一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用的制作方法

1.本发明涉及保健品技术领域，尤其涉及一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用。


背景技术：

2.高脂血症是由代谢紊乱引起的一种多发、常见性疾病。近年来，随着人们生活质量的提升，高脂血症患病率显著增加。高血糖作为一种慢性代谢类疾病与高血脂往往相伴发生而非独立存在，故高脂血症也是诱发糖尿病形成的危险因素。目前，常用降血脂药物不仅价格昂贵且对人体具有副作用，一般老年人高脂高糖多发，因此，开发一种具有抗氧化功能的降脂降糖口服液显得至关重要。
3.自由基的清除剂被称为抗氧化剂，通过抑制或终止氧自由基链式反应而达到抗氧化作用。抗氧化剂对皮肤氧化应激损伤造成的皮肤老化、病变等，具有显著的预防和改善作用。石榴和橙子是世界上消费广泛的水果。每年，这些水果的很大一部分在果汁生产过程中以果皮和种子的形式被浪费，然而，这些水果的果皮富含生物活性化合物，可作为生物活性成分和添加剂开发功能性食品。橘子皮中具有酚类化合物、可溶性糖、类黄酮、精油、维生素、膳食纤维和酶等生物活性化合物；石榴皮含有花青素、可水解单宁、酚酸和类黄酮等多种多酚化合物。
4.公开号为cn108338953b的发明专利公开了一种植物抗氧化组合物及其日化品的制备与应用。所述的植物抗氧化组合物包括如下重量份的组分：黄芩饮片1～40份、白梅花饮片1～40份、丹参饮片0.1～20份、白薇饮片0.1～20。该发明所述的组合物，均来源于天然抗氧化成分。经研究证明，该植物组合物对常见的dpph自由基和abts自由基均有不同程度的清除效果。可制备具有对抗氧化损伤、延缓衰老、改善皮肤暗黄、减轻细纹、增加皮肤光泽度等功能的日化产品，包括面膜、精华水、护肤乳膏、护肤凝胶、洁面乳、沐浴乳等剂型，用于全身各部位的清洁和维护。但其降血脂和血糖效果较差。


技术实现要素：

5.有鉴于现有技术的中存在的降血脂和血糖效果不佳的问题，本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗氧化性和可有效降血脂、血糖的口服液。
6.为实现上述目的，本发明提供了一种植物抗氧化组合物，其特征在于，包括以下重量份组分：30～70份植物提取物、5～30份降血脂助剂、2～8份抗氧化混合物。
7.优选的，所述植物提取物制备方法如下，所述份数均为重量份：
8.将6～12份双萼观音草、6～12份木麻黄的新鲜叶片、6～12份去核山楂、6～12份车前草用水冲洗干净，30～40℃风干6～9天，分别粉碎，过200～300目筛，得到双萼观音草粉末、木麻黄粉末、山楂粉、车前草粉末；将双萼观音草粉末、木麻黄粉末、山楂粉、车前草粉末加入到无水乙醇中，超声3～8分钟，静置40～50小时，过滤，分别收集固体和液体，将液体在真空状态下、45～60℃旋转蒸发浓缩至体积减少80～95％，然后在40～60℃干燥10～16小
时，得到浓缩物；将收集的固体加入到2～8份提取溶剂中，超声4～8分钟，在45～55℃加热回流萃取2～5小时，过滤并收集滤液，在55～65℃温度以300～500转/分钟搅拌60～90分钟，得到混合提取液；将浓缩物与混合提取液混合，以500～700转/分钟搅拌5～15分钟，冷冻干燥6～12小时，得到植物提取物。
9.优选的，所述加入无水乙醇中的双萼观音草粉末、木麻黄粉末、山楂粉、车前草粉末的质量比为1～3:0.2～1:0.5～2:1～4，双萼观音草粉末与无水乙醇的质量体积比为1～3:20～40kg/l。
10.优选的，所述真空状态为压力不大于0.08mpa状态。
11.优选的，所述提取溶剂的体积与加入到无水乙醇中的双萼观音草粉末的质量比为5～15l:1～3kg。
12.优选的，所述提取溶剂为水与无水乙醇体积比为5～10:2～10的混合溶液。
13.优选的，所述降血脂助剂制备方法如下，所述份数均为重量份：
14.s1、将2～8份猴头菌放入100～400份水中，以300～500转/分钟搅拌15～25分钟，利用0.01～0.03mol/l盐酸调节ph为4.5～6，再加入0.1～0.25份纤维素酶，在45～58℃超声60～95分钟，再加热至90～100℃并保持8～15分钟，再冷却至20～30℃，过滤，加入500～1600份浓度为70～90vt％的乙醇水溶液，静置20～26小时，6000～8000转/分钟离心分离15～30分钟，收集固体，用浓度为70～90vt％的乙醇水溶液洗涤2～4次，冷冻干燥6～12小时，得到猴头菌膳食纤维；
15.s2、将8～16份绿原酸、18～35份无水醋酸酐、10～30份无水吡啶混合并在0～8℃以200～400转/分钟转速条件下预冷10～18小时，再加入在0～8℃预冷的200～500份浓度为35～36vt％的盐酸，待析出晶体，过滤，收集晶体和滤液，将晶体加入80～150份饱和碳酸氢钠水溶液中，以300～500转/分钟搅拌25～45分钟，过滤，收集滤液，在滤液中加入浓度为30～36vt％的盐酸调节ph为1.3～1.7，以300～500转/分钟搅拌2～5分钟，静置1.5～3小时，过滤，收集固体，用水洗涤2～4次，55～65℃真空干燥6～12小时得到乙酰化绿原酸；再将12～28份乙酰化绿原酸和15～35份氯化亚砜混合，在80～85℃加热搅拌回流4.5～6小时，在80～85℃旋转蒸发至无酸味产生，45～60℃真空干燥6～12小时，得到乙酰化绿原酰氯；
16.s3、将10～30份步骤s1制备的猴头菌膳食纤维、36～108份步骤s2制备的乙酰化绿原酰氯加入到25～75份无水吡啶中，在110～125℃加热搅拌回流1.5～3小时，过滤，收集固体，用无水乙醇洗涤3～6次，冷冻干燥8～15小时，得到乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维；再将乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维加入300～500份丙酮中，在0～8℃温度以200～400转/分钟搅拌15～30分钟，滴加浓度为0.1～0.2mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为7.5～8.5，静置3.5～4.5小时，加入浓度为0.25～0.35mol/l盐酸调节ph为2.8～3.2，在75～85℃减压旋蒸至析出固体，过滤并收集固体，将收集的固体加入300～600份乙酸乙酯中，再将酯层用水洗涤2～4次，75～85℃旋蒸去除乙酸乙酯，冷冻干燥7～12小时，微波灭菌20～45分钟，得到绿原酰化猴头菌膳食纤维；
17.s4、将种子蛋白质水解物加入到浓度为95～99vt％的双氧水水溶液中，接着加入抗坏血酸，在20～30℃温度以200～400转/分钟搅拌1.5～3小时，再加入步骤s3制备的绿原酰化猴头菌膳食纤维、继续以200～400转/分钟搅拌20～26小时，用透析袋在0～8℃水中透
析3～6次，收集透析袋内物质，冷冻干燥10～16小时，得到降血脂助剂。
18.优选的，上述所有超声参数均为：180～220w，55～65khz。
19.优选的，所述微波灭菌参数为：微波频率：400～600mhz。
20.优选的，所述种子蛋白质水解物与双氧水水溶液的质量体积比为20～30:2～4mg/ml，种子蛋白质水解物与抗坏血酸的质量比为20～30:1～1.5。
21.优选的，所述种子蛋白质水解物与绿原酰化猴头菌膳食纤维的质量比为1.6～3:1。
22.优选的，所述透析袋截留的分子量为500～2000。
23.优选的，上述过滤均采用孔径为0.45～0.8微米水性滤膜过滤。
24.优选的，所述种子蛋白质水解物制备方法如下，所述份数均为重量份：
25.z1、分别取30～60份在40～55℃干燥4～6小时的反枝苋种子和30～60份在40～55℃干燥4～6小时的沙棘叶混合，得到混合物，研磨过100～200目筛，加入180～400份正己烷萃取8～12小时，得到脱脂混合物，将脱脂混合物分散在200～600份水中，利用0.5～1.5mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为10.5～11.3，在20～30℃以300～500转/分钟搅拌3～5小时，低温离心15～30分钟，收集上清液，滴加0.6～1.2mol/l盐酸调节ph为4.2～4.8，静置8～15分钟，低温离心15～30分钟，收集固体，加入150～300份去离子水，用0.5～1.2mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为6.8～7.3，冷冻干燥10～16小时，得到种子蛋白；
26.z2、将15～40份步骤z1制备的种子蛋白加入50～150份水中，利用0.01～0.03mol/l盐酸和0.01～0.03mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为5～8，在50～60℃温度以100～300转/分钟搅拌8～15分钟，再加入0.15～0.4份菠萝蛋白酶，继续在50～60℃温度以100～300转/分钟搅拌3.5～4.5小时，然后加热至75～90℃并保持8～20分钟，冷却至20～30℃，低温离心15～25分钟，取上清液，过滤，得到种子蛋白质水解物。
27.优选的，所述低温离心参数均为：离心温度为0～6℃，转速为8000～10000转/分钟。
28.优选的，所述过滤采用孔径为0.2～0.45微米过滤器过滤。
29.优选的，所述抗氧化混合物的制备方法如下，所述份数均为重量份：
30.将0.8～1.5份橙子果皮和0.5～1份石榴果皮清洗后，在阴凉处干燥，直到含水量达到5～15wt％，干燥的果皮用电动研磨机粉碎，过200～400目筛网，得到混合粉末，将混合粉末在塑料离心管中与15～30份45～60wt％乙醇水溶液混合，然后，将离心管转移到超声浴中，超声功率200～400w、提取温度为50～60℃，提取时间为30～50分钟，然后，将混合物5000～7000转/分钟离心8～15分钟，收集上清液，将上清液再次5000～7000转/分钟离心8～15分钟，再次收集上层液体，然后用旋转蒸发器将上层液体浓缩至溶剂蒸发完全，然后在真空烘箱中35～50℃干燥1～3小时，得到抗氧化混合物。
31.石榴皮中含有大量的多酚类物质，如花青素、没食子酸、鞣花酸、苯甲酸、羟基肉桂酸和二氢黄酮醇，这表明石榴皮具有较强的抗氧化活性。槲皮素、芦丁、山柰酚、花青素、柚苷、橙皮苷、新橙皮苷、香豆酸和肉桂酸也是柑橘皮中的主要酚类化合物。抗氧化混合物通过提高超声提取工艺的温度，增加生物活性化合物的溶解度，改善溶剂的渗透速率和传质，降低溶剂的表面张力和粘度，可以提高果皮中酚类化合物的提取效率。提取物的抗氧化活性是由于其生物活性化合物的氧化还原性质和化学结构，可以发挥中和自由基，螯合重金
属，清除单氧和三氧的重要作用。酚类化合物及其酯类化合物的还原和清除能力取决于其结构中游离羟基的数量，因为这些活性基团具有较多的活性电子和稳定自由基，本实施例选用合适的提取温度和提取时间，既具有较高的提取效率，又不会破坏提取物的功能基团，所以显著增加了对自由基的清除活性。可用于提高口服液的抗氧化效果。
32.本发明还公开了上述植物抗氧化组合物在制备口服液中的应用。具体应用如下：
33.所述口服液制备步骤如下，以重量份计：
34.取20～60份植物抗氧化组合物加入到300～600份水中，以300～500转/分钟搅拌15～30分钟，加入0.012～0.035份羟苯乙酯、0.039～0.156份聚乙烯基吡咯烷酮，继续以300～500转/分钟搅拌15～30分钟，用0.05～0.15mol/l盐酸和0.05～0.15mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为5～8，得到口服液。
35.本发明将植物提取物与降血脂助剂混合，加入羟苯乙酯、聚乙烯基吡咯烷酮、制备得到口服液，具有良好的降血脂、降血糖和健胃的作用。通过双萼观音草粉、木麻黄粉、山楂粉、车前草粉按比例混合提取得到植物提取物，含有油酸、黄酮等活性物质，可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，增强酰胆碱含量，预防老年痴呆，同时还能抑制胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的活性，降低脂质合成和吸收，以达到降血脂的目的。
36.降血脂助剂是绿原酰化猴头菌膳食纤维与种子蛋白质水解物共价共轭制备得到，混合绿原酰化猴头菌膳食纤维通过提取得到猴头菌膳食纤维，再将绿原酸与猴头菌膳食纤维进行接枝处理得到，猴头菌膳食纤维表面的官能团能螯合或者吸附有机分子，在肠道内，猴头菌膳食纤维与胆酸和胆盐结合并排出体外，抑制胆酸和胆盐在小肠表面的吸收，降低脂质的消化吸收能力，降低体内胆固醇含量；对于糖尿病患者，餐后高血糖会导致胰岛素分泌失调，α-葡萄糖苷酶会将食物中的碳水化合物转化为人体易吸收的葡萄糖，导致人体血液中血糖含量升高，而绿原酸接枝后的绿原酰化猴头菌膳食纤维，不仅抑制胰脂肪酶活性增强，还能抑制α-葡萄糖苷酶，增强胰岛素的活性，刺激葡萄糖转运蛋白4将小肠内的葡萄糖转运至肌肉细胞等人体细胞进行能量代谢活动，以达到有效降血糖的作用。
37.种子蛋白质水解物是将反枝苋种子和沙棘叶混合提取蛋白质，再将蛋白质水解得到，水解物中含有丰富的多肽成分，对胆固醇胶束溶解度的抑制程度较高，胰脂肪酶与肽链上的活性位点结合，抑制胰脂肪酶对三酰甘油酯等不溶性脂类的分解，降低体内血脂含量；种子蛋白质水解物与绿原酰化猴头菌膳食纤维通过自由基接枝共轭得到降血脂助剂，绿原酰化猴头菌膳食纤维对种子蛋白质水解物的改性，羟基的共价和非共价相互作用，提高了种子蛋白质水解物的热稳定性，同时，种子蛋白质水解物与绿原酰化猴头菌膳食纤维之间的共价相互作用使降血脂助剂对油/水界面的亲和力增加，提高乳化性，提高与油脂和胆固醇的结合能力，进一步增强降血脂性能。
38.由于采用了以上技术方案，与现有技术相比，本发明具有以下优点：1)将双萼观音草粉、木麻黄粉、山楂粉、车前草粉按比例混合提取得到植物提取物，可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，增强乙酰胆碱含量，预防老年痴呆，同时还能抑制胰脂肪酶的活性，降低脂质合成和吸收，以达到降血脂的目的；2)通过绿原酸与猴头菌膳食纤维接枝处理得到绿原酰化猴头菌膳食纤维，可有效降低血脂和血糖；将绿原酰化猴头菌膳食纤维与种子蛋白质水解物通过自由基接枝共轭得到降血脂助剂，可提高降血脂助剂的热稳定性和乳化性能，使降血脂性能增强。3)采用橙子果皮和石榴果皮的提取物进行复配，制备的口服液能够显著降低
血脂和血糖，还具有较好的抗氧化性。
具体实施方式
39.实施例和对比例原料来源：
40.双萼观音草产自四川省金阳县。
41.木麻黄产自广西省河池。
42.山楂产自河北省兴隆县。
43.车前草产自江西省宜春市。
44.猴头菌产自云南省丽江市。
45.绿原酸：西安美禾生物科技有限公司，纯度：98％，型号：mh-lys。
46.氯化亚砜：上海阿拉丁生化科技股份有限公司，cas号：7719-09-7，纯度：99.5％。
47.反枝苋种子产自陕西省延安市。
48.沙棘叶产自陕西省延安市。
49.聚乙烯基吡咯烷酮：武汉拉那白医药化工有限公司，cas号：9003-39-8，分子量5500，医药级。
50.羟苯乙酯：陕西盘龙翊海医药有限公司，cas号：120-47-8，医药级。
51.纤维素酶：广州华熙生物工程有限公司，酶活力：2万u/g。
52.菠萝蛋白酶：南宁东恒华道生物科技有限公司，酶活力：20万u/g。
53.以下实施例和对比例均在无菌环境中进行。
54.实施例1
55.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用
56.所述植物抗氧化组合物包括55g植物提取物、20g降血脂助剂。
57.所述植物提取物制备方法如下：
58.将10kg双萼观音草、10kg木麻黄的新鲜叶片、10kg去核山楂、10kg车前草用水冲洗干净，32℃风干7天，分别粉碎，过250目筛，得到双萼观音草粉末、木麻黄粉末、山楂粉、车前草粉末；将2kg双萼观音草粉末、0.5kg木麻黄粉末、1kg山楂粉、3kg车前草粉末加入到26l无水乙醇中，超声5分钟，超声功率为200w，超声频率：60khz，静置48小时，用孔径为0.45微米滤膜过滤，分别收集固体和液体，将液体在真空状态下、50℃旋转蒸发浓缩至体积减少90％，然后在50℃下干燥14小时，得到浓缩物；将收集的固体加入到15l提取溶剂中，提取溶剂为水与无水乙醇体积比为3:2的混合物，超声6分钟，超声功率为200w，超声频率：60khz，在50℃下加热回流萃取3小时，用孔径为0.45微米滤膜过滤，收集滤液，在60℃水浴温度下以400转/分钟搅拌80分钟蒸发去除乙醇，得到混合提取液；将浓缩物与混合提取液混合，以600转/分钟搅拌10分钟，冷冻干燥8小时，得到植物提取物。
59.所述降血脂助剂制备方法如下：
60.s1、将5g猴头菌放入200g水中，以400转/分钟搅拌20分钟，利用0.02mol/l盐酸调节ph为5.5，再加入0.15g纤维素酶，在55℃超声80分钟，超声功率：200w，频率：60khz，温度：25℃，再加热至100℃并保持10分钟，冷却至25℃，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，加入800g浓度为80vt％的乙醇水溶液，静置24小时，7000转/分钟离心分离20分钟，收集固体，用80vt％的乙醇水溶液洗涤3次，冷冻干燥8小时，得到猴头菌膳食纤维；
61.s2、将12.9g绿原酸、27.6g无水醋酸酐、20g无水吡啶混合并在4℃以300转/分钟转速条件下预冷14小时，再加入在4℃预冷的300g浓度为35.56vt％的盐酸，待析出晶体，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集晶体和滤液；将收集的晶体加入120g饱和碳酸氢钠水溶液中，以400转/分钟搅拌30分钟，孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集滤液，在滤液中加入浓度为35.56vt％的盐酸调节ph为1.5，以400转/分钟搅拌3分钟，静置2小时，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集固体，用水洗涤3次，60℃真空干燥8小时得到乙酰化绿原酸；将16.59g乙酰化绿原酸和20g氯化亚砜混合，在83℃加热搅拌回流5小时，在83℃旋转蒸发至无酸味产生，50℃真空干燥8小时，得到乙酰化绿原酰氯；
62.s3、将20g步骤s1制备的猴头菌膳食纤维、72g步骤s2制备的乙酰化绿原酰氯加入到50g无水吡啶中，在120℃加热搅拌回流2小时，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集固体，用无水乙醇洗涤4次，冷冻干燥10小时，得到乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维；将乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维加入400g丙酮中，在4℃温度以300转/分钟搅拌20分钟，滴加浓度为0.15mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为8，静置4小时，再加入浓度为0.3mol/l盐酸调节ph为3，在80℃温度下减压旋蒸至析出固体，用孔径为45微米水性滤膜过滤收集固体；将收集的固体加入400g乙酸乙酯中，得到酯层，将酯层用水洗涤3次，80℃旋蒸去除乙酸乙酯，冷冻干燥8小时，微波灭菌30分钟，微波频率：500mhz，得到绿原酰化猴头菌膳食纤维。
63.s4、将10g种子蛋白质水解物加入到1200ml浓度为99vt％的双氧水水溶液中，接着加入0.5g抗坏血酸，在25℃温度以300转/分钟搅拌2小时，再加入4g步骤s3制备的绿原酰化猴头菌膳食纤维，继续以300转/分钟搅拌24小时，用1000分子量截断的透析袋在4℃蒸馏水中透析4次，收集透析袋内物质，冷冻干燥12小时，得到降血脂助剂。
64.所述种子蛋白质水解物制备方法如下：
65.z1、分别取50g在50℃干燥5小时的反枝苋种子和50g在50℃干燥5小时的沙棘叶混合，得到混合物，将混合物研磨过150目筛，加入300g正己烷萃取10小时脱脂，得到脱脂混合物，将脱脂混合物分散在350份水中，，利用1mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为11，在25℃以400转/分钟搅拌4小时，低温离心20分钟，离心温度为4℃，转速为9000转/分钟，收集上清液，滴加1mol/l盐酸调节ph为4.5，静置10分钟，低温离心20分钟，离心温度为4℃，转速为9000转/分钟，收集固体，加入200g去离子水，用1mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为7，冷冻干燥12小时，得到种子蛋白；
66.z2、将30g步骤z1制备的种子蛋白加入100g蒸馏水中，利用0.02mol/l盐酸和0.02mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为7，在55℃温度以200转/分钟搅拌10分钟，再加入0.3g菠萝蛋白酶，继续在55℃温度以200转/分钟搅拌4小时，然后加热至80℃并保持10分钟，冷却至25℃，低温离心20分钟，离心温度为4℃，转速为9000转/分钟，取上清液，用孔径为0.22微米过滤器过滤，得到种子蛋白质水解物。
67.所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用，包括如下步骤：取上述植物抗氧化组合物55g加入到500g蒸馏水中，以400转/分钟搅拌20分钟，加入0.026g羟苯乙酯、0.0975g聚乙烯基吡咯烷酮，继续以400转/分钟搅拌20分钟，滴加0.1mol/l盐酸和0.1mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为7，得到口服液。
68.实施例2
69.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用。
70.所述植物抗氧化组合物包括55g植物提取物、20g降血脂助剂、5g抗氧化混合物。
71.所述植物提取物制备方法与实施例1相同。
72.所述降血脂助剂制备方法与实施例1相同。
73.所述种子蛋白质水解物制备方法与实施例1相同。
74.所述抗氧化混合物的制备方法如下：
75.将1.2kg橙子果皮和0.8kg石榴果皮清洗后，在阴凉处干燥，直到含水量达到10wt％，干燥的果皮用电动研磨机粉碎，过300目筛网，得到混合粉末，将混合粉末在塑料离心管中与20kg 50wt％乙醇水溶液混合，然后，将离心管转移到超声浴中，超声功率240w、提取温度为55℃，提取时间为40分钟，然后，将混合物6000转/分钟离心10分钟，收集上清液，将上清液再次6000转/分钟离心10分钟，再次收集上层液体，然后用旋转蒸发器将上层液体浓缩至溶剂蒸发完全，然后在真空烘箱中40℃干燥2小时，得到抗氧化混合物。
76.所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用，包括如下步骤：取上述植物组合物55g加入到500g蒸馏水中，以400转/分钟搅拌20分钟，加入0.026g羟苯乙酯、0.0975g聚乙烯基吡咯烷酮，继续以400转/分钟搅拌20分钟，滴加0.1mol/l盐酸和0.1mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为7，得到口服液。
77.对比例1
78.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于降血脂助剂与实施例1不同。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
79.所述降血脂助剂制备方法如下：
80.s1、将5g猴头菌放入200g水中，以400转/分钟搅拌20分钟，利用0.02mol/l盐酸调节ph为5.5，再加入0.15g纤维素酶，在55℃超声80分钟，超声功率：200w，频率：60khz，温度：25℃，再加热至100℃并保持10分钟，冷却至25℃，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，加入800g浓度为80vt％的乙醇水溶液，静置24小时，7000转/分钟离心分离20分钟，收集固体，用80vt％的乙醇水溶液洗涤3次，冷冻干燥8小时，得到猴头菌膳食纤维；
81.s2、将10g种子蛋白质水解物加入到1200ml浓度为99vt％的双氧水水溶液中，接着加入0.5g抗坏血酸，在25℃温度以300转/分钟搅拌2小时，再加入4g步骤s1制备的猴头菌膳食纤维，继续以300转/分钟搅拌24小时，用1000分子量截断的透析袋在4℃蒸馏水中透析4次，收集透析袋内物质，冷冻干燥12小时，得到降血脂助剂。
82.所述种子蛋白水解物制备方法与实施例1相同。
83.对比例2
84.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于降血脂助剂与实施例1不同。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
85.所述降血脂助剂制备方法如下：将10g种子蛋白质水解物加入到1200ml浓度为99vt％的双氧水水溶液中，接着加入0.5g抗坏血酸，在25℃温度以300转/分钟搅拌2小时，再加入4g绿原酸，继续以300转/分钟搅拌24小时，用1000分子量截断的透析袋在4℃蒸馏水中透析4次，收集透析袋内物质，冷冻干燥12小时，得到降血脂助剂。
86.所述种子蛋白质水解物制备方法与实施例1相同。
87.对比例3
88.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于降血脂助剂与实施例1不同。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
89.所述降血脂助剂制备方法如下：将10g种子蛋白质水解物加入到1200ml浓度为99vt％的双氧水水溶液中，接着加入0.5g抗坏血酸，在25℃温度以300转/分钟搅拌26小时，用1000分子量截断的透析袋在4℃蒸馏水中透析4次，收集透析袋内物质，冷冻干燥12小时，得到降血脂助剂。
90.所述种子蛋白质水解物制备方法与实施例1相同。
91.对比例4
92.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于降血脂助剂与实施例1不同。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
93.所述降血脂助剂制备方法如下：
94.s1、将5g猴头菌放入200g水中，以400转/分钟搅拌20分钟，利用0.02mol/l盐酸调节ph为5.5，再加入0.15g纤维素酶，在55℃超声80分钟，超声功率：200w，频率：60khz，温度：25℃，再加热至100℃并保持10分钟，冷却至25℃，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，加入800g浓度为80vt％的乙醇水溶液，静置24小时，7000转/分钟离心分离20分钟，收集固体，用80vt％的乙醇水溶液洗涤3次，冷冻干燥8小时，得到猴头菌膳食纤维；
95.s2、将12.9g绿原酸、27.6g无水醋酸酐、20g无水吡啶混合并在4℃以300转/分钟转速条件下预冷14小时，再加入在4℃预冷的300g浓度为35.56vt％的盐酸，待析出晶体，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集晶体和滤液；将收集的晶体加入120g饱和碳酸氢钠水溶液中，以400转/分钟搅拌30分钟，孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集滤液，在滤液中加入浓度为35.56vt％的盐酸调节ph为1.5，以400转/分钟搅拌3分钟，静置2小时，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集固体，用水洗涤3次，60℃真空干燥8小时得到乙酰化绿原酸；将16.59g乙酰化绿原酸和20g氯化亚砜混合，在83℃加热搅拌回流5小时，在83℃旋转蒸发至无酸味产生，50℃真空干燥8小时，得到乙酰化绿原酰氯；
96.s3、将20g步骤s1制备的猴头菌膳食纤维、72g步骤s2制备的乙酰化绿原酰氯加入到50g无水吡啶中，在120℃加热搅拌回流2小时，用孔径为0.45微米水性滤膜过滤，收集固体，用无水乙醇洗涤4次，冷冻干燥10小时，得到乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维；将乙酰化绿原酰猴头菌膳食纤维加入400g丙酮中，在4℃温度以300转/分钟搅拌20分钟，滴加浓度为0.15mol/l氢氧化钠水溶液调节ph为8，静置4小时，再加入浓度为0.3mol/l盐酸调节ph为3，在80℃温度减压旋蒸至析出固体，用孔径为45微米水性滤膜过滤收集固体；将收集的固体加入400g乙酸乙酯中，得到酯层，将酯层用水洗涤3次，80℃旋蒸去除乙酸乙酯，冷冻干燥8小时，微波灭菌30分钟，微波频率：500mhz，得到绿原酰化猴头菌膳食纤维。
97.s4、在1200ml浓度为99vt％的双氧水水溶液中，加入0.5g抗坏血酸，在25℃温度以300转/分钟搅拌2小时，再加入4g步骤s3制备的绿原酰化猴头菌膳食纤维，继续以300转/分钟搅拌24小时，用1000分子量截断的透析袋在4℃蒸馏水中透析4次，收集透析袋内物质，冷冻干燥12小时，得到降血脂助剂。
98.对比例5
99.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于植物提取物制备方法与实施例1不同。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
100.所述植物提取物制备方法如下：
101.将10kg木麻黄的新鲜叶片、10kg去核山楂、10kg车前草用水冲洗干净，32℃风干7天，分别粉碎，过250目筛，得到木麻黄粉末、山楂粉、车前草粉末；将0.5kg木麻黄粉末、1kg山楂粉、3kg车前草粉末加入到26l无水乙醇中，超声5分钟，超声功率为200w，超声频率：60khz，静置48小时，用孔径为0.45微米滤膜过滤，分别收集固体和液体，将液体在真空状态下、50℃旋转蒸发浓缩至体积减少90％，然后在50℃干燥14小时，得到浓缩物；将收集的固体加入到15l提取溶剂中，提取溶剂为水与无水乙醇体积比为3:2的混合物，超声6分钟，超声功率为200w，超声频率：60khz，在50℃加热回流萃取3小时，用孔径为0.45微米滤膜过滤，收集滤液，在60℃水浴温度以400转/分钟搅拌80分钟蒸发去除乙醇，得到混合提取液；将浓缩物与混合提取液混合，以600转/分钟搅拌10分钟，冷冻干燥8小时，得到植物提取物。
102.所述降血脂助剂制备方法与实施例1相同。
103.对比例6
104.一种植物抗氧化组合物及其在口服液中的应用，该植物抗氧化组合物与实施例1基本相同，唯一区别在于未加入降血脂助剂。所述植物抗氧化组合物在口服液中的应用与实施例1相同。
105.所述植物提取物制备方法与实施例1相同。
106.测试例1
107.降血脂、降血糖效果检测：
108.分别参考硕士论文(刺梨降血脂口服液研发及功能性评价，作者：陈萍，贵州大学，2020)和博士论文(牡丹籽油及其复方降血糖、降血脂活性及机理研究，作者：苏建辉，江南大学，2016)对本发明制备的口服液进行降血脂、降血糖效果检测，步骤如下：
109.1)选取3周龄spf级雄性km小鼠190只，体重18～22g，适应性喂养一周后随机分组，分为空白对照组和试验组，其中空白对照组10只并用普通饲料喂养，实验组180只，用高脂饲料(78.8％普通饲料、1％胆固醇、10％猪油、10％蛋黄粉、0.2％胆酸盐)喂养，两组小鼠均饮用蒸馏水，不限饮食，正常光照，每周称重一次，饲养28天，得到实验测试小鼠；
110.2)将步骤1)试验组小鼠随机分为2组，每组90只，分别为降血脂组和降血糖组；
111.3)将降血脂组小鼠随机分为9组，每组10只，依次记为降血脂高模型对照组、降血脂试验组1、降血脂试验组2、降血脂试验组3、降血脂试验组4、降血脂试验组5、降血脂试验组6、降血脂试验组7、降血脂试验组8，降血脂高模型对照组灌胃生理盐水，降血脂试验组1、降血脂试验组2、降血脂试验组3、降血脂试验组4、降血脂试验组5、降血脂试验组6、降血脂试验组7、降血脂试验组8分别灌胃实施例1、实施例2、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5、对比例6的口服液，小鼠按体重灌胃剂量均为1.5ml/10g，灌胃期间继续用高脂饲料喂养，均饮用蒸馏水，试验周期为4周，每天灌胃一次；3)将小鼠于最后一次灌胃后禁食不禁水12小时，眼球取血，收集到血清管中，放置2小时后在4℃温度下3500转/分钟离心10分钟，将血清分离置于2ml离心管中，利用总胆固醇(tc)、总甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白
(hdl-c)测定试剂盒对小鼠血清血清指标进行测定，取平均值，结果见表1。
112.4)将降血糖组小鼠随机分为9组，每组10只，依次记为降血糖高模型对照组，降血糖实验组1、降血糖实验组2、降血糖实验组3、降血糖实验组4、降血糖实验组5、降血糖实验组6、降血糖实验组7、降血糖实验组8，每组小鼠在禁食一夜后按体重注射链脲佐菌素(将2.1g柠檬酸加入100ml双蒸水中配制成#液，2.94g柠檬酸钠加入100ml双蒸水中配制成b液，a液、b液以质量比为1:1.32比例混合，用a液调节ph为4.5，加入链脲佐菌素溶解，配制成质量浓度为2％的链脲佐菌素)剂量均为0.4mg/10g，诱导48小时，经小鼠尾静脉穿刺取血，用accu-check一触式血糖仪测得空腹血糖浓度在150mg/dl以上为糖尿病；降血糖高模型对照组灌胃生理盐水，降血糖试验组1、降血糖试验组2、降血糖实验组3、降血糖实验组4、降血糖实验组5、降血糖实验组6、降血糖实验组7、降血糖实验组8分别灌胃实施例1、实施例2、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5、对比例6的口服液，小鼠按体重灌胃剂量均为1.5ml/10g，灌胃期间继续用高脂饲料喂养，均饮用蒸馏水，试验周期为4周，每天灌胃一次，将小鼠于最后一次灌胃后禁食5小时，对小鼠尾静脉穿刺取血，用accu-check一触式血糖仪测血糖，取平均值，结果见表1；
113.5)步骤1)中空白对照组灌胃生理盐水，灌胃期间使用普通饲料喂养，均饮用蒸馏水，试验周期为4周，灌胃量和相关检测方法与步骤3)、步骤4)相同。
114.表1测试结果
[0115][0116]
(备注：与高模型对照组相比较：**p＜0.01极显著差异；*p＜0.05，显著差异；与实施例1相比较：##p＜0.01极显著差异；#p＜0.05，显著差异)
[0117]
由表1可见，空白对照组小鼠血清tc极显著低于高模型对照组(p＜0.01)，tg极显
著低于高模型对照组(p＜0.05)，小鼠血清hdl-c极显著高于高模型对照组(p＜0.01)；实施例1的小鼠血清tc、tg极显著低于高模型对照组，小鼠血清hdl-c极显著高于高模型对照组(p＜0.01)；说明实施例1具有较优的降血脂效果，实施例2较实施例1区别不大；而对比例1～6的小鼠血清tc、tg显著或极显著高于实施例1(p＜0.05或p＜0.01)，小鼠血清hdl-c显著或极显著低于实施例1(p＜0.05或p＜0.01)，可见实施例1的降血脂效果优于对比例1～6。空白对照组和实施例1小鼠血糖极显著低于高模型对照组(p＜0.01)，说明实施例1具有降血糖效果，对比例1～6的小鼠血糖极显著高于实施例1(p＜0.01)，可见实施例1的降血糖效果优于对比例1～6。基于以上结果及分析，认为实施例1具有较好的降血脂、降血糖效果，且效果优于对比例1～6，可能是因为实施例1中加入了双萼观音草和降血脂助剂，双萼观音草粉与木麻黄粉、山楂粉、车前草粉按比例混合提取得到的植物提取物能抑制胰脂肪酶的活性，降低脂质合成和吸收，以达到降血脂的目的；同时，绿原酸与猴头菌膳食纤维接枝处理得到绿原酰化猴头菌膳食纤维，可有效降低血脂和血糖，将绿原酰化猴头菌膳食纤维与种子蛋白质水解物通过自由基接枝共轭得到降血脂助剂，可提高降血脂助剂的热稳定性和乳化性能，使降血脂性能增强。
[0118]
测试例2
[0119]
抗氧化测试
[0120]
将测试例1中步骤3)眼球取血后空白对照组、高模型对照、实施例1和实施例2的小鼠采用颈椎脱臼法处死，取肝脏置于-20℃保存，用于测定mda含量、cat活性、sod活性和gsh-px活性。测试结果取平均值，见表2。
[0121]
表2测试结果
[0122][0123]
从表2的测试结果可以看出，实施例2具有较好的抗氧化活性，可能原因在于本实施例中加入了抗氧化混合物，抗氧化混合物通过提高超声提取工艺的温度，增加生物活性化合物的溶解度，改善溶剂的渗透速率和传质，降低溶剂的表面张力和粘度，可以提高果皮中酚类化合物的提取效率。提取物的抗氧化活性是由于其生物活性化合物的氧化还原性质和化学结构，可以发挥中和自由基，螯合重金属，清除单氧和三氧的重要作用。酚类化合物及其酯类化合物的还原和清除能力取决于其结构中游离羟基的数量，因为这些活性基团具有较多的活性电子和稳定自由基，本实施例选用55℃的提取温度和40min的提取时间，既具有较高的提取效率，又不会破坏提取物的功能基团，所以显著增加了对自由基的清除活性。可用于提高口服液的抗氧化效果。