尼日利亚菌素的纯化方法与流程

文档序号:11827274阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种尼日利亚菌素的纯化方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:

1)胞内含尼日利亚菌素的链霉菌发酵液进行固液分离过滤,得到菌丝体;

2)菌丝体用酒精浸泡提取,得到浸提液,减压浓缩浸提液至无酒精为止,得到浓缩后的浸提液,用乙酸丁酯或乙酸乙酯萃取浓缩后的浸提液,取上相萃取液并浓缩至干,得到稠状浓缩物;

3)用甲醇或者乙醇溶液溶解步骤2)中的稠状浓缩物,过滤后得滤液;

4)用非极性烷烃溶剂与水共同萃取步骤3)中的滤液,取下相液,浓缩下相液中的烷烃层至干,得含有尼日利亚菌素粗品;

5)用乙醇溶液溶解步骤4)中的尼日利亚粗品,得到尼日利亚粗品醇溶液;

6)用非极性烷烃溶剂与水共同萃取步骤5)中的中尼日利亚粗品醇溶液,取上相液,蒸发浓缩上相液的烷烃,析出白色固体;

7)抽滤步骤6)中白色固体,并用非极性烷烃浸润洗涤该白色固体;

8)烘干步骤7)中白色固体,即得到含有尼日利亚菌素固体。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤2)中酒精与菌丝体重量比为8:1至10:1。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤2)中浓缩后的浸提液与每次萃取用的乙酸丁酯或乙酸乙酯的体积比为1:1;用乙酸丁酯或乙酸乙酯萃取浓缩后的浸提液2次,每次萃取都取上相萃取液,合并第一次和第二次的上相萃取液并浓缩至干,得到稠状浓缩物。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的步骤3)中甲醇或者乙醇与步骤2)中的稠状浓缩物的重量比为2:1至5:1。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤3)用甲醇或者乙醇溶液溶解步骤2)中的稠状浓缩物后过滤前,还包括用活性炭进行脱色处理,活性炭与步骤2)中的稠状浓缩物的重量比为2:100。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的非极性烷烃溶剂为正己烷、环己烷的一种或者多种。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤4)中每次萃取用的非极性烷烃溶剂与步骤3)中的滤液体积比1:1,水与步骤3)中的滤液体积比0.01:1至0.1:1;萃取次数为3次。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤5)中乙醇与步骤4)中尼日利亚菌素粗品重量比为3:1至10:1。

9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤6)中非极性烷烃溶剂与步骤5)中尼日利亚粗品醇溶液体积比为1:1至3:1,水与步骤5)中尼日利亚粗品醇溶液体积比0.01:1至0.1:1。

10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤8)中烘干温度为45℃-50℃,烘干时间为3至5小时。

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