技术总结
本发明公布了一种利用CRISPR‑Cas9靶向敲除MSTN基因的方法，该方法通过对多物种进行同源对比选取两对MSTN基因靶序列，利用gRNA的PAM设计原则，合成两对靶序列不同，表达的蛋白相同，带有相同BsmBI粘性末端的DNA双链，将双链与pPDNA330质粒进行连接得到携带有多物种的MSTN同源基因的重组载体，重组载体利用荧光蛋白表达法对基因敲除效率进行检测，选择敲除效率更高的载体转染多物种受体细胞，进行基因敲除并验证，完成对多物种MSTN基因进行简单、高效、精确的基因敲除。
技术研发人员：朱鹏;梁贤威;庞春英;邓廷贤;段安琴;陆杏蓉
受保护的技术使用者：广西壮族自治区水牛研究所
文档号码：201610470813
技术研发日：2016.06.24
技术公布日：2016.11.16