胞溶血实验刺激性分级标准如下表1所示:表1l/d分级>100无刺激性10<l/d≤100微刺激性1<l/d≤10轻度刺激性0.1<l/d≤1中度刺激性上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表2所示:表2由表2的红细胞溶血实验结果可知,本发明实施例1-14制备的小麦原浆、应用实施例1-14制备的小麦原浆乳的l/d均大于100,刺激性分级为无刺激,对比例1的l/d67.3,为微刺激性,表明发酵对象对最终产品有明显影响。试验例2氨基酸含量测定采用氨基酸分析仪测定对实施例1-14、对比例3-6制备的小麦原浆及空白对照组小麦胚芽发酵前的游离氨基酸含量。分别15g样品中加入60ml50mm的tris-hcl(ph8.8)溶液,4℃条件下磁力搅拌1h,9000r/min离心20min。取上清液,加入9倍体积的1%磺基水杨酸沉淀蛋白,8000r/min离心15min,上清液用于测定游离氨基酸含量。具体测试结果如表3所示:表3由表3的测试结果可知,由实施例1-14制备方法制备得到的小麦原浆赖氨酸在1000μg/g以上,蛋氨酸在200μg/g以上,这说明本发明所述制备方法解决了谷物中限制性氨基酸如赖氨酸和蛋氨酸在加工过程中易被破坏,含量很低的问题。本发明中先加入蛋白胨和葡萄糖,再接种酵母菌,是由于三者相互配合,协同增效,蛋白胨和葡萄糖可以促进酵母菌发酵过程,时小麦胚芽中大分子蛋白质在内源性蛋白酶作用下水解为多肽及小肽,小肽在外肽酶作用下继续水解为游离氨基酸,从而使游离氨基酸的含量得到有效提升。试验例3微生物抑制测试测试实施例1-14、对比例3-6制备的小麦原浆在益生菌与病原菌同时存在时对菌群生产情况的影响和作用。分别配制质量浓度为10%的小麦原浆然后将菌群在上述介质中培育,24小时后计算细菌数目。菌群为干燥棒状杆菌、白色链球菌、金黄色葡萄球菌混合菌群,具体测试结果如表4所示:表4由表4的测试结果可知,由实施例1-14制备方法制备得到的小麦原浆对益生菌有促进作用,对致病菌有明显抑制作用;而对比例1-2对益生菌反而有抑制,对致病菌有促进。对比例3-6虽然对对益生菌有一定的促进作用,对致病菌有一定的抑制作用,但比本申请制备方法制备得到的小麦原浆的测试效果明显下降。说明本发明所述小麦原浆的制备方法将蛋白胨和葡萄糖,再接种酵母菌相结合,用于小麦原浆的发酵,发酵结束后离心灭活,微滤膜膜分离,显著提高了小麦原浆中各活性物质的含量,从而为益生菌提供食物,但不给致病原提供,抑制致病菌的生长,可以维持肌肤表层微生态的平衡。试验例4稳定性测试按照gbt34857-2017国家标准,应用实施例1-14和应用对比例1-6制备的小麦原浆乳进行取样,将其封装于透明化妆品瓶以及测试样品瓶中,分别置于-18℃、25℃、45℃、48℃实验条件下,对外观、香味、ph值、粘度以及其他项目进行为期30天的持续测试,观察是否出现析水、分层、分离、沉淀、变色、异味、破乳等不良现象,具体测试结果如表5所示(“√”代表通过该温度下的稳定性测试):表5测试样品-18℃25℃45℃48℃应用实施例1√√√√应用实施例2√√√√应用实施例3√√√√应用实施例4√√√√应用实施例5√√√√应用实施例6√√√√应用实施例7√√√√应用实施例8√√√√应用实施例9√√√√应用实施例10√√√√应用实施例11√√√√应用实施例12√√√√应用实施例13√√√√应用实施例14√√√√应用对比例1√√××应用对比例2×√√√应用对比例3√√√√应用对比例4√√√√应用对比例5√√√√应用对比例6√√√√有上述表5的测试数据可知,由实施例1-14制备得到的小麦原浆添加在化妆品中,全部通过稳定性测试,无析水、分层、分离、沉淀、变色、异味、破乳等不良现象。同时在相同的乳化体系中如需要添加高比例的小麦原浆需要搭配合理的乳化剂,mon-l:a165=1:1是理想配比。而对比例1-2制备得到的制备的原浆乳在低温和高温测试中均出现不同程度的析水、分层、分离、沉淀、变色、异味、破乳现象,这说明本发明的制备方法制备得到的小麦原浆相容性好,使得小麦原浆可以在化妆品配方中添加量得到显著提高。试验例5保湿性测试据化妆品行业标准《化妆品保湿功效评价指南》,选取20名志愿者,按随机表在其双前臂分别使用应用实施例1-14和应用对比例1-6制备的小麦原浆乳,于0、30min、1h、2h和4h时进行皮肤含水量测量,从而对产品在皮肤表层的保湿功效进行评估,具体测试结果如表6所示:表6测试样品030min1h2h4h应用实施例13065574844应用实施例23066584542应用实施例33063564643应用实施例43064554541应用实施例53060544340应用实施例63058504039应用实施例73055494038应用实施例83054483935应用实施例93057503835应用实施例103057503534应用实施例113054453836应用实施例123050453635应用实施例133052423535应用实施例143053433535应用对比例13042463231应用对比例23040383231应用对比例33035353230应用对比例43036343029应用对比例53035323028应用对比例63034313130由表6结果表明,在测试的4小时内,应用实施例1-14制备的小麦原浆乳的水分值保持在35%以上,显著优于应用对比例1制备的玉米原浆乳、对比例2制备的绿豆原浆乳、对比例3-6制备的小麦原浆乳水分值;使用4h后,说明本发明的小麦原浆还具有较好的提升皮肤屏障功能,帮助皮肤锁住水分。本发明所述小麦原浆的制备显著提高了小麦原浆中各活性物质的含量,添加在化妆品配方中明显能够有效提高肌肤水分保持能力。试验例6皮肤屏障测试临床试验:选取100位具有冬季皮肤干燥症状的受试者,分为20组,每组5人;测试参数:tewl(皮肤屏障完整性的主要指标,红斑及炎症的标志);试验区域:前臂应用2%的sds24h破坏皮肤屏障(封闭环境)去除残余的sds溶液每天应用两次试验产品(2mg/cm2),将未损失未处理皮肤完整度计tewl为100%,将未使用任何乳液处理组作为空白对照组;具体测试结果如表7所示:表7由表7的测试结果可知,使用应用实施例1-14制备的小麦原浆乳的皮肤完整度保持在80%以上,显著优于应用对比例1制备的玉米原浆乳、对比例2制备的绿豆原浆乳、应用对比例3-6制备的小麦原浆乳的皮肤完整度值。这充分说明本发明所述小麦原浆的制备方法显著提高了小麦原浆中各活性物质的含量,使其添加在化妆品配方中不仅能够有效提高肌肤水分保持能力,而且还能显著的皮肤屏障修复功能,能够提升肌肤对刺激的耐受性。申请人声明,本发明通过上述实施例来说明小麦原浆的制备方法及其产品和应用,但本发明并不局限于上述实施例,即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属
技术领域
的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。当前第1页12
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