1.一种二价抗体,包含(a)包含了抗体的轻链和部分重链的抗原结合片段(Fab),以及(b)融合至所述轻链或所述部分重链的C端的单域抗原结合片段(VHH),其中所述部分重链不包含CH2或CH3域。
2.根据权利要求1所述的二价抗体,其中所述VHH片段被融合至所述部分重链。
3.根据权利要求2所述的二价抗体,其中所述二价抗体进一步包含融合至轻链的第二种VHH片段。
4.根据权利要求1至3中的任一项所述的二价抗体,其中所述Fab片段和所述VHH片段每一个都具有对肿瘤细胞或免疫细胞的特异性。
5.根据权利要求4所述的二价抗体,其中所述Fab片段对肿瘤抗原具有特异性,并且所述VHH片段对免疫细胞具有特异性。
6.根据权利要求5所述的二价抗体,其中所述肿瘤抗原选自CEA、EGFR、Her2、EpCAM、CD20、CD30、CD33、CD47、CD52、CD133、 CEA、gpA33、黏蛋白、TAG-72、CIX、PSMA、叶酸结合蛋白、 GD2、GD3、GM2、VEGF、VEGFR、整合素、αVβ3、α5β1、ERBB2、ERBB3、MET、IGF1R、EPHA3、TRAILR1、TRAILR2、 RANKL、FAP 和Tenascin。
7.根据权利要求5所述的二价抗体,其中所述肿瘤抗原为CEA或Her2。
8.根据权利要求5所述的二价抗体,其中所述VHH片段对哺乳动物T细胞或哺乳动物NK细胞具有特异性。
9.根据权利要求5所述的二价抗体,其中所述VHH片段对选自CD3、CD16、CD19、CD28 和CD64的抗原具有特异性。
10.根据权利要求9所述的二价抗体,其中所述抗原为CD16 或CD3。
11.根据权利要求1到3或权利要求5到9中任一项所述的二价抗体,其中所述VHH片段在Kabat位点37、 44、 45、 47处分别不包含Val、Gly、 Leu和 Trp 残基。
12.一种宿主细胞,其包含一个或多个编码上述权利要求任一项所述的二价抗体的多核苷酸。
13.根据权利要求12所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞是细菌细胞或酵母细胞。
14.根据权利要求12所述的宿主细胞,其中宿主细胞为E. coli。
15.一种制备可溶性抗体的方法,所述方法包含培养权利要求12-14中任一项所述的宿主细胞,以及收获在所述细胞中表达的抗体。
16.权利要求1-11的任一项所述的二价抗体在制备治疗癌症的药物中的应用。