一种药物组合物及其制备方法和应用

本发明属于抗肿瘤药物领域，具体涉及一种药物组合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、阿霉素是一种对治疗肿瘤非常有效的药物，对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、肺癌、黑色素瘤等都有疗效，一种广谱类抗肿瘤药物，因此它也影响正常细胞，从而产生若干副作用。阿霉素的结构与柔红霉素非常相似，但阿霉素对多种恶性肿瘤都有非常好的治疗效果。由于阿霉素在水中得溶解度比较低，因此人们以其盐酸盐形式来增加其溶解度。

2、盐酸阿霉素在临床试验中已经显示了其良好的抗肿瘤活性，通常盐酸阿霉素经过静脉注，能够迅速的运送到心、肝、脾、肺、肾等组织中，但是在透过血脑屏障时有一定的难度。盐酸阿霉素在体内的代谢方式主要是肝脏代谢，但对正常组织和细胞来说，盐酸阿霉素对其杀伤作用也挺大，特别对心脏的伤害(h.pan,s.yang,w.cheng,q.cai,q.t.h.shubhra,trends endocrinol.metab2023,34,392.)。同时还会伴随一些副作用如脱发、恶心、呕吐等，这样在很大程度上限制了在临床上的应用。有研究表明，将盐酸阿霉素负载到磁性纳米颗粒上，通过外加磁场，定向的将盐酸阿霉素运送到病变部位，既可以有效地增加药效，又可以减少盐酸阿霉素的副作用，具有非常好的研究价值(m.hua,h.yang,h.liu,r.tsai,s.pang,k.chuang,y.chang,t.hwang,y.chang,h.chuang,c.chuang,biomaterials 2011,32,8999.)。

3、此外，免疫疗法通过动态调节免疫系统，从多个目标和方向攻击癌细胞，充分显示出其对抗恶性肿瘤的能力(j.c.del paggio,nat.rev.clin.oncol.2018,15,268.)。免疫疗法主要是通过调节免疫微环境，使免疫细胞能够攻击并清除重要节点的肿瘤细胞。相比于传统治疗方法，免疫疗法针对的靶标不是肿瘤细胞和组织，而是通过激活人体的免疫系统进行抗肿瘤反应。

4、免疫检查点疗法作为常见的癌症免疫疗法之一，有效地治疗肿瘤并预防肿瘤发生及复发(p.sharma,j.p.allison,nat.rev.immunol.2020,20,75.)。另外，免疫检查点抑制剂(ici)的开发，代表了近年来各种癌症类型的抗肿瘤治疗的转折点(p.sharma,j.p.allison,nat.rev.immunol.2020,20,75.)。肿瘤细胞能够通过抑制免疫检查点这一途径逃避免疫监视，而ici正是通过中断肿瘤细胞建立的抑制信号通路，重振抗肿瘤免疫反应并促进免疫系统消除肿瘤细胞。例如，pd-1/pd-l1是一种免疫系统中存在的抑制性信号通路，正常情况下用以维持自身免疫耐受。其中，pd-1是一种由268个氨基酸构成的i型跨膜蛋白，一种限制t细胞活化、增殖同时促进自身耐受的分子，用以识别肿瘤细胞表面抗原。恶性肿瘤细胞能够通过调节免疫检查点通路以及增加共抑制配体的表达(例如pd-l1)来逃避免疫监视，从而浸润淋巴细胞。目前在癌症治疗中有多种获得fda批准的ici，例如在临床实践中引入的纳武单抗(opdivo)和派姆单抗(pembrolizumab)明显改善了某些癌症类型的治疗效果。

5、通过阻断pd-1和pd-l1/pd-l2通路来增强t细胞功能的抗体已经发展成为癌症免疫治疗。很多研究表明单独阻断pd-1或pd-l1会使肿瘤病灶中t细胞及ifn-y增多，同时减少mdsc数量的百分比，这个结果表明通过中和pd-1、pd-l1或pd-l2来动态改变肿瘤微环境能有效控制肿瘤生长。

6、pd-1或pd-l1阻滞剂结合其他治疗可产生协同的治疗效果，如pd-1阻滞剂联合ctla-4阻滞剂可使肿瘤病灶浸润的淋巴细胞数量增加及mdsc数量减少，显著增加了cd8+t细胞分泌ifn-γ和tnf-a，使得肿瘤病灶变小。此外放、化疗联合pd-1/pd-l1通路阻滞剂的治疗效果正在被研究，这些研究结果为未来临床应用带来希望。

7、纳米药物递送系统由于其独特的结构而具有如下特点：(1)提高生物利用度，纳米药物递送系统可以通过改变药物分子的物理化学性质(水溶性、脂溶性等)改善其药代动力学，帮助药物分子跨越生理和病理屏障(j.shi,p.w.kantoff,r.wooster,o.c.farokhzad,nat.rev.cancer 2017,17,20.)；(2)实现主动、被动靶向，增加纳米药物在病灶内的局部浓度，提高药效的同时减少副反应的发生以达到更为安全有效的疾病诊治目的，因而使药物的毒性明显减少，同时对某些器官的刺激也明显降低(r.a.petros,j.m.desimone,nat.rev.drug discov.2010,9,615.)；(3)延长药物循环时间，控制药物释放，提高病人的依从性；(4)通过精巧“伪装”降低生物体内的免疫识别和网状内皮系统的清除作用，保护活性分子免受酶解，增加药物体内滞留时间、延长药物半衰期、增强药效(y.lu,a.a.aimetti,r.langer,z.gu,nat.rev.mater.2016,2,16075.)；(5)实现多样性和智能性。除生物活性的化学分子外，纳米载体也可包载多肽、核酸等生物活性物质，以及临床治疗外的造影剂等(x.zhang,t.ren,z.li,j.mater.chem.a2023,11,9239.)。

8、因此，研究化学疗法与免疫检查点疗法结合的靶向纳米药物递送平台具有重要的应用价值。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种药物组合物及其制备方法和应用。本发明提供的新型药物组合物作为一种靶向纳米载体，可降低阿霉素对正常器官的毒副作用，保护小干扰rna不被降解，靶向肿瘤组织等特点，不仅可以形成纳米载体，也能克服阿霉素在水中溶解度较低的问题。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物具有如下核-壳结构：a/b@c@d；

4、其中，a为铁离子与阿霉素配位形成的纳米颗粒，命名为铁:阿霉素纳米颗粒；b为小干扰rna；c为聚丙烯胺；d为透明质酸。

5、上述特定结构的药物组合物能够降低阿霉素对正常器官的毒副作用，保护小干扰rna不被降解，靶向肿瘤组织等特点，不仅可以形成纳米载体，也能克服阿霉素在水中溶解度较低的问题。

6、优选地，所述铁:阿霉素纳米颗粒为所述药物组合物的内核，所述透明质酸为所述药物组合物的外壳。

7、优选地，所述小干扰rna为pd-l1干扰序列。

8、优选地，所述聚丙烯胺的重均分子量为1000-2500da，例如1000da、1500da、2000da或2500da等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

9、优选地，所述透明质酸的重均分子量为5000-15000da，例如5000da、6000da、7000da、8000da、9000da、10000da、11000da、12000da、13000da、14000da或15000da等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

10、优选地，所述药物组合物的粒径为200-300nm，例如200nm、210nm、220nm、230nm、240nm、250nm、260nm、270nm、280nm、290nm或300nm等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

11、第二方面，本发明提供了如上所述的药物组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

12、(1)将铁离子与阿霉素混合，之后洗涤得到铁:阿霉素纳米颗粒；

13、(2)将步骤(1)得到的铁:阿霉素纳米颗粒与小干扰rna混合，得到负载小干扰rna的铁:阿霉素纳米颗粒；

14、(3)将步骤(2)得到的负载小干扰rna的铁:阿霉素纳米颗粒与聚丙烯胺混合，得到聚丙烯胺修饰并负载小干扰rna的铁:阿霉素药物组合物；

15、(4)将步骤(3)得到的聚丙烯胺修饰并负载小干扰rna的铁:阿霉素药物组合物与透明质酸混合，得到所述药物组合物。

16、优选地，步骤(1)所述铁离子的来源为铁盐水合物，所述铁盐水合物包括fe(no3)3·9h2o和/或fecl3·9h2o。

17、优选地，步骤(1)所述铁离子和阿霉素的摩尔比为(0.5-5):1，例如0.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1或5:1等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

18、优选地，步骤(1)所述混合的温度为20-40℃，例如20℃、25℃、30℃、35℃或40℃等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

19、优选地，步骤(2)所述小干扰rna和铁:阿霉素纳米颗粒的质量比为(1-10):1，例如1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1或10:1等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

20、优选地，步骤(3)所述聚丙烯胺和负载小干扰rna的铁:阿霉素纳米颗粒的质量比为(0.5-2):1，例如0.5:1、1:1、1.5:1或2:1等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

21、优选地，步骤(3)所述混合的温度为20-40℃，例如20℃、25℃、30℃、35℃或40℃等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

22、优选地，步骤(4)所述透明质酸和聚丙烯胺修饰并负载小干扰rna的铁:阿霉素药物组合物的质量比为(0.5-2):1，例如0.5:1、1:1、1.5:1或2:1等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

23、优选地，步骤(4)所述混合的温度为20-40℃，例如20℃、25℃、30℃、35℃或40℃等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。

24、第三方面，本发明还提供了如上所述的药物组合物在抗肿瘤药物制备中的应用。

25、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

26、本发明提供了一种特定结构的药物组合物，其能够降低阿霉素对正常器官的毒副作用，保护小干扰rna不被降解，靶向肿瘤组织等特点，不仅可以形成纳米载体，也能克服阿霉素在水中溶解度较低的问题。