干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0052] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入100g乙醇，提取溫度为35°C，闪式提 取器转速设为l〇〇(K)r/min，提取30秒。
[0053] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液 A6.02g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0054] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B4.93g〇
[005日]步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.2%黄酬提取液2.15g。
[0化6] 实施例6:
[0化7] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[005引步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入100g乙醇，提取溫度为45°C，闪式提 取器转速设为6000r/min，提取45秒。
[0059] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液A 6.18g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0060] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B5.OTgo
[0061 ] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱]ladex LH-20色谱柱（40cmxl .5cm)用甲醇预 平衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真 空浓缩后得到浓度为91.1 %黄酬提取液2.23g。
[0062] 实施例7:
[0063] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0064] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入160g乙醇，提取溫度为25°C，闪式提 取器转速设为l〇〇(K)r/min，提取30秒。
[0065] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液A 6. OOg，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0066] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B4.92g〇
[0067] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.3%黄酬提取液2.17g。
[006引实施例8:
[0069] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0070] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入160g乙醇，提取溫度为35°C，闪式提 取器转速设为6000r/min，提取60秒。
[0071] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液A 6.12g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0072] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液 B5.02g〇
[0073] 步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.0%黄酬提取液2.23邑。
[0074] 实施例9:
[0075] 步骤1:将20g干艾叶用100g乙醇浸泡4小时。
[0076] 步骤2:将艾叶和乙醇加入闪式提取器，再加入160g乙醇，提取溫度为45°C，闪式 提取器转速设为8000r/min，提取45秒。
[0077] 步骤3:用离屯、机离屯、乙醇提取液，分离得到的上清液进行减压精馈，得到浓缩液 A6.22g，乙醇蒸汽经冷凝回收存放于试剂瓶。
[0078] 步骤4:将浓缩液用等体积的水进行水洗后，用20g氯仿进行第一次萃取，再用IOg 氯仿进行二次萃取，再用IOg氯仿进行=次萃取;合并萃取液后进行减压精馈得到浓缩液B 5.IOgo
[00巧]步骤5:用葡聚糖凝胶纯化，先将S邱hadex LH-20色谱柱(40cmxl.5cm)用甲醇预平 衡，之后用65 %甲醇200ML溶解浓缩液，取IOml上样，用洗脱剂洗脱，流速为Iml/min，经真空 浓缩后得到浓度为91.2%黄酬提取液2.25邑。
[0080] 将实施例1-9中黄酬质量汇总与正交表中，通过方差分析计算找出最佳实验条件。
[0081] 表2正交实验结果汇总表
[0083] 由表2可知，艾叶与提取剂用量比和溫度对实验影响较大，转速和时间影响小，最 佳实验条件为:艾叶与提取剂用量比1:13、溫度为45°C，转速和时间设置在合理范围内。
[0084] 经计算最佳实施例9的黄酬质量为2.25g，占艾叶质量的11.25 %，较传统方法提取 率5 %提高到11.25 %，黄酬提取纯度达到90 % W上。
[0085] 本发明至少包括W下有益效果：1、用闪式提取法粗提取艾叶中总黄酬，不仅提高 总黄酬的提取率，而且具有时间短和工艺简单的优点；2、结合萃取法和色谱分离法去除粗 提取液中杂质并纯化总黄酬，使总黄酬的纯度达到85% W上;3、制备过程中的溶剂或萃取 剂均采用减压精馈法回收，不仅能重复利用还能防止其排放进空气中造成污染。
[0086] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用。它完全可W被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限 于特定的细节和运里示出与描述的实施例。
【主权项】
1. 一种提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:用闪式提取器对艾叶进行提取，艾叶与提取剂乙醇的质量比为1:3~15、温度为 25~50°C、转速为5000~10000r/min，提取30~60s后停止； 步骤2:乙醇提取液经离心分离得到上清液，上清液经减压精馏得到浓缩液A; 步骤3:用去离子水水洗浓缩液A，再用萃取剂进行三级萃取，合并萃取液后精馏得到浓 缩液B; 步骤4:用色谱柱对浓缩液B进行纯化，用50~70 %浓度的甲醇溶解浓缩液，其中浓缩液 B与50~70 %浓度的甲醇溶液的质量比为1: 8~15，上样后用洗脱剂洗脱，流速为0.5~ 1.5ml/min，得到的黄酮经真空浓缩后得到黄酮提取液。2. 如权利要求1所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述步骤1中艾叶与提取 剂乙醇的质量比为1:7~13。3. 如权利要求1所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述步骤3中萃取剂为氯 仿、乙酸乙酯和正丁醇中的一种。4. 如权利要求1所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述步骤4中色谱柱洗脱 剂采用浓度为40-70%甲醇水溶液洗脱。5. 如权利要求4所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述洗脱剂为浓度为40-60%甲醇水溶液洗脱。6. 如权利要求1所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述步骤4中色谱柱型号 为Sephadex LH-20。7. 如权利要求1-7中任一项所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述艾叶提取 前用乙醇浸泡4小时。8. 如权利要求1所述的提取艾叶中黄酮的方法，其特征在于，所述黄酮提取液用三氯化 铝分光光度计法测定浓度。
【专利摘要】本发明公开了一种提取艾叶中黄酮的方法，用闪式提取器对提取艾叶，艾叶与乙醇质量比为1∶3～15、温度为25～50℃、转速为5000～10000r/min，提取30～60s后停止；乙醇提取液经离心分离得到上清液，上清液经减压精馏得到浓缩液A；水洗浓缩液A，再用萃取剂进行三级萃取，合并萃取液后精馏得到浓缩液B；用色谱柱对浓缩液B进行纯化，用50～70％浓度的甲醇溶解浓缩液，其中浓缩液B与50～70％浓度的甲醇溶液的质量比为1∶8～15，上样后用洗脱剂洗脱，流速为0.5～1.5ml/min，得到的黄酮经真空浓缩后得到黄酮提取液。本方法具有提高总黄酮的提取率，而且具有时间短和工艺简单的优点。
【IPC分类】A61K36/282
【公开号】CN105535061
【申请号】CN201510917101
【发明人】黄丽婷
【申请人】黄丽婷
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月10日