1.本发明属于生物医药的技术领域，具体是涉及一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺。
背景技术：
2.近30年来，我国糖尿病患病率显著增加。1980年全国14省市30万人的流行病学资料显示，糖尿病的患病率为0.7％。2007
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2008年,在中华医学会糖尿病学分会组织下，全国14个省市进行了糖尿病的流行病学调查。结果显示我国20岁以上的成年人糖尿病患病率为9.7％。
3.利拉鲁肽是一种人胰高糖素样肽-1(glp-1)类似物，可用于2型糖尿病患者的辅助血糖控制。
4.利拉鲁肽是白色或类白色的粉末。在碱性溶液中可自由溶解(》270mg/ml)，但是其水溶液溶解度在ph值7以下时降低，在ph值4-5时达到最低水平(约0.05mg/ml)。溶解度在ph值为2.5时略微上升(≤0.8mg/ml)。利拉鲁肽可溶于甲醇(68mg/ml)，几乎不溶于乙醇(1.1mg/ml)。利拉鲁肽的等电点约为4.9。
5.目前，市场是已有诺和诺德公司的利拉鲁肽注射剂(诺和力)上市，该剂型需要每天注射。市场上目前还没有利拉鲁肽的缓释微球剂型。故可以开发一种利拉鲁肽的改良剂型 (缓释微球)，补充市场上的需要，增加患者的依从性
技术实现要素：
6.本发明主要是解决上述现有技术所存在的技术问题，提供一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺。
7.本发明的上述技术问题主要是通过下述技术方案得以解决的：一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
8.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
9.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
10.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂与生物可降解基质材料；
11.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
12.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
13.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂中固化；
14.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
15.作为优选，所述保护剂为蔗糖、海藻糖、明胶、甘露醇、甘氨酸、赖氨酸或人血清白蛋白中的一种或几种以上的混合物。
16.作为优选，所述步骤(d)中搅拌的转速为450～550rpm。
17.作为优选，所述生物可降解基质材料为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物,乙交酯
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丙交酯共聚物，聚乙醇酸、聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸-聚己内酯共聚物或plcg-聚己内酯，或其中任意两种或两种以上的混合物。
18.作为优选，所述烷类固化剂包括乙醇、正庚烷、花生油。
19.作为优选，所述聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为10mg/ml～ 500mg/ml。
20.本发明具有的有益效果：
21.1、该利拉鲁肽缓释微球制备工艺，通过称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物，置于有机溶剂中溶解，称取一定量的利拉鲁肽，置于溶液中，加入一定量的二甲基硅油的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂中固化，固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球，利拉鲁肽缓释微球制剂为新剂型改良，研发的周期可以减少。原有的注射剂为每天改药，比较麻烦，另该注射剂费用比较高。缓释微球制剂可以延长使用，为一周或两周改药，增加患者的依从性，减少患者的经济负担。
22.2、该利拉鲁肽缓释微球制备工艺，通过加入保护剂可以维持利拉鲁肽的生物活性，配合本发明制备方法可优化利拉鲁肽缓释微球制剂的包封率、载药量及缓释性能，使其体外释放减慢且平稳，药品质量合格且稳定相好。
23.3、该利拉鲁肽缓释微球制备工艺，通过复乳法，溶剂挥发法，喷雾法等，使用的固化液体比较少，微球的载药量高，可以让患者每次注射量减少，制备工艺相分离方相比其他微球的制备方法复乳法，溶剂挥发法，喷雾法等，在工艺的放大比较简单。
24.4、该利拉鲁肽缓释微球制备工艺，缓释微球，表面光滑圆整，无粘连，本发明成功制备了具有载药量高、包封率高、无明显突释、释放持续缓慢等特点的，包裹利拉鲁肽的缓释微球制剂。
25.5、该利拉鲁肽缓释微球制备工艺，通过在冻干工艺中本发明在控制水分符合要求的同时避免高温或室温对产品的影响，可通过延长时间和调节真气值来达到水分要求，保证产品的质量。本发明配方和工艺操作简单，注意点明确，是可行的，可重现的成熟的工艺，可放大生产。
具体实施方式
26.下面通过实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明。
27.实施例一：
28.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
29.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
30.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
31.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂与生物可降
解基质材料；
32.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
33.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
34.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂中固化；
35.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
36.机溶剂包括丙酮、乙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷，保护剂为蔗糖、海藻糖、明胶、甘露醇、甘氨酸、赖氨酸或人血清白蛋白中的一种或几种以上的混合物，步骤(d)中搅拌的转速为450～550rpm，生物可降解基质材料为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物、乙交酯-丙交酯共聚物、聚乙醇酸、聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸-聚己内酯共聚物或plcg
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聚己内酯或其中任意两种或两种以上的混合物，烷类固化剂包括乙醇、正庚烷、花生油，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为10mg/ml～500mg/ml。
37.实施例二：
38.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
39.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
40.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(丙酮、乙醇) 中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
41.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(为蔗糖、海藻糖、明胶和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物、乙交酯-丙交酯共聚物和聚乙醇酸混合物)；
42.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
43.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
44.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂(乙醇、正庚烷、花生油)中固化；
45.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
46.步骤(d)中搅拌的转速为450rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为300mg/ml。
47.实施例三
48.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
49.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
50.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(乙酸乙酯、二氯甲烷)中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
51.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(蔗糖、明胶、
人血清白蛋白、甘氨酸和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸
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羟基乙酸嵌段共聚物、聚乳酸-羟基乙酸-聚己内酯共聚物、plcg-聚己内酯混合物)；
52.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
53.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
54.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂(正庚烷)中固化；
55.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
56.步骤(d)中搅拌的转速为500rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为260mg/ml。
57.实施例四
58.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
59.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
60.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(丙酮、乙醇、二氯甲烷)中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
61.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(为蔗糖、人血清白蛋白、明胶和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物、乙交酯-丙交酯共聚物、聚己内酯和聚乙醇酸混合物)；
62.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
63.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
64.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂(花生油)中固化；
65.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
66.步骤(d)中搅拌的转速为480rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为320mg/ml。
67.实施例五
68.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
69.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
70.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(丙酮、乙醇、二氯甲烷)中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
71.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(为蔗糖、人血清白蛋白和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物、乙交酯-丙交酯共聚物、聚己内酯和聚乙醇酸混合物)；
72.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
73.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
74.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂(花生油)中固化；
75.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
76.步骤(d)中搅拌的转速为480rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为150mg/ml。
77.实施例六
78.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
79.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
80.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(乙醇)中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
81.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(为甘氨酸、赖氨酸、海藻糖、明胶和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物、乙交酯-丙交酯共聚物和聚乙醇酸混合物)；
82.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
83.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
84.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷类固化剂(乙醇、正庚烷、花生油)中固化；
85.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
86.步骤(d)中搅拌的转速为450rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为300mg/ml。
87.实施例七
88.一种利拉鲁肽缓释微球制备工艺，包括以下步骤：
89.预处理：利拉鲁肽原料药为冻干粉末态，分析检测含量杂质均符合usp要求后冷藏备用；
90.(a)称取一定量的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，置于有机溶剂(乙酸乙酯、二氯甲烷)中溶解，聚乳酸羟基乙酸共聚物溶于有机溶剂中，制得油相；
91.(b)称取一定量的利拉鲁肽，置于步骤(a)的溶液中，同时加入保护剂(蔗糖、明胶、人血清白蛋白、甘氨酸和甘露醇混合物)与生物可降解基质材料(为聚乳酸、聚乳酸
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羟基乙酸嵌段共聚物、聚乳酸-羟基乙酸-聚己内酯共聚物、plcg-聚己内酯混合物)；
92.(c)用高速剪切机/超声分散仪在一定速度下将步骤(b)中的混合液乳化；
93.(d)在步骤(c)乳化后的混合液中用/注射泵或蠕动泵加入一定量的二甲基硅油，再一定速度下进行搅拌；
94.(e)将步骤(d)搅拌后的混合液转入到用搅拌器在一定是速度下搅拌的定量的烷
类固化剂(正庚烷)中固化；
95.(f)将步骤(e)中固化后的物质过滤后，转到冷冻干燥机上进行冻干，即制得缓释微球。
96.步骤(d)中搅拌的转速为500rpm，聚乳酸羟基乙酸共聚物在油相中的质量-体积浓度为260mg/ml。
97.最后，应当指出，以上实施例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明不限于上述实施例，还可以有许多变形。凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均应认为属于本发明的保护范围。