可 以提高或降低ADCC活性或⑶C活性。
[0104] 本发明的治疗剂可以通过给药于间皮瘤患者来治疗间皮瘤患者。在给药后，作为 活性成分被包含的抗GM2抗体与在间皮瘤细胞上表达的GM2特异性结合，并表现出各种抗 肿瘤效应，包括间皮瘤细胞生长的抑制效应、胸膜积液的产生的抑制效应和由效应细胞例 如自然杀伤细胞（NK细胞）引起的ADCC活性的诱导。因此，作为本发明的治疗剂，可以示 例的是包含抗GM2抗体作为活性成分的间皮瘤治疗剂。
[0105] 本发明的间皮瘤治疗剂可以是任何治疗剂，只要它包含抗GM2抗体作为活性成分 即可。通常，本发明的间皮瘤治疗剂优选地被提供成通过使用制药学领域中公知的方法而 生产的、作为与一种或多种可药用载体的混合物的药物制剂。
[0106] 优选地，使用通过将抗体溶解在水性载体例如水性溶液（例如水、盐水、甘氨酸、 葡萄糖、人类白蛋白等）中而制备的无菌溶液。此外，可以向制剂溶液添加可药用添加剂例 如缓冲剂或等渗剂（例如乙酸钠、氯化钠、乳酸钠、氯化钾、柠檬酸钠等），以接近生理条件。 此外，可以将它冷冻干燥然后储存。如果需要，可以在使用时将它溶解在适合的溶剂中。
[0107] 优选地，本发明的治疗剂通过对治疗最有效的途径给药。其实例可以包括口服给 药和肠胃外给药例如口腔、气管、直肠内、皮下、肌肉内、脊柱内或静脉内给药。其中，脊柱内 或静脉内给药是优选的。
[0108] 适用于口服给药的制剂的实例可以包括乳液、糖浆、囊剂、片剂、粉剂、颗粒剂等。 液体制剂例如乳液和糖浆，可以使用水，糖类例如蔗糖、山梨糖醇、果糖等，二醇类例如聚乙 二醇、丙二醇等，油类例如芝麻油、橄榄油、大豆油等，防腐剂例如对羟基苯甲酸酯等，调味 剂例如草莓调味剂、胡椒薄荷等作为添加剂来生产。囊剂、片剂、粉剂、颗粒剂等，可以使用 赋形剂例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇等，崩解剂例如淀粉、藻酸钠等，润滑剂例如硬脂 酸镁、滑石等，粘合剂例如聚乙烯醇、羟丙基纤维素、明胶等，表面活性剂例如脂肪酸酯等， 增塑剂例如甘油等作为添加剂来生产。
[0109] 适用于肠胃外给药的制剂的实例可以包括注射剂、栓剂、喷雾剂等。注射剂可以使 用载体例如盐溶液、葡萄糖溶液和其两者的混合物来制备。栓剂可以使用载体例如可可脂、 氢化脂肪、羧酸等来制备。
[0110] 喷雾剂可以使用原样的抗体或将它与不刺激接受者的口腔或气道粘膜并且可以 通过将所述抗体分散成细小粒子等来促进其吸收的载体一起使用来制备。载体的具体实例 可以包括乳糖、甘油等。取决于抗体和使用的载体的性质，可以生产诸如气溶胶和干粉的制 剂。此外，作为用于口服制剂的添加剂而示例的组分，也可以被添加到肠胃外制剂。
[0111] 本发明的治疗剂的给药剂量或频率将随着所需治疗效果、给药途径、治疗时间长 度、年龄、体重等而变。成年人的给药剂量通常为每日lyg/kg至10mg/kg。
[0112] 本发明的治疗剂涵盖了包含本发明中使用的抗GM2抗体和至少一种合用药的治 疗剂。
[0113] 合用药的实例可以包括化疗药剂和蛋白质药物。
[0114] 化疗药剂的实例可以包括多柔比星、脂质体多柔滨、顺铂、卡铂、长春新碱、氟达拉 滨、吉西他滨、培美曲塞、沙利度胺、来那度胺和泊马度胺。优选的是顺铂和培美曲塞。
[0115] 此外，例如，抑制与血管发生相关的酪氨酸激酶的E7080,也可以用作合用药。
[0116] 蛋白质药物的实例可以包括细胞因子和抗体。
[0117] 例如，细胞因子可以是激活免疫活性细胞例如NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、粒细 胞的效应细胞的细胞因子，以及这样的细胞因子的衍生物。
[0118]细胞因子的具体实例可以包括白介素-2(IL_2)、干扰素（IFN)-a、IFN-y、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21、分形趋化因子（fractalkine)、巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF)、GM-CSF、G-CSF和肿瘤坏死因子（TNF)-a、TNF- 0、IL-1a和IL-1 0，优选的实例 是IFN-
[0119] 所述抗体的实例可以包括针对本发明中使用的特异性结合GM2的重组抗体所靶 向的间皮瘤的治疗性抗体、抑制血管生成的抗体、激活免疫活性的抗体、这些抗体的片段或 融合抗体。
[0120]具体实例可以包括抗⑶40抗体（例如SGN-40和HCD122)、抗VEGF抗体（例如贝 伐单抗）、抗IL-6R抗体（日本专利号651541的说明书）、抗IL-6抗体（CNT0328)、抗CTLA4 抗体（例如易普利单抗）和抗CCR4抗体（例如莫格利珠单抗（mogamulizumab))等。
[0121 ] 本发明的抗体或抗体片段的实例可以包括结合于可以同时使用的药物的抗体或 抗体片段。
[0122] 本发明的治疗剂可用于治疗已发展出间皮瘤的组织，只要所述间皮瘤表达GM2即 可，而不论是良性还是恶性的。本发明还包括组合疗法，其中将包含抗GM2抗体作为活性成 分的用于间皮瘤的治疗剂与合用药同时或分开地给药。
[0123]本发明还包括治疗间皮瘤患者的方法，所述方法包括给药作为活性成分的抗GM2 抗体。本发明的用于治疗间皮瘤患者的方法还包括用于治疗间皮瘤患者的组合疗法，其中 将至少一种合用药与活性成分抗GM2抗体的给药同时或分开地给药于间皮瘤患者。在所述 组合疗法中，抗GM2抗体和合用药可以以任何顺序给药，并且可以按照间皮瘤患者的阶段 和状况恰当地决定。
[0124] 作为抗GM2抗体特异性结合表达GM2的间皮瘤细胞的结果，本发明的间皮瘤治疗 方法可以抑制间皮瘤细胞的增殖和胸膜积液的产生。
[0125] 通过抗GM2抗体与表达GM2的间皮瘤细胞的特异性结合，本发明的间皮瘤治疗方 法还可以表现出针对间皮瘤细胞的细胞毒性以及由患者身体中存在的效应细胞例如自然 杀伤细胞（NK细胞）所介导的ADCC活性，抑制间皮瘤细胞增殖和胸膜积液产生。
[0126] 因此，本发明还包括用于抑制间皮瘤细胞增殖的方法、用于在间皮瘤细胞中诱导 细胞毒性的方法和使用抗GM2抗体抑制胸膜积液产生的方法。
[0127] 本发明的治疗方法和治疗剂的有效性可以使用动物模型，通过体内抗肿瘤活性测 定法来检查。
[0128] 动物模型的实例可以包括通过将源自于人类癌组织的培养的细胞系移植到小鼠 中而制备的异种移植模型。可以通过将人类癌细胞系移植到免疫缺陷小鼠例如SCID小鼠 的各种不同位点，例如皮下、真皮内、胸内、心包内、腹膜内或静脉内，来产生所述异种移植 模型。
[0129] 动物模型可用于评估本发明的治疗剂的有效性，包括抗体的单独给药的有效性和 与合用药组合给药的有效性。
[0130] 本发明还包括用抗GM2抗体诊断间皮瘤的方法。通过用抗GM2抗体或其片段检测 或测定GM2或表达GM2的细胞和/或组织，可以诊断患有涉及GM2的间皮瘤的患者。
[0131] 首先，使用从健康个体的身体收集的生物样品，使用免疫学技术（在下文中描 述），利用抗GM2抗体或其片段或衍生物来检测或测定GM2,并确定来自于这些健康个体的 生物样品中GM2的量。
[0132] 还确定对象的生物样品的GM2水平，并与健康个体的水平进行比较。当对象的GM2 水平高于健康个体的水平时，对象被诊断为患有间皮瘤。
[0133] 免疫学技术是指使用标记的抗原或抗体检测或测定抗体或抗原水平的技术。例 如，使用放射免疫测定法、酶免疫测定法、荧光免疫测定法、发光免疫测定法、蛋白质印迹、 生理化学技术等。
[0134] 在放射免疫测定法中，例如，将抗GM2抗体或其片段与抗原或抗原表达细胞反应， 并进一步与放射性标记的抗免疫球蛋白抗体或结合片段反应。然后，使用闪烁计数器等进 行测量。
[0135] 在酶免疫测定法中，例如，将抗GM2抗体或其片段与抗原或抗原表达细胞反应，并 进一步与标记的抗免疫球蛋白抗体或结合片段反应。然后，使用吸收分光计测量生成的颜 色。例如，可以使用夹心ELISA。
[0136] 作为在酶免疫测定法中使用的标记物，可以使用任何已知的酶标记物[酶免疫测 定法（EnzymeImmunoassay),IGAKU-SH0INLtd. (1987)]。其实例包括碱性磷酸酶标记、过 氧化物酶标记、萤光素酶标记、生物素标记等。夹心ELISA是将抗体结合于固相，捕获待检 测或测量的抗原，并允许另一种抗体与被捕获的抗原反应的方法。
[0137] 在ELISA中，制备抗原识别位点不同的两种识别待检测或测量抗原的抗体或其抗 体片段，将一种抗体或抗体片段先行吸附在板（例如96孔板）上，并将另一种抗体或抗体 片段用荧光物质例如FITC、酶例如过氧化物酶或生物素等标记。
[0138] 允许吸附有上述抗体的板与从活体分离的细胞或其裂解液、组织或其破碎溶液、 细胞培养上清液、血浆、胸膜积液、腹水、眼液等反应，然后允许与标记的单克隆抗体或抗体 片段反应，并根据被标记的物质进行检测反应。试验样品中的抗原浓度，可以从通过已知浓 度的抗原的逐步稀释制备的校准曲线来计算。
[0139] 例如，用于GM2的ELISA可以以下列方式进行。将GM2溶解在含有磷脂酰胆碱和 胆甾醇的乙醇溶液中。然后将溶液分发到微量滴定板的每个孔中，并在空气干燥后用含有 牛血清白蛋白（BSA)的磷酸盐缓冲盐水（PBS)(在后文中缩写为"BSA-PBS"）进行阻断。然 后将GM2抗体与其反应，并进一步将用适合的酶标记的第二抗体与其反应，由此测定GM2水 平。
[0140] 作为用于夹心ELISA的抗体，可以使用任何多克隆抗体和单克隆抗体，或者可以 使用抗体片段例如Fab、Fab'和F(ab) 2。
[0141] 作为在夹心ELISA中使用的两种抗体的组合，可以使用识别不同表位的单克隆抗 体或抗体片段的组合，或者可以使用多克隆抗体与单克隆抗体或抗体片段的组合。
[0142] 焚光免疫测定法包括在文献[《单克隆抗体--原理与实践》（Monoclonal Antibodies-Principlesandpractice)，第三版，AcademicPress(1996);《单克隆抗体实 验手册》(ManualforMonoclonalAntibodyExperiments)，KodanshaScientific(1987)] 中描述的方法等。作为用于荧光免疫测定法的标记物，可以示例的是任何已知的荧光标记 物[焚光免疫测定法（FluorescentImmunoassay),SoftScience, (1983)]。例如，使用焚 光异硫氰酸酯（FITC)、RITC、Cy3、Cy5、Alexa等。
[0143] 发光免疫测定法使用在文献[生物发光和化学发光（Bioluminescenceand ChemicalLuminescence),临床试验（clinicaltest), 42,HirokawaShoten(1998)]中描 述的方法等来进行。作为用于发光免疫测定法的标记物，可以示例的是任何已知的发光标 记物。其实例可以包括吖啶酯、洛芬碱等。
[0144] 蛋白质印迹如下进行。通过SDS(十二烷基硫酸钠）_PAGE将抗原或表达抗原的 细胞分