Tsg的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及动物医学领域，尤其涉及TSG的用途。
【背景技术】
[0002] TSG全称2，3，5，4/ -tetrahy-droxystilbene-2-〇-0-D-glucoside，中文名为2，3， 5，4-四羟基二苯乙烯-2-〇-f3-D吡喃葡萄糖苷，分子量为406.39，化学式为C2〇H22〇 9，结构式如 式1所示。
[0004] TSG是一种多羟基酚类化合物，是一种易溶于水的白色粉末。研究发现TSG具有多 种生理活性，其药理作用十分广泛，其药用价值受到人们的广泛青睐。
[0005] 精液品质是公猪繁殖力的一个重要指标，精液品质不良是母猪不孕的重要原因之 一。对于现代养猪生产来说，公猪精液品质不良是一种经常出现的问题。
[0006] 在改善种公猪精子质量方面，研究者们采用多种方式，通过一些化学合成药物、抗 生素、一些中草药复方制剂及中草药提取物等的抗氧化剂可以清除精子内过量的R0S。维生 素类和脂肪酸对于维持正常精液质量维生素 A对维持精液品质有着重要的作用，其缺乏会 导致种公猪的繁殖性能力下降、性欲下降、影响精子的生成，从而影响精液品质下降，影响 生殖器官的发育。李雪梅等将维生素 A加入种公猪基础日粮中，发现采精量、精子密度有所 提高，精子畸形率降低，保证精子质量。王怀禹等人发现将适宜剂量维生素 E加入日粮中，提 高了精液品质。矿物质元素对于维持种公猪的精液品质具有一定的影响，其中钙和磷是最 重要的，含量一般在〇. 85 % -0.90 %和0.70 % -0.80 % ;锌对精液品质也有一定的影响，锌是 多种酶的组成成分及激活剂，对精子的发育形成、精子活力、密度和精液量都具有明显的作 用。何若刚等发现，锌能显著提高精子活力、有效精子数并降低精子畸形率。矿物质元素硒 会使种公猪性欲减退，精液品质下降。苏惠龙等发现硒能提高精子活力、降低畸形率并保证 顶体膜从而提高精子质量。维生素 E是体内主要的抗氧化剂，也是精子中有效的抗氧能够保 护精子细胞膜、线粒体膜及顶体膜等的生物膜的完整性，保护精子细胞免受R0S损害。在生 殖上维生素 E有调节性腺功能和延长精子寿命的作用。杨文瑾发现亚硒酸钠维生素 E发挥了 硒和维生素 E的协同抗氧化作用，能够维持精子顶体细胞膜的机能。Echeverria-Alonzo等 发现硒对精液品质的提高效果强于VEJC属于水溶性抗氧化剂，Ivos在公猪日粮中添加 VC， 发现其可以抵抗热应激，VC能提高高频率采精期公猪的精液。Paul enz在公猪日粮中添加富 含n-3PUFA的鱼肝油，能够改善精液品质。
[0007] 除此之外，某些植物具有抗氧化性，如红景天、龙胆属植物、迷迭香等植物。抗氧化 剂成分，可以清除精子内过量的R0S，减轻R0S对精子的损伤。提高保护精子质膜、正常形态 精子率及其运动力、降低畸形率。zhao实验表明在猪冻精中加入红景天后精子R0S减少，谷 胱甘肽还原酶等增加，减少了精子结构的损害。Mourvaki等将亚麻仁油添加到种公猪日粮 中，发现精子质膜结构得到改善。某些植物源性抗氧化剂中分离的单体物质:黄酮、多酚、生 物碱、皂苷、多糖、番茄红素、枸杞多糖等抗氧化剂成分。均可抑制或清除精子内过量的R0S， 增加抗氧化酶水平，抵抗由氧化应激导致的精子结构损伤，提高精子浓度和活力，保证精子 质量。研究表明褪黑素(MLT)能够精子质量，李博玲在猪精液冷冻稀释野种添加 MLTO. 25mg/ ml能显著提高精子活率、活力、线粒体活性和顶体完整性。
[0008] 龙翔等用由当归、熟地、香附、阳起石、淫羊藿、川断、菟丝子、玄参组成的添加剂饲 喂种公猪，发现能极显著提高精液量、精子密度、精子成活率，同降低精子顶体异常率、精子 畸形率。谷新利等用淫羊藿和菟丝子等组成的中草药添加剂饲喂种公羊，结果精液品质明 显改善。邱黛玉用当归、党参、黄芪、淫羊藿等组成的复方中草药制剂，公羊射精量增加、精 子密度升高、精子畸形率降低，精液品质得到明显改善你呢。鼠尾草一种传统的中药，Jasem 等用其乙醇提取饲喂大鼠，其具有改善雄性生殖功能作用的。研究显示，含多个羟基的化合 物，如二苯乙烯苷、茶多酚、淫羊藿有效成分箭叶淫羊藿素 A~E等，李永刚羟基自由基可与 芳香环发生加成反应，可清除R0S。杨欣等证明淫羊藿水提物具有抗氧化性，能清除精子内 多余R0S，显著改善精子体外运动功能。段润甲基于止痢草油中含有活性成分香芹酚和百里 香酚，均具有强的抗氧化能力，能有效抑制脂质过氧化。种公猪日粮中添加止痢草油500mg/ kg可以提尚精液抗氧化酶活力，抑制精子脂质过氧化，从而提尚了公猪的精子活力。杨欣研 究菟丝子水提物对人精子顶体和超微结构的保护作用，发现适宜含量(0.25g/mL)的菟丝子 水提物具有抗氧化性，可拮抗R 0S的过氧化损伤作用，对精子膜、顶体结构和精子线粒体功 能具有明显的保护作用。肉灰蓉苯乙醇苷(Phenylethanoidgly_cosides，PhGs)含有多个酸 羟基，是抗氧化和抗衰老的主要成分，能够结合体内自由基，避免其在体内的大量蓄积，保 护机体免受过量氧化损伤。李刚证明PhGs发挥其抗氧化性，抑制精子膜脂质过氧化反应并 对精子膜结构及功能具有一定的保护作用。
[0009] 可见，目前在提高种公猪精液品质技术方面，大部分采用通过一些化学合成药物、 抗生素、一些中草药复方制剂及中草药提取物等。但这些物质作用有限，没有能够很好的提 高精子的活力。且有些药物具有毒性及抗药性，会种公猪产生毒害作用，最终危害人类健 康。故而，进一步研究提尚公猪精液品质的方法具有十分重要的意义。
【发明内容】
[0010] 有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供TSG的用途;该化合物能够降低精子 内Ca2+水平和/或R0S水平，从而提高精子的活率和活力。
[0011 ] TSG在降低精子内Ca2+7K平和/或R〇S水平中的应用。
[0012]本发明中，所述精子为猪的精子。
[0013] 本发明中，实验采用的猪为杜洛克猪。
[0014] TSG在降低精子内Ca2+水平中应用的浓度为0.5yg/mL~4yg/mL。
[0015] TSG在降低精子内Ca2+水平中应用的浓度为0 · 5yg/mL、lyg/mL、2yg/mL或4yg/mL〇
[0016] TSG在降低精子R0S水平中应用的浓度为0.5yg/mL~4yg/mL。
[0017] TSG在降低精子R0S水平中应用的浓度为0.5yg/mL、lyg/mL、2yg/mI^4yg/mL。
[0018] 活性氧自由基(reactive oxygen species，R0S)，是机体在代谢过程中产生的一 类中间物，研究表明，R0S引起的精子膜脂类过氧化反应是造成精子存活率降低和运动丧失 的主要原因之一。本发明实验表明，相对于未经TSG处理的精液，以TSG处理精液2h后，精子 内R0S水平显著降低(p〈0.01)。且采用不同浓度处理TSG的实验组之间效果并无显著差异(p >0.05)〇
[0019] Ca2+在精子发生、成熟、获能等过程中发挥重要的作用，是精子运动的调控者，顶体 反应的第二信使。现有技术中，常通过增加 Ca2+浓度来增强精子活力，本发明实验结果表明， 抑制Ca2+水平有利于精子活力保持。本发明实验表明，相对于未经TSG处理的精液，以TSG处 理精液2h后，精子内Ca 2+水平受到显著的抑制(？〈0.01)。且采用不同浓度处理了56的实验组 之间效果并无显著差异(P>〇.05)。
[0020] 本发明还提供了 TSG在提高精子活力中的应用。
[0021 ]本发明中，所述精子为猪的精子。
[0022]本发明中，实验采用的猪为杜洛克猪。
[0023] TSG在提高精子活力中应用的浓度为0.5yg/mL~4yg/mL。
[0024] TSG在提高精子活力中应用的浓度为0.5yg/mL、lyg/mL或4yg/mL。
[0025] 实验表明，浓度为0.5yg/mL或lyg/mL TSG对精子活力的提高作用更明显。
[0026] 精子活率指精液中活精子所占的百分率。精子活力指精液中呈前进运动精子所占 的百分率。本发明实验证实，在lh内，是否以TSG处理精液，精子的活力差别不显著（p> 0.05)，而2h后，经TSG处理的精液中精子的活力显著(p〈0.01)高于未经处理的精液中精子 活力。并且，本发明的实验显示，在提高精子活力的同时，TSG对精子的活率并不产生影响。 [0027]本发明还提供了一种提高精子活力的制剂，其中包括TSG。
[0028]本发明提供的精子活力制剂中包括TSG和PBS缓冲液。
[0029] 本发明提供的提高精子活率的制剂以PBS缓冲液溶解TSG制成。
[0030] 其中，PBS的pH值为7.4;TSG的浓度为1~10mg/mL;优选的，TSG的浓度为lmg/mL。 [0031 ]本发明还提供了一种提高精子活力的方法，该方法为:使TSG与精液混合。
[0032]以本发明提供方法提尚活力的精子为猪精子。
[0033] 提高精子活力的TSG的浓度为0·5yg/mL~4yg/mL。即每yg TSG与5yL~40yL精液混 合。
[0034]本发明提供了 TSG通过抑制Ca2+水平和R0S水平来提高精子活力的应用，本发明提 供的实验证明，TSG能够提高精子活力而不影响精子的活率。实验表明，浓度为0.5yg/mL~4 yg/mL的TSG对精子活力的提高作用十分显著(p〈0 · 01)。
【附图说明】
[0035] 图1示TSG对精子活力的影响；其中，林示Ρ〈0 · 01;
[0036]图2示不同浓度TSG处理种公猪精子2h后对其精子活力的影响；其中，□示TSG浓度 为Oyg/mL处理组；國示TSG浓度为0 · 5yg/mL处理组;鏺示TSG浓度为lyg/mL处理组；示TSG 浓度为4yg/mL处理组；
[0037]图3示TSG对精子活率的影响(各组数值P>0.05);
[0038] 图4流式细胞仪检测分析不同浓度TSG对精子内Ca2+水平的影响;其中，图4-a示空 白对照组，图4-b示0.5yg/mL的TSG处理组，图4-c示lyg/mL的TSG处理组，图4-d示2yg/mL的 TSG处理组；图4-e示4yg/mL的TSG处理组；
[0039] 图5示TSG对精子内Ca2+水平的影响;其中，林示P〈0.01;
[0040] 图6示流式细胞仪检测分析不同浓度TSG对精子内R0S水平的影响；其中，图6-a示 空白对照组；图6-b示