钩端螺旋体毒力调节蛋白及其用途

背景技术：

1、pf07598基因家族被鉴定为仅属于致病性钩端螺旋体(fouts et al,2016,plosnegl trop dis.10(2):e0004403；lehmann et al,2013,plos negl trop dis,7(10):e2468.)。先前已知该基因家族的成员会因渗透压而上调，但目前尚不清楚该基因功能(matsunaga et al,2007；infect immun,75(6):2864-2874)。已报道了在仓鼠模型中pf07598基因家族成员的体内上调(lehmann et al,2013；plos negl trop dis,7(10):e2468)，并且已报道在体内针对该基因家族的一个成员的人抗体反应(lessa-aquino,2017,plos negl trop dis,11(1):e0005349)。此外，已经报道了问号钩端螺旋体血清型manilae的随机转座子诱变(marcsisin et al,2013,j med microbiol,62(pt10):1601-1608)，但其功能仍然未知。

2、人钩端螺旋体病在发展中国家很常见，并且在工业化国家发病率有所增加。在实施有效的公共卫生应对措施方面只取得了有限的进展，并且没有注册用于人的疫苗。

3、本领域仍然需要具有针对致病性钩端螺旋体的疫苗潜力的新组合物。本发明满足了这一未满足的需求。

技术实现思路

1、在一个实施方式中，本发明涉及一种组合物，包含至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其包含dna酶(dnase)结构域的片段。在一个实施方式中，至少一种vm蛋白是la_3388、la_0835、la_0591、la_0589(v)、la_1402、la_1400、la_3271、la_0934、la_0769、la_2628、la_0620、la_3490、lic_10778、lic_12791、lic_12985、lic_12986、lic_12339、lic_12340、lic_10870、lic_12715、lic_12844、lic_11358、lic_10639、lic_12963、lic_10695、lmanv2_260038、lmanv2_240079、lmanv2_70075、lmanv2_70078、lmanv2_210058、lmanv2_210056、lmanv2_80114、lmanv2_320010、lmanv2_240142、lmanv2_150103、lmanv2_170032、lmanv2_70050或lmanv2_170091。

2、在一个实施方式中，本发明涉及一种融合蛋白，其包含钩端螺旋体vm蛋白或钩端螺旋体vm蛋白dna酶结构域以及特异于结合靶分子的靶向结构域。在一个实施方式中，至少一种vm蛋白是la_3388、la_0835、la_0591、la_0589(v)、la_1402、la_1400、la_3271、la_0934、la_0769、la_2628、la_0620、la_3490、lic_10778、lic_12791、lic_12985、lic_12986、lic_12339、lic_12340、lic_10870、lic_12715、lic_12844、lic_11358、lic_10639、lic_12963、lic_10695、lmanv2_260038、lmanv2_240079、lmanv2_70075、lmanv2_70078、lmanv2_210058、lmanv2_210056、lmanv2_80114、lmanv2_320010、lmanv2_240142、lmanv2_150103、lmanv2_170032、lmanv2_70050或lmanv2_170091。在一个实施方式中，靶分子是细菌抗原、病毒抗原、寄生虫抗原、癌抗原、肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原。

3、在一个实施方式中，组合物包含两种或更多种钩端螺旋体vm蛋白的组合。在一个实施方式中，组合物包含la_3388、la_0835、la_0591、la_0589(v)、la_1402、la_1400、la_3271、la_0934、la_0769、la_2628、la_0620、la_3490、lic_10778、lic_12791、lic_12985、lic_12986、lic_12339、lic_12340、lic_10870、lic_12715、lic_12844、lic_11358、lic_10639、lic_12963、lic_10695、lmanv2_260038、lmanv2_240079、lmanv2_70075、lmanv2_70078、lmanv2_210058、lmanv2_210056、lmanv2_80114、lmanv2_320010、lmanv2_240142、lmanv2_150103、lmanv2_170032、lmanv2_70050和lmanv2_170091中两种或更多种的组合。在一个实施方式中，组合物包含lic_12340和lic_12985的组合。在一个实施方式中，组合物包含lic_12340、lic_12985、la_3490、la_0620和la_1402的组合。

4、在一个实施方式中，组合物包含至少一种钩端螺旋体vm蛋白，该蛋白包含seq idno:2、seq id no:4、seq id no:6、seq id no:8、seq id no:10或seq id no:12的氨基酸序列。在一个实施方式中，组合物包含vm蛋白的组合，vm蛋白包含seq id no:10和seq id no:12中所示的序列。在一个实施方式中，组合物包含vm蛋白的组合，vm蛋白包含seq id no:2、seq id no:4、seq id no:8、seq id no:10和seq id no:12所示的序列。

5、在一个实施方式中，组合物包含至少一种脂质纳米颗粒(lnp)，脂质纳米颗粒包含至少一种vm蛋白或含dna酶结构域的vm蛋白片段。在一个实施方式中，组合物包含至少两种lnp的组合，lnp包含至少两种vm蛋白或含dna酶结构域的vm蛋白片段。

6、在一个实施方式中，本发明涉及一种组合物，其包含至少一种核酸分子，该核酸分子编码至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其包含vm蛋白的dna酶结构域的片段。在一个实施方式中，vm蛋白是la_3388、la_0835、la_0591、la_0589(v)、la_1402、la_1400、la_3271、la_0934、la_0769、la_2628、la_0620、la_3490、lic_10778、lic_12791、lic_12985、lic_12986、lic_12339、lic_12340、lic_10870、lic_12715、lic_12844、lic_11358、lic_10639、lic_12963、lic_10695、lmanv2_260038、lmanv2_240079、lmanv2_70075、lmanv2_70078、lmanv2_210058、lmanv2_210056、lmanv2_80114、lmanv2_320010、lmanv2_240142、lmanv2_150103、lmanv2_170032、lmanv2_70050或lmanv2_170091。

7、在一个实施方式中，核酸分子编码融合蛋白，该融合蛋白包含与特异于结合靶分子的靶向结构域融合的钩端螺旋体vm蛋白或含vm蛋白的dna酶结构域的片段。在一个实施方式中，靶分子是细菌抗原、病毒抗原、寄生虫抗原、癌抗原、肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原。

8、在一个实施方式中，核酸分子编码seq id no:2、seq id no:4、seq id no:6、seqid no:8、seq id no:10或seq id no:12中的至少一种氨基酸序列。在一个实施方式中，核酸分子包含seq id no:1、seq id no:3、seq id no:5、seq id no:7、seq id no:9、seq idno:11、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17或seq id no:18中的至少一种核苷酸序列。

9、在一个实施方式中，组合物包含编码lic_12340和lic_12985的组合的一种或多种核酸分子。在一个实施方式中，组合物包含编码seq id no:10和seq id no:12的组合的一种或多种核酸分子。在一个实施方式中，组合物包含含有seq id no:9和seq id no:11的组合的一种或多种核酸分子。

10、在一个实施方式中，组合物包含编码lic_12340、lic_12985、la_3490、la_0620和la_1402的组合的一种或多种核酸分子。在一个实施方式中，组合物包含编码seq id no:2、seq id no:4、seq id no:8、seq id no:10和seq id no:12的组合的一种或多种核酸分子。在一个实施方式中，组合物包含含有seq id no:1、seq id no:3、seq id no:7、seq id no:9和seq id no:11的组合的一种或多种核酸分子。

11、在一个实施方式中，组合物包含至少一种脂质纳米颗粒(lnp)，脂质纳米颗粒包含编码至少一种vm蛋白或其包含dna酶结构域的片段的至少一种核酸分子。在一个实施方式中，核酸分子包含mrna分子，该mrna分子编码至少一种vm蛋白或其包含dna酶结构域的片段。

12、在一个实施方式中，组合物包含疫苗。

13、在一个实施方式中，组合物包含佐剂。在一个实施方式中，佐剂是以稳定的水包油纳米乳液(se)配制的吡喃葡萄糖基脂质a(gla)。

14、在一个实施方式中，本发明涉及一种在受试者中诱导免疫应答的方法，该方法包括给予受试者包含至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其含dna酶结构域的片段的组合物或包含编码至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其含vm蛋白的dna酶结构域的片段的至少一种核酸分子的组合物。在一个实施方式中，受试者当前感染有钩端螺旋体属，并且组合物诱导针对钩端螺旋体属的免疫应答。

15、在一个实施方式中，本发明涉及一种在受试者中治疗或预防疾病或病症的方法，其包括给予受试者包含至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其含dna酶结构域的片段的组合物或包含编码至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)蛋白或其含vm蛋白的dna酶结构域的片段的至少一种核酸分子的组合物。在一个实施方式中，疾病或病症是癌症、细菌感染、病毒感染或寄生虫感染。

16、在一个实施方式中，本发明涉及一种在受试者中治疗或预防疾病或病症的方法，其包括给予受试者包含至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)抗体的组合物或包含编码至少一种钩端螺旋体毒力修饰(vm)抗体的至少一种核酸分子的组合物。在一个实施方式中，疾病或病症是钩端螺旋体病。