一种达那唑纳米粒的制备方法及含其的药物组合物

本发明涉及一种达那唑纳米粒的制备方法及含其的药物组合物。

背景技术：

1、达那唑(danazol,daz)是一种合成类固醇类似物，具有很强的促性腺激素特性，被广泛应用于子宫内膜异位症、纤维囊性乳腺病、乳腺癌及白血病的治疗。在生物药剂学分类系统中，daz由于较低的水溶性(<0.001mg/ml)及较高的脂溶性(log p＝4.53)被列为bcsii类药物，溶出速率为影响其口服吸收的限速步骤，文献报道，普通daz胶囊(daz:蔗糖＝1:1)的口服生物利用度仅11％。因此改善daz的性质对于其口服固体制剂的开发具有重要意义。

2、为提高daz的生物利用度，已有相关研究将daz制备成脂质制剂、离子液体、自微乳(纳米乳)化给药系统、共晶、固体分散体等，此外，添加环糊精等增溶剂、设计daz的氨基酸前药及利用多孔沸石等作为无机载体的方法也能有效促进daz口服给药后体循环中药物水平的提高。

3、将难溶性药物制备成纳米分散状态，不仅能提高药物的溶出度，也可能改善药物的生物性能。有文献研究利用糖胆酸钠等作为稳定剂，通过湿法研磨/高压均质的方法制备daz纳米悬浮液，再通过冻干/喷雾干燥等技术得到纳米晶，以改善daz的释放。美国专利us5573783同样采用湿法研磨的方法，将低水溶性药物与稳定剂、分散剂制备成纳米悬浮液，作为颗粒剂的包衣层，以此改善难溶性药物的生物利用度。然而这类利用top-down技术减小药物粒径的方法通常需要较大的能量输入，对设备的要求及成本一般较高，且存在不适用于稳定性差的药物、过程难以调控等弊端。美国专利us20110182946报道了通过沉淀、湿法研磨、乳滴模板、喷雾等过程制备难溶性药物纳米粒的方法，其制备工艺除了top-down技术，还包括过程更可控的bottom-up技术，但其所得载药纳米粒中药物以无定型状态存在，这种高势能的状态可能对药物的稳定性产生不利影响。美国专利us20140271884-a报道了利用bottom-up技术制备纳米粒的方法，以两亲性聚合物为载药基质，通过反溶剂法得到能够在水相中有效分散的药物-聚合物纳米粒，然而以两亲性聚合物作为稳定剂时，需要辅以高强度混合设备才能够将粒子控制在纳米尺度范围内，且专利所用两亲性聚合物难以提供很好的稳定性，仅能在数天时间内维持复合粒子稳定。文献也报道了利用反溶剂法制备daz纳米粒的策略，且不涉及其他添加剂，所得纳米粒的溶出性能有极大的改善，但为保证纳米尺度粒子的有效形成及稳定，该研究需要使用特殊的微反应器，对设备及操作的要求较高，且未考察所得纳米粒子在存储过程中的稳定性。美国专利us20180344645联合使用top-down和bottom-up技术，利用结晶器和高压均质的联用装置，制备难溶性药物的纳米晶悬浮液，工艺复杂难以产业化，同时也存在高设备要求的不利因素。

4、因此，如何避免高能输入对药物活性的影响，减少特殊设备产生的高额成本的研究是很有必要的。

技术实现思路

1、本发明所要解决的问题是克服了现有技术中高能输入对药物稳定性的不利影响，以及特殊先进设备产生的高额成本的缺陷，提供了一种达那唑纳米粒的制备方法及含其的药物组合物，该制备方法工艺简便、过程可控，制备得到的daz纳米粒稳定性良好，可以提高溶出度，改善其释放性能。

2、本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题。

3、利用较为温和简便的bottom-up技术调控药物粒子的结晶过程及理化性质，可以确保制备过程及最终产物的性质可控，在产品的研发和生产中具有明显的优势。酪蛋白酸钠(sodium caseinate，sc)在水性体系中具有良好的分散性及两亲性，作为药物载体可以实现快速释放。同时sc能够与药物相互作用形成稳定的复合粒子，进而提高药物在水相溶液中的溶解性及稳定性。

4、本发明提供了一种达那唑纳米粒的制备方法，其包括以下步骤：将daz良溶剂相和含有sc的daz不良溶剂相混合，即可；其中：

5、所述daz良溶剂相为含有daz和有机溶剂的有机相；

6、所述含有sc的daz不良溶剂相为含有sc和水性溶剂的水相。

7、本发明中，所述daz良溶剂相的制备方法可为本领域常规，优选地，可通过下述步骤：将daz溶解于有机溶剂中，得到daz良溶剂相(有机相)。

8、其中，所述有机溶剂的种类可为本领域常规，优选为甲醇、乙醇、二甲基亚砜和n,n-二甲基甲酰胺中的一种或多种，例如乙醇。

9、其中，所述有机溶剂的用量为能够完全溶解daz即可。

10、其中，所述良溶剂相中daz的浓度可为5-50mg/ml，例如10mg/l、15mg/l、20mg/l、30mg/l和50mg/l，优选为10-20mg/ml。

11、其中，所述溶解的方式可为本领域常规，优选为加热、超声和涡旋中的一种或多种，例如水浴加热。

12、所述加热的温度低于有机溶剂的沸点。

13、其中，所述溶解过程中，优选地，还包括去除良溶剂相中的不溶性杂质的处理。

14、所述去除的方式可为本领域常规，优选为微孔滤膜过滤、纱布过滤和滤纸过滤中的一种或多种，例如微孔滤膜过滤。

15、当去除的方式为微孔滤膜过滤时，所述微孔滤膜的孔径可为0.45～10μm，例如0.45μm。

16、本发明中，所述含有sc的daz不良溶剂相的制备方法可为本领域常规，优选地，可通过下述步骤：将sc溶解于水性溶剂中，得到含有sc的daz不良溶剂相(水相)。

17、其中，所述水性溶剂的种类可为能够溶解sc、不溶解daz，且可以与所述有机溶剂混溶的水性溶剂，优选为去离子水和/或ph＞6.5的缓冲液，例如去离子水。

18、其中，所述水性溶剂的用量能够完全溶解sc即可。

19、其中，所述含有sc的daz不良溶剂相中sc的浓度可为0.5-20mg/ml，例如0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、10mg/ml、15mg/ml和20mg/ml，优选为1-15mg/ml，更优选为2-10mg/ml。

20、其中，所述溶解的方式可为本领域常规，优选为搅拌和/或超声。

21、其中，所述溶解过程中，优选地，还包括去除不良溶剂中的不溶性杂质的处理。

22、所述去除的方式可为本领域常规，优选为微孔滤膜过滤、纱布过滤和滤纸过滤中的一种或多种，例如微孔滤膜过滤。

23、当去除的方式为微孔滤膜过滤时，所述微孔滤膜的孔径可为0.45～10μm，例如0.45μm。

24、本发明中，所述daz良溶剂相与所述含有sc的daz不良溶剂相的体积比可为1:(20-200)，例如1:30、1:50、1:60、1:100、1:150和1:200，优选为1:(30-150)。通过改变daz良溶剂相与含有sc的daz不良溶剂相的体积比，调节过饱和度使药物完全析出。

25、本发明中，所述daz与所述sc的质量比可为1:(1-50)，例如1:1、1:3、1:5、1:20和1:50，优选为1:(3-20)。

26、本发明中，所述混合方式可为本领域常规，优选为搅拌。通过搅拌等方式加快混合，促进体系均匀。

27、其中，当混合方式为搅拌时，所述搅拌的时间可为本领域常规，优选为5～50min，例如30min。

28、本发明中，所述混合的温度可为0-40℃，优选为4-37℃，例如4℃、25℃和37℃。

29、本发明中，所述混合后还可包括析出沉淀、干燥的操作。

30、其中，所述干燥的方式可为本领域常规，优选为冷冻干燥或者喷雾干燥，例如冷冻干燥。

31、本发明还提供了一种sc在制备daz纳米粒中作为稳定剂的应用。

32、本发明中，优选地，所述sc作为唯一稳定剂。

33、本发明还提供了一种含daz纳米粒的溶剂相，其采用上述的达那唑纳米粒的制备方法制得。

34、本发明中，所述daz纳米粒的粒径可为160～380nm，优选为190～350nm。

35、本发明中，所述daz纳米粒的差示扫描量热曲线可在226℃呈现最大吸收峰，可如图8所示。

36、本发明还提供了一种冻干粉末，其包括daz纳米粒和sc。

37、本发明中，所述daz纳米粒的粒径可为160～380nm，优选为190～350nm。

38、本发明中，所述daz纳米粒的差示扫描量热曲线可在226℃呈现最大吸收峰，可如图8所示。

39、本发明还提供了一种所述冻干粉末的制备方法，其包括下述步骤：将所述含daz纳米粒的溶剂相经冻干，即可。

40、本发明还提供了一种药物组合物，其包括daz纳米粒、sc和daz不良溶剂，或者其包括上述的冻干粉末和daz不良溶剂。

41、本发明中，所述daz纳米粒的粒径可为160～380nm，优选为190～350nm。

42、本发明中，所述daz纳米粒的差示扫描量热曲线可在226℃呈现最大吸收峰，可如图8所示。

43、本发明中，所述daz不良溶剂可为水性溶剂，优选为去离子水和/或缓冲液，例如去离子水。

44、其中，所述水性溶剂的种类可为能够溶解sc、不溶解daz的水性溶剂。

45、本发明中，所述药物组合物可采用下述方法制得：将所述daz纳米粒、所述sc和所述daz不良溶剂混合，即可；或者，将所述冻干粉末和所述daz不良溶剂混合，即可。

46、本发明中，所述药物组合物可为口服制剂，例如混悬剂。

47、在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

48、本发明所用试剂和原料均市售可得。

49、本发明的积极进步效果在于：

50、(1)本发明采用了sc作为daz结晶过程中的稳定剂，调控了daz在反溶剂过程中的结晶，与daz相互作用形成稳定的复合粒子，显著提高了daz的溶出速率，改善了daz产品的形态及制剂性质，制得的daz纳米粒晶型稳定、粒径小、分布窄、溶出度高，可以在溶液中连续14天内粒径保持稳定。

51、(2)本发明采用bottom-up技术，利用反溶剂法制备难溶性药物daz纳米粒，其操作简便、成本低廉、过程可控，为解决daz溶出限制生物利用度的问题提供了可行的解决方案，对于工业化制备daz纳米粒具有重要的应用前景。