[0041] 图4显示了通过基线BMI，视网膜厚度与基线的最小二乘方平均变化。由于治疗和 基线BMI之间的显著相互作用，最小二乘方平均值和P值估计为25%、50%和75% BMI四 分位数。最终的ANC0VA模型包含治疗效果、从基线开始的天数、基线视网膜厚度和BMI。所 述P值将各活性组与安慰剂组进行比较：所述Dunnett-Hsu方法用于多重比较调整。
[0042] 图5显示了在用达那唑培养HUVEC细胞后所测的0D水平，其为预防内皮细胞初始 增殖能力的量度。
[0043] 图6A-6E显示了在用达那唑培养后所拍摄的HUVEC细胞的照片，其为预防内皮细 胞管形成能力的量度。图6A显示的是对照；图6B显示的是1 yM达那挫；图6C显示的是 10 y M达那唑，图6D显示的是50 y M达那唑；和图6E显示的是50 y M LY294002。
[0044] 图7显示了在用达那唑处理HUVEC细胞后所测量的荧光，其为预防内皮细胞侵袭 能力的量度。
[0045] 发明详沐
[0046] 本发明通常涉及在有此需要的动物中抑制血管通透性过高的改进方法。该方法包 括确定该动物的体脂含量并根据该动物的体脂含量向该动物给药血管通透性过高抑制量 的达那唑化合物。已经确定的是，使用达那唑化合物来治疗血管通透性过高对给药达那唑 化合物的动物的体脂含量敏感。本发明提供了一种改进的方法，其通过个体基础上的校准 剂量来给药达那唑化合物以抑制血管通透性过高。更具体地，具有较高体脂含量的个体比 具有较低体脂含量的个体需要更高剂量的达那唑化合物来有效地治疗用于抑制血管通透 性过高。不受理论的限制，认为是由于达那唑化合物可溶于脂肪。因此，具有高体脂含量的 个体减少一些达那唑化合物，因为所述达那唑化合物在其体内被脂肪吸收。
[0047] 本文所用术语"体脂含量"是指动物的脂肪含量且可通过多种方式确定，包括但不 限于计算该动物的体质指数（BMI)、体脂百分比、瘦体重和体表面积。或者，合格的个体可对 个体进行定性评估以将个体归类到体脂含量类别。在优选的实施方案中，体脂含量是由动 物的BMI测定的。
[0048] 本文所用的BMI是由动物的体重和身高计算的值。根据疾病的控制和预防中心 (www. cdc. gov/healthyweight/assessing/bmi/adult bmi/index, html)，BMI 提供了一个 针对大多数人的可靠的体脂指标并用于筛选可导致健康问题的体重类别。BMI并不直接 测量体脂，但认为与直接测量体脂相关，例如通过水下称重或双能X-线吸收仪（DEXA ;低 水平X-线来确定体脂、骨和肌肉的量）（Validity of body mass index compared with other body-composition screening indexes for the assessment of body fatness in children and adolescents. American Journal of Clinical Nutrition 2002 ；7597 -985 ；Garrow JS and Webster J.Quetelet's index(W/H2)as a measure of fatness. International Journal of Obesity 1985;9:147 - 153)。成人和儿童 BMI 的计算方式相 同。BMI的计算可基于以下公式：
[0049] 公式：体重（kg)/[高度（m)]2
[0050] 根据公制，BMI的公式是体重（公斤）除以高度（米）的平方。由于身高常用厘 米进行测量，因此将以厘米计的身高除以1〇〇,得到以米计的身高。
[0051] 公式：体重（lb)/[身高（in)]2x 703
[0052] 计算BMI :以镑计的体重（lb)除以以英寸计的身高（in)的平方，并乘以转换因子 703〇
[0053] 对于20岁及以上的成人，BMI是使用标准体重状态类别解释的，所述标准体重状 态类别适用于所有年龄，无论男女。而对于儿童和青少年，BMI的解释由年龄和性别特异性 的。
[0054] 与成人BMI范围有关的标准体重状况类别如表1所示。
[0055] 表 1
[0056]
[0057] BMI数和身体肥胖之间的联系相当强；但是其因性别、种族和年龄而异。这 些变化包括以下实例（Prentice AM and Jebb SA. Beyond Body Mass Index. Obesity Reviews. 2001August;2(3): 141-7 ;Gallagher D,等人，How useful is BMI for comparison of body fatness across age, sex and ethnic groups ? American Journal of Epidemiology 1996;143:228 - 239):有同一 BMI，女人往往比男人具有更多的体脂；有 同一 BMI，平均情况下，老人往往比年轻的成人具有更多的体脂；高强度训练的运动员可具 有高BMI，这是由于增加的肌肉而并非增加的体脂。
[0058] 体脂含量和BMI是正相关的，即BMI平均值增加，那么体脂含量增加。
[0059] 本文所用体脂百分比或体脂比率是动物脂肪的总重除以该动物的总体重。体脂包 括必需体脂和储存体脂。必需体脂在维持生命和生殖功能上是必要的。女人的必需体脂百 分比比男人要高，是由于需要分娩和其他激素功能。男人的必需体脂的百分比是2-5%，而 女人是 10 _ 13%。（ACE(2009)What are the guidelines for percentage of body fat loss ? American Council on Exercise (ACE). Ask the Expert Blog. December 2,2009)。 储存体脂包括在脂肪组织中蓄积的脂肪，其中一部分用于保护胸部和腹部的内脏器官。最 不推荐总的体脂百分比超过上述必需脂肪百分比值。许多方法可用于确定体脂百分比，例 如用测径器进行测量或通过使用生化电阻分析（测量穿过动物体的电流速度）、水下称重、 双X-线吸收测定法进行测量。体脂百分比是健康水平的测定，因为它是唯一直接计算动物 的相对身体组成而不考虑身高或体重的身体测量。
[0060] 典型的体脂百分比是：
[0061] 男性体脂百分比：年龄 20-39 :8% -19% ;年龄 40-59 :11% -21% ;年龄 60-79 : 13% -24%。
[0062] 女性体脂百分比：年龄20-39 :21 % -32% ;年龄40-59 :23% -33%和年龄60-79 : 24% -35%。
[0063] 体脂含量和体脂百分比是正相关的，也就是说体脂百分比越高意味着体脂含量越 尚。
[0064] 本文所用的瘦体重（LBM)是身体组合的成分，其通过总体重减去体脂重量计算： 总体重为瘦肉加脂肪。方程是：
[0065] 瘦体重等于体重减去体脂：LBM=BW-BF。
[0066] 瘦体重加体脂等于体重：LBM+BF = BW。
[0067] 为瘦肉的总体重的百分比通常不举例-其通常为60 - 90%。或者，计算作为补充 的体脂百分比，且通常为10 _ 40%。
[0068] 体脂含量和瘦体重是负相关的，即，瘦体重越少说明体脂含量越多。
[0069] 本文所用的体表面积（BSA)是测量或计算人体的表面积。已发表了各种计算，不 用直接测量便可得到BSA。在以下式中，BSA的单位是m 2，W是体重，单位是kg，且H是高度，单 位是cm。使用最广泛的是Du Bois公式（Du Bois D，Du Bois EF(Jun 1916)。1 formula to estimate the approximate surface area if height and weight be known". Archives of Internal Medicine 17 (6):863 - 71 ;Verbraecken，J ;等人（Apr 2006) ?"Body surface area in normal-weight, overweight, and obese adults. A comparisonstudy". Metabolism-Clinical and Experimental 55(4):515 - 24)：
[0070] BSA =0.007184x ffa 425x H0 725
[0071] 体脂含量和BSA是正相关的，也就是说，BSA越尚意味着体脂含量越尚。
[0072] 根据该动物的体脂含量给药达那唑化合物的步骤可包括根据以下现象给药一定 量的达那唑化合物使得接受一定量达那唑化合物的个体有效地抑制血管通透性过高：高体 脂含量个体比低体脂含量个体需要更高剂量的达那唑化合物以抑制血管通透性过高。一旦 通过任意上述措施得到该个体的体脂含量，那么可确定达那唑化合物的适当量。例如且不 限于，在用BMI测定体脂含量的实例中，基于该动物的BMI得到的达那唑化合物的量可为 约0. 5mg/BMI单位/天至约1. Omg/BMI单位/天，或更具体地为约0. 5mg/BMI单位/天、约 0. 6mg/BMI 单位 / 天、约 0. 7mg/BMI 单位 / 天、约 0. 8mg/BMI 单位 / 天、约 0. 9mg/BMI 单位 / 天或约1. 〇mg/BMI单位/天。在本发明的另一方面，当该动物的BMI小于26时，则基于该动 物的BMI得到的达那挫化合物的每日剂量可为约2mg/天至约15mg/天。在优选的方面，当 该动物的BMI小于26时，该达那唑化合物的每日剂量为约5mg/天。仍在另一方面，当该动 物的BMI约26至35时，则基于该动物的BMI得到的达那唑化合物的每日剂量可为约2mg/ 天至约15mg/天。在优选的方面，当该动物的BMI为约26至35时，该达那挫化合物的每日 剂量为约l〇mg/天。还在另一方面，当该动物的BMI大于35时，则基于该动物的BMI得到 的达那挫化合物的每日剂量可为约5mg/天至45mg/天。在优选的方面，当该动物的BMI大 于35时，则基于该动物的BMI得到的达那唑化合物的每日剂量为约15mg/天。
[0073] 本文所用的"血管通透性过高"是指血管内皮的通透性比基础水平高。本文所用 的"血管通透性过高"包括细胞旁引起的通透性过高和跨细胞作用引起的通透性过高。
[0074] 本文所用的"细胞旁引起的通透性过高"是指由于细胞旁转运引起的血管通透性 过高，其比基础水平高。"细胞旁引起的通透性过高"的其他特征如下所述。
[0075] 本文所用的"细胞旁转运"是指离子、分子和液体穿过胞间连接 (interendothelial junction) (IEJ)的运动，所述胞间连接位于内皮的内皮细胞之间。
[0076] 本文所用的"跨细胞作用引起的通透性过高"是指由跨细胞作用导致的血管通透 性过高，其比基础水平高。
[0077] 本文所用的"跨细胞作用"是指大分子的主动运输并伴有液相血浆组分穿过内皮 的内皮细胞。"跨细胞作用"的其他特征如下所述。
[0078] 本文所用的"基础水平"是指在正常组织或器官中所见的水平。
[0079] 本文所用的"抑制"及类似术语是指减少、延缓或预防。
[0080] 如果动物目前患有由血管通透性过高介导的疾病或病症、呈现出该疾病或病症的 早期迹象，或具有发展成该疾病或病症的倾向，那么该动物"需要"本发明的治疗。
[0081] 本发明所用的"介导"及类似术语是指由血管通透性过高导致、导致、参与或恶化。
[0082] 本文所用的"一个"或"一种"是指一或多个。
[0083] 本发明在上文中特别描述了抑制血管通透性过高的改进方法，其根据该动物的体 脂含量向个体给药一定量的达那唑化合物。此方法是对下述通过给药达那唑化合物来抑制 血管通透性过高的常规方法的改进。该方法包括向有此需要的动物给药血管通透性过高抑 制量的达那唑化合物。根据本发明，抑制血管通透性过高包括抑制细胞旁引起的通透性过 高和跨细胞作用引起的通透性过高。最近的证据表明，跨细胞作用引起的通透性过高是许 多疾病或病症中最终导致组织和器官损伤的过程的第一步。因此，本发明提供了对这些疾 病或病症早期干涉的方式，其可减少、减缓或甚至有可能预防在其中可见的组织或器官损 伤。
[0084] 本发明还提供抑制存在于含有连续性内皮或被连续性内皮包围的任何组织或器 官中的血管通透性过高的改进方法。如上所述，连续性内皮存在于或包围脑（血脑屏障）、 膈、十二指肠、脂肪、心脏、肾脏的一些区域（乳突微脉管系统、下行直小血管）、大血管、肺 部、肠系膜、神经、视网膜（血视网膜屏障）、骨骼肌、皮肤、睾丸、脐静脉和身体的其它组织 和器官。优选地，连续性内皮发现在脑、心脏、肺部、神经或视网膜中或在脑、心脏、肺部、神 经或视网膜周围。
[0085] 本发明还提供抑制存在于含有开窗内皮或被开窗内皮包围的任何组织和器官中 的血管通透性过高的改进方法。如上所述，开窗内皮存在于或包围肾（肾小球、肾小管周围 毛细血管和上行直小血管）、胰腺、肾上腺、内分泌腺和肠。优选地，开窗内皮发现存在于肾 中，尤其是在肾的肾小球中。
[0086] 此外，通过血管通透性过高引起的任何疾病或病症可以通过本发明的方法来治 疗。这样的疾病和病症包括糖尿病、高血压和动脉粥样硬化。
[0087] 特别地，糖尿病的血管并发症，包括含有连续性内皮或开窗内皮的脑、心脏、肾脏、 肺部、肠系膜、神经、视网膜、骨骼肌、皮肤以及其它组织和器官的血管并发症可以通过本发 明来治疗。这些血管并发症包括水肿、LDL在内皮下空间的聚集、加速的动脉粥样硬化、以及 下述并发症：脑（血管壁的加速老化）、心脏（心肌水肿、心肌纤维化、舒张期功能障碍、糖 尿病性心肌病）、肾脏（糖尿病性肾病）、肺部（在患糖尿病的母亲中胎儿肺部发育的滞后、 一些肺部生理学参数的变化和感染敏感性的增加）、肠系膜（血管增生）、神经（糖尿病性 神经病变）、视网膜（黄斑水肿和糖尿病性视网膜病）和皮肤（发红、变色、干燥和溃疡）。
[0088] 糖尿病性视网膜病是导致失明的主要原因，其影响估计二千一百万患有糖尿病的 美国人中的约25%。尽管其发病率和发展可以通过加强血糖和血压控制来降低，但几乎所 有患有1型糖尿病的患者和超过60 %患有2型糖尿病的患者最终会发展成糖尿病性视网膜 病。糖尿病性视网膜病存在两个阶段。第一，非增生性视网膜病变，是该疾病的较早阶段且 其特征在于增加的血管通透性、微动脉瘤、水肿以及最终的血管闭塞。新血管化不是非增生 性阶段的成分。在这个阶段大部分的视觉丧失是由于黄斑（视网膜的中心区域）中的液体 积累。这种液体积累被称为黄斑水肿并且可以导致暂时或永久的视力降低。糖尿病性视网 膜病的第二阶段被称为增生性视网膜病变，且其特征在于异常新血管的形成。不幸地是，这 种异常新血管化可以是非常严重的损伤，这是因为其可以引起眼部的出血、视网膜瘢痕组 织、糖尿病患者的视网膜剥离或青光眼，这些中的任何均可以导致视力降低或失明。黄斑水 肿也会出现在增殖阶段。
[0089] 糖尿病性神经病变是糖尿病常见的严重的并发症。存在四种主要类型的糖尿病 性神经病变：周围神经病变、自主神经病变、神经根神经丛病变（radiculoplexus神经病） 以及单一神经病变。周围神经病变（最常见的糖尿病性神经病变类型）的表现和症状包 括：麻木，或感觉疼痛、或温度变化（尤其是脚部和脚趾）的能力降低、麻刺感或发烫感觉、 锐痛、走路时的疼痛、对于非常轻的接触极其敏感、肌无力、走路困难、以及严重的脚部问题 (例如溃烂、感染、变形以及骨和关节疼痛）。自主神经病变影响自主神经系统，自主神经系 统控制心脏、膀胱、肺部、胃、肠、性器官以及眼部，这些区域中的任何部分均可能出现问题。 神经根神经丛病变（也称为糖尿病肌萎缩、股神经病或近端神经病变（proximal神经病）） 通常影响臀部、肩部或腹部的神经，通常影响身体的一侧。单一神经病变是指仅损害一个神 经，通常是胳膊、腿或面部的神经。糖尿病性神经病变的常规并发症包括四肢（例如，脚趾、 脚或腿）的丧失、沙尔科关节（charcot joint)、尿路感染、尿失禁、无知觉性低血糖（甚至 可能是致死的）、低血压、消化问题（例如，便秘、腹泻、恶心以及呕吐）、性功能障碍（例如， 勃起功能障碍）、以及出汗增加或减少。可以看出，症状可以从轻微到疼痛、到失去能力以及 甚至是致死的。
[0090] 糖尿病性肾病是在美国引起末期肾脏疾病的最普遍的原因。其是糖尿病的血管并 发症，影响肾脏的肾小球毛细血管并且降低肾脏的过滤能力。首先显示患有肾病的是超过 滤的出现，以及随后的微量白蛋白尿。严重的蛋白尿和持续衰退的肾功能出现在末期肾脏 疾病之前。通常，在肾病的任何表现出现之前，通常会忽视视网膜病变。对于由糖尿病引起 的末期肾脏疾病患者通常建议进行肾移植。接受移植的患者5年存活率为约60%，相比地， 进行透析的患者5年存活率仅为2%。
[0091] 高血压通常发展很多年，并且其最终会影响几乎每个人。未受控制的高血压会增 加严重健康问题的风险，所述严重健康问题包括：心力衰竭、充血性心力衰竭、中风、周围动 脉疾病、肾衰竭、动脉瘤、眼部损伤、以及在记忆或认知方面出现问题。
[0092] 动脉粥样硬化也是逐渐发展的。动脉粥样硬化能够影响冠状动脉、颈动脉、周围动 脉或微脉管系统，动脉粥样硬化的并发症包括：冠心病（其可以引起心绞痛或心力衰竭）、 冠状微血管疾病、颈动脉疾病（其可以引起短暂性脑缺血发作或中风）、周围动脉疾病（其 可以引起对于热和冷的敏感度的丧失或甚至是组织死亡）、以及动脉瘤。
[0093] 根据本发明可以治疗的其它疾病和病症包括：急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)、老化相关性黄斑变性、脑水肿、脉络膜水肿、脉络膜炎、冠状微血管疾病、脑微血管 疾病、伊尔斯氏病（Eals病），由损伤（例如，创伤或烧伤）引起的水肿、与高血压相关的水 月中、肾小球血管渗漏、失血性休克、欧文-加斯综合征（Irvine Gass Syndrome)、缺血、黄斑 水肿（例如，由血管闭塞、眼内手术后（例如，白内障手术）、葡萄膜炎或视网膜色素变性引 起，以及由糖尿病引起的其它疾病）、肾炎（例如，肾小球肾炎、血清病性肾炎以及Thy-1肾 炎）、肾病、肾病水肿、肾病综合征、神经病、组织水肿引起的器官衰竭（例如，在败血病中或 由创伤引起）、先兆子痫、肺水肿、肺高血压、肾功能衰竭、视网膜水肿、视网膜出血、视网膜 静脉阻塞（例如，分支或中央静脉阻塞）、视网膜炎、视网膜病变（例如，动脉硬化性视网膜 病变、高血压性视网膜病变、放射性视网膜病变、镰状红细胞性视网膜病变以及早熟性视网 膜病变，以及其它糖尿病性视网膜病）、无症状性脑梗死、全身炎症反应综合征（SIRS)、移 植肾肾小球病、葡萄膜炎、血管渗漏综合征、玻璃体出血以及Von Hippie Lindau病。此外， 已知一些药物（包括那些用于治疗多发性硬化的药物）会引起血管通透性过高，并且达那 唑可以用来减少在使用这些药物时的上述不期望的副作用。遗传性和获得性血管性水肿可 以明确地与那些可以通过本发明治疗的疾病和病症区分。
[0094] 在本文中使用的"治疗"表示减少（全部或部分地）症状、减少疾病或病症的持续 时间或严重程度。还考虑了治愈疾病或预防疾病或病症，但是其与治疗疾病或病症不同。
[0095] 近期的证据显示转胞吞作用_引起的通透性过高是在多种疾病和病症中最终导 致组织和器官损害的过程的第一步。因此，本发明提供在这些疾病和病症中的早期介入手 段，其能够减少、延迟或甚至潜在地预防在这些疾病和病症中组织和器官的损伤。例如，基 于对于能够通过本发明治疗的疾病或病症（上述的那些疾病和病症）中的一种的诊断，可 以对动物立即进行治疗。或者，优选对于下述动物的治疗，所述动物在存在症状之前具有这 样的疾病或症状的早期表现或具有发展为这样的疾病或症状的表现或倾向。糖尿病、高血 压以及动脉粥样硬化的早期表现以及危险度因子是众所周知的，并且对于显示这些早期表 现或危险度因子的动物的治疗可以在疾病或病症的症状存在之前开始（即预防地）。
[0096] 例如，根据诊断，对于被确诊为患有糖尿病的患者的治疗可以立即开始。具体地， 糖尿病患者应当优选在出现血管并发症的任何症状之前，用达那唑化合物来治疗，尽管这 经常是不可能的，因此大多数糖尿病患者在其确诊时已显示这些症状（参见下文）。或者， 糖尿病患者应当在非增生性糖尿病性视网膜病较为轻微（即，微动脉瘤和视网膜内出血 的轻微水平）时接受治疗。参见糖尿病性视网膜病，第9页（编辑Elia Duh，M. D.，Human Press，2008)。这样的早期治疗可以提供预防黄斑水肿和从视网膜病变发展为增生性糖尿 病性视网膜病的最佳机会。此外，糖尿病性视网膜病的存在被认为是其它糖尿病的微血管 并发症存在或将会发展的表现（参见同上，474-477页），并且早期的治疗还可以预防或减 少这些其它的并发症。当然，糖尿病血管并发症的更重度的疾病和病症也可以利用有益结 果来治疗。
[0097] 但是，如上文所述，在糖尿病被确诊时，血管并发症通常已经存在。相应地，优选对 于具有发展为糖尿病的早期表现或倾向的病人进行预防性治疗。这些早期表现和危险度因 子包括空腹血糖高但是还未足够高地确定为糖尿病（"糖尿病前期"）、高胰岛素血症、高血 压、血脂障碍（高胆固醇、高甘油三酯、高低密度脂蛋白、和/或低水平高密度脂蛋白）、肥 胖（体重指数高于25)、不活泼、超过45岁、睡眠不足、家族糖尿病史、少数种族、妊娠糖尿病 史、以及多囊卵巢综合征史。
[0098] 相似地，根据诊断，对于被确诊为患有高血压的患者的治疗可以立即开始。高血压 通常不会引起任何症状，但是对于具有发展为高血压倾向的患者可以开始预防性治疗。高 血压的危险度因子包括年龄、种族（在黑人中高血压更为常见）、家族史（高血压在家族中 延续）、超重或肥胖、缺乏活力、吸烟、饮食中盐分过多、饮食中钾过少、饮食中维生素D过 少、饮酒过多、压力水平高、某些慢性条件（例如，高胆固醇、糖尿病、肾脏疾病以及睡眠性 呼吸暂停）以及使用某些药物（例如，口服避孕药、苯丙胺、减肥药丸、以及一些冷和过敏药 物（allergy medications))。
[0099] 对于被确诊为动脉粥样硬化的患者可以在诊断后立即开始治疗。但是，优选对于 具有发展为动脉粥样硬化的早期表现或倾向的患者进行预防性治疗。动脉粥样硬化的早期 表现和危险度因子包括年龄、动脉瘤或早期心脏疾病的家族史、高血压、高胆固醇、高甘油 三酯、胰岛素耐受性、糖尿病、肥胖、吸烟、缺乏体力活动、不健康饮食、以及高C-反应蛋白 水平。
[0100] 用来抑制血管通透性过高的本发明的方法包括向有此需要的动物给药有效量的 达那唑化合物以抑制血管通透性过高。在此使用的"达那唑化合物"是指达那唑、达那唑的 前药以及达那唑和其前药的药学上可接受的盐。
[0101] 达那唑（17 a-孕甾-2, 4-二烯-20-炔并[2, 3-d]_异噁唑-170-醇）是已知的 合成类固醇激素。其结构为：
[0102]
[0103] 制备达那唑的方法在本领域中是已知的。参见例如美国专利号 3, 135, 7