间皮瘤的治疗方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及使用结合神经节苷脂GM2抗原的抗体的治疗方法和诊断方法。本发明 还涉及包含结合神经节苷脂GM2抗原的抗体作为活性成分的治疗剂和诊断剂。
【背景技术】
[0002] 神经节苷脂是一种类型的糖脂，其由含有唾液酸的细胞外糖链组成部分和包埋在 脂双层中的神经酰胺构成，并以随着细胞类型、器官和动物物种而变的各种模式表达（非 专利文献1)。已揭示，神经节苷脂具有广泛的生物功能，包括细胞间识别，通过与细胞外基 质的相互作用控制细胞增殖，以及细胞分化（非专利文献2和3)。
[0003] 根据唾液酸结合的模式和数目以及结合于非还原末端的N-乙酰半乳糖 胺（GalNAc)和半乳糖（Gal)的存在或不存在来对神经节苷脂进行分类。GM2是具有 GalNAcf3l_4(SAa2_3)Gall_4Glcf3 1-1神经酰胺糖链结构的神经节苷脂的一个成员。
[0004] 已报道，随着癌细胞的发展，神经节苷脂表达经历量变和质变（非专利文献4)。还 已知道，在正常细胞中几乎不存在任何GM2表达，而在肿瘤例如肺癌、成神经细胞瘤和神经 胶质瘤中观察到高的GM2表达（非专利文献4和5)。这使GM2成为抗体癌症治疗中有吸引 力的靶抗原。
[0005] 间皮瘤，也被称为包覆间皮肿瘤或间皮肿瘤，是从中胚层起源的间皮（例如胸膜、 腹膜和心包膜）发展出来的肿瘤类型，并且被分类为局部良性肿瘤和弥散性恶性肿瘤。在 胸膜中发生的一种形式的恶性间皮瘤是恶性胸膜间皮瘤（在后文中，在某些情况下缩写为 MPM) 〇
[0006]MPM是从胸腔的间皮细胞发展出来的一种癌症形式，并以高生长速率为特征，通常 伴有胸膜积液（非专利文献6)。呼吸困难、呼吸短促和胸痛是MPM的一些症状，并且患者的 生活质量（Q0L)降低。石棉、铁和猿猴病毒40(SV40)是MPM的致病物质的已知实例（非专 利文献7和8)。
[0007] 具体来说，暴露于石棉已被认为与MPM的发病高度相关，并且具有石棉暴露史的 人处于MPM发病的显著提高的风险中。日本在1970至1980年间进口和使用了大量石棉 (非专利文献9)。由于MPM的潜伏期据信为石棉暴露后30至40年，因此预计从2010至 2020年，日本的MPM发病率极大增加。
[0008] 尽管MPM的唯一治疗是在发病的早期阶段移除肿瘤，但在临床上该疾病被发现时 通常处于高级阶段。此外，MPM对常用的化疗和放疗没有反应，并具有非常不良的预后，从 发病起的平均存活时间约为1年。因此，对可以改善该疾病预后的治疗方法存在着需求。
[0009] 引用文献名单
[0010] 非专利文献
[0011][非专利文献 1]J. Neurochem.，10, 613 (1963)
[0012] [非专利文献2]Curr.Opin.Immunol.，3, 646(1991)
[0013] [非专利文献3]Biochem.Biophys.Res.Commun.,192, 214 (1993)
[0014][非专利文献 4]CancerRes.，45, 2405(1985)
[0015][非专利文献f5]CancerRes.，5〇, 7444 (1"0)
[0016][非专利文献 6]CancerSci.，97, 183(2006)
[0017][非专利文献 7]CellMol.Biol.，17, 657(1997)
[0018][非专利文献 8]Am.J.Respir.Crit.CareMed.，153, 711 (1996)
[0019] [非专利文献 9]IndustrialHealth, 39, 65 (2001)
[0020] 发明概述
[0021] 发明解决的技术问题
[0022] 通过在早期阶段移除肿瘤来治疗间皮瘤。然而，在临床上该疾病被发现时通常处 于高级阶段，并且对常见的化疗和放疗反应不佳。因此，对用于改善该疾病预后的治疗方 法、治疗剂和诊断方法，存在着需求。
[0023] 因此，本发明的目的是提供有效用于间皮瘤的诊断和治疗，并且可以改善间皮瘤 患者的预后的治疗方法、治疗剂和诊断方法。
[0024] 解决技术问题的手段
[0025] 本发明涉及下列（1)至（13)。
[0026](1)-种用于间皮瘤的治疗剂或诊断剂，其包含结合神经节苷脂GM2的抗体或其 片段作为活性成分。
[0027] (2)⑴中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述间皮瘤是选自胸膜间皮瘤、腹膜间 皮瘤和心包间皮瘤中的一种。
[0028] (3) (2)中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述胸膜间皮瘤或所述腹膜间皮瘤是恶 性胸膜间皮瘤或恶性腹膜间皮瘤。
[0029] (4)⑴至（3)任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述抗体是与GM2的 a2-3连接的唾液酸（SA)结合的抗体。
[0030] (5)⑴至⑷任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述抗体是单克隆抗体。
[0031] (6) (1)至（5)任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述抗体是重组抗体。
[0032](7) (6)中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述重组抗体是选自嵌合抗体、人源化 抗体和人类抗体中的一种。
[0033] (8) (1)至（7)任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述抗体是包含分别具有 SEQIDN0 :1至3的氨基酸序列的重链（后文中的"H链"）互补决定区（⑶R;在后文中缩 写成"⑶R"）1至3和分别具有SEQIDN0 :4至6的氨基酸序列的轻链（后文中的"L链"） ⑶R1至3的抗体。
[0034](9)⑴至⑶任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述抗体是选自下列中的 一种：
[0035] 包含具有SEQIDN0 :7的氨基酸序列的H-链可变区（在后文中被称为"VH"）和 具有SEQIDN0 :8的氨基酸序列的L-链可变区（在后文中称为"VL"）的抗体；
[0036] 包含具有SEQIDN0:7的氨基酸序列的VH和具有SEQIDN0:9的氨基酸序列的 VL的抗体；
[0037] 包含具有SEQIDN0:10的氨基酸序列的VH和具有SEQIDN0 :8的氨基酸序列的 VL的抗体；和
[0038] 包含具有SEQIDNO:10的氨基酸序列的VH和具有SEQIDNO:11的氨基酸序列 的VL的抗体。
[0039] (10)⑴至（9)任一项中所描述的治疗剂或诊断剂，其包含使用至少一种合用药。
[0040] (11) (10)中所描述的治疗剂或诊断剂，其中所述合用药是选自化疗药剂和蛋白质 药物中的至少一种。
[0041] (12) -种治疗方法或诊断方法，其使用结合神经节苷脂GM2的抗体或其片段作为 活性成分。
[0042] (13)结合神经节苷脂GM2的抗体或其片段在制造间皮瘤治疗剂中的应用。
[0043] 发明的效果
[0044] 根据本发明，通过用包含抗神经节苷脂GM2抗体作为活性成分的诊断剂和治疗剂 诊断和治疗间皮瘤，可以改善GM2阳性间皮瘤患者的预后。
[0045] 附图简述
[0046][图1]图1是示出了GM2在恶性间皮瘤细胞系中的表达的流式细胞术分析结果的 柱状图。横轴表示GM2表达水平，纵轴表示细胞计数。实线柱状图和灰色柱状图分别表示 与抗GM2抗体和阴性对照抗体的反应。
[0047][图2]图2(a)和（b)示出了抗GM2抗体针对恶性间皮瘤细胞系MST0-211H的 ADCC活性的评估结果。纵轴表示细胞毒性（％)，横轴表示抗体浓度（iig/mL)。实心圆圈 表示使用抗GM2抗体的活性，空心圆圈表示使用阴性对照抗体（抗DNP抗体）的活性。呈 现了PBMC供体A[图2(a)]和供体B[图2(b)]的结果。
[0048][图3]图3示出了在使用恶性间皮瘤细胞系MST0-211H的SCID小鼠原位移植模 型中抗GM2抗体的抗肿瘤效果的评估结果。纵轴轴表示胸部肿瘤质量（mg)，横轴表示给药 样品的类型。实心圆圈表示单个胸部肿瘤质量（mg)，水平条表示平均值。通过进行Dunnett 多重比较检验来确定统计学显著的差异。
[0049][图4]图4示出了人类恶性间皮瘤组织供体信息，从左侧开始包括样品ID、年龄、 性别、组织起源（或检测到的组织）、通过病理学分类的疾病类型、TNM(肿瘤-淋巴结-转 移）分类、最低阶段分组、正常组织％、病变部位％、肿瘤组织％、肿瘤/细胞过多的基质％、 肿瘤/细胞过少或无细胞的基质％和坏死％。
【具体实施方式】
[0050] 本发明涉及包含抗神经节苷脂GM2抗体作为活性成分的治疗剂和诊断剂，包括向 间皮瘤患者给药抗神经节苷脂GM2抗体的治疗方法，以及使用抗神经节苷脂GM2抗体诊断 间皮瘤患者的方法。
[0051] 在本发明中，"间皮瘤"也被称为包覆间皮肿瘤或间皮肿瘤，并且是指从中胚层起 源的间皮（例如胸膜、腹膜和心包膜）发展出来的所有肿瘤。间皮瘤根据组织学类型被分 类为局部良性肿瘤和弥散性恶性肿瘤，并且这些肿瘤被涵盖在本发明的间皮瘤的定义中。
[0052] 胸膜起源的间皮瘤肿瘤被称为胸膜间皮瘤，恶性肿瘤被称为MPM。腹膜起源的间皮 瘤肿瘤被称为腹膜间皮瘤。
[0053] 在本发明中，"神经节苷脂GM2"是指具有GalNAcPl_4(SAa2-3) GalPl-4GlcP1-1神经酰胺结构的葡萄糖神经酰胺，并且也将被简称为"GM2"。GalNAc、 Gal、Glc和SA分别表示N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和唾液酸。
[0054] 本发明中使用的抗GM2抗体的实例可以包括结合包含GalNAcPl_4(SAa2-3) GalM-4GlcM_l神经酰胺结构的a2-3连接的唾液酸（SA)的表位的抗GM2抗体，结合所 述表位并显示出效应活性的抗GM2抗体，以及在间皮瘤患者中抑制胸膜积液产生的抗体。
[0055] 其他实例包括与任何上述抗体竞争与GM2的结合的抗体，与上述抗体所结合的表 位相同的表位结合的抗体，以及这些抗体的片段。
[0056] 具体来说，在本发明中使用的抗体可以是下列任一抗体：
[0057] 在JP-A-4-311385中描述的小鼠单克隆抗体KM750和小鼠单克隆抗体KM796;
[0058]在CancerRes.，46, 4116 (1986)中描述的单克隆抗体MoAb5_3;
[0059] 在CancerRes. ,48,6154(1988)中描述的单克隆抗体MK1-16和单克隆抗体 MK2-34 ；
[0060]在J.Biol.Chem.，264, 12122 (1989)中描述的单克隆抗体DMAb-1;
[0061] 在W02003/049704和W004/53102中描述的嵌合抗体DMF10. 167. 4抗体和嵌合抗 体ChGM2 ;
[0062]在JP-A-10-257893 中描述的由转化株KM8966(FERMBP-5105)产生的KM8966,