一种提取艾叶中黄酮的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及天然物质中提取有效成分，具体为中药中提取黄酬领域。更具体地说， 本发明设及一种提取艾叶中黄酬的方法。
【背景技术】
[0002] 艾草多年生草本或略成半灌木状，植株有浓烈香气。全草可入药，有调经止血、安 胎止崩、散寒除湿之效。治月经不调、经痛腹痛、流产、子宫出血，根治风湿性关节炎、头风、 月内风等。因它可削冰令圆，又可炙百病，为医家最常用之药。现代实验研究证明，艾叶具有 抗菌及抗病毒作用;平喘、镇咳及桂疲作用;止血及抗凝血作用;镇静及抗过敏作用；护肝利 胆作用等。艾草可作"艾叶茶"、"艾叶汤"、"艾叶粥"等食谱，W增强人体对疾病的抵抗能力。 艾草具有一种特殊的香味，运特殊的香味具有驱蚊虫的功效。
[0003] 专利200710164447.2公开了一种艾叶总黄酬的制备方法，通过浓度为75-100%的 低分子醇溶剂进行两次分级提取，对浸提液用=级滤膜过滤器中分级过滤，滤液在40-45°C 的条件下减压浓缩至相对密度1.01-1.04,浓缩液用流量为40-6化A的速率通过高速离屯、 萃取机，用流量为40-6化A的己烧萃取分离，萃取后的浓缩液再在40-45°C浓缩至相对密度 1.06-1.08,制取的精制艾叶总黄酬质量不低于艾叶总重量的5%，其中5,7-二径基-6,3/， 少-=甲氧基黄酬的含量不低于1%。提取的总黄酬具有药用价值，理想的中药抗凝药物。经 检测，艾叶中的总黄酬含量在9-13%之间，上述方法流失掉近一半的总黄酬。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是采用闪式提取法粗提取艾叶中总黄酬，对艾叶进行粉碎性破 坏W提高总黄酬的提取量。
[0005] 本发明的还有一个目的是结合萃取法和色谱分离法，去除杂质并纯化总黄酬，使 总黄酬的纯度达到85% W上。
[0006] 为了实现根据本发明的运些目的和其它优点，提供了一种提取艾叶中黄酬的方 法，包括W下步骤：
[0007] 步骤1:用闪式提取器对艾叶进行提取，艾叶与提取剂乙醇的质量比为1:3~15、溫 度为25~50°C、转速为5000~lOOOOr/min，提取30~60s后停止；
[000引步骤2:乙醇提取液经离屯、分离得到上清液，上清液经减压精馈得到浓缩液A;
[0009] 步骤3:用去离子水水洗浓缩液A，再用萃取剂进行=级萃取，合并萃取液后精馈得 到浓缩液B;
[0010] 步骤4:用色谱柱对浓缩液B进行纯化，用50~70%浓度的甲醇溶解浓缩液，其中浓 缩液B与50~70 %浓度的甲醇溶液的质量比为1:8~15，上样后用洗脱剂洗脱，流速为0.5~ 1.5ml/min，得到的黄酬经真空浓缩后得到黄酬提取液。
[OOW 优选的是，其中所述步骤1中艾叶与提取剂乙醇的质量比为1:7~13。
[0012]优选的是，其中所述步骤3中萃取剂为氯仿、乙酸乙醋和正下醇中的一种。
[0013] 优选的是，其中所述步骤4中色谱柱洗脱剂采用浓度为40-70%甲醇水溶液洗脱。
[0014] 优选的是，其中所述洗脱剂为浓度为40-60%甲醇水溶液洗脱。
[0015] 优选的是，其中所述步骤4中色谱柱型号为S邱hadex LH-20。
[0016] 优选的是，其中所述艾叶提取前用乙醇浸泡4小时。
[0017] 优选的是，其中所述黄酬提取液用=氯化侣分光光度计法测定浓度。
[0018] 本发明至少包括W下有益效果：1、用闪式提取法粗提取艾叶中总黄酬，不仅提高 总黄酬的提取率，而且具有时间短和工艺简单的优点；2、结合萃取法和色谱分离法去除粗 提取液中杂质并纯化总黄酬，使总黄酬的纯度达到85% W上;3、制备过程中的溶剂或萃取 剂均采用减压精馈法回收，不仅能重复利用还能防止其排放进空气中造成污染。
[0019] 本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本 发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，W令本领域技术人员参照说明书 文字能够据W实施。
[0021] 应当理解，本文所使用的诸如"具有"、"包含"W及"包括"术语并不配出一个或多 个其它元件或其组合的存在或添加。
[0022] 利用正交实验表L9(34)对步骤2中闪式提取的提取剂用量、溫度、转速和时间此四 因素进行实验，便于找到最优化实验条件。
[0023] 表1正交试验四因素
[0025]实施例1:
[00%] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0027]步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入40g乙醇，提取溫度为25°C，闪式提 取器转速设为6000r/min，提取30秒。
[00%]步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液A 4.56g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0029] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B3.74g〇
[0030] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.2%黄酬提取液1.73邑。
[0031] 其中，步骤5中黄酬提取液浓度测定方法为:取黄酬提取液样品3.Oml于10.Oml容 量瓶中，加入1 %的S氯化侣3. Oml，静置5分钟使黄酬与S氯化侣充分络合后，在423nm特定 吸收波长处测定吸光度，经吸光度与浓度标准曲线计算后得到黄酬提取液浓度。
[0032] 实施例2:
[0033] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0034] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入40g乙醇，提取溫度为35°C，闪式提 取器转速设为8000r/min，提取45秒。
[0035] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液 A4.73g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0036] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B3.88g〇
[0037] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为90.8 %黄酬提取液1. SOg。
[003引实施例3:
[0039] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0040] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入40g乙醇，提取溫度为45°C，闪式提 取器转速设为l〇〇(K)r/min，提取60秒。
[0041] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液 A5.12g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0042] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B4.20g〇
[0043] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为90.88 %黄酬提取液1.85g。
[0044] 实施例4:
[0045] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0046] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入100g乙醇，提取溫度为25°C，闪式提 取器转速设为8000r/min，提取60秒。
[0047] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液 A5.87g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0048] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B4.81g〇
[0049] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.0%黄酬提取液2.13g。
[(K)加]实施例5:
[0化1 ] 步骤1:将20g