一种芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺的制作方法

文档序号:12249428阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:包括以下步骤:

(1)种子培养:将芽胞杆菌接至LB培养基中进行种子培养得到发酵菌种;

(2)发酵培养:将发酵菌种接至发酵培养基中进行发酵培养,所述发酵培养基配方为:葡萄糖10-50g/L、酵母粉0.1-2.0g/L、硫酸铵1-10g/L、二水合柠檬酸三钠1-18g/L、磷酸氢二钾0.10-2.00g/L、硫酸镁0.1-2.0g/L、氯化铁0.02-0.30g/L、硫酸锰0.005-0.50g/L、氯化钙0.1-1.0g/L、吐温-80 0.01%-1%,pH7.0-7.5;所述发酵培养条件为:培养温度25-40℃,摇床转速180-240r/min,发酵时间24-40h;

(3)将发酵液离心,去除上清液后得到菌体沉淀,经强碱溶解强酸沉淀后、提取纯化得到目标代谢产物。

2.如权利要求1所述的芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:步骤(1)所述芽胞杆菌包括枯草芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌中的一种或几种。

3.如权利要求2所述的芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:步骤(1)所述芽胞杆菌包括:枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)168,保藏编号为ATCC23857;解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)LX-12,保藏编号为CCTCC No:M2015234,保藏日期:2015年4月15日,保藏中心:中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国武汉武汉大学;地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)DW2,保藏编号为CCTCC No:M 2011344,中的一种或几种,保藏日期:2011年10月12日,保藏中心:中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国武汉武汉大学。

4.如权利要求1所述的芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:步骤(2)所述发酵培养条件还包括:接种量为1%-5%,种龄为6-14h,发酵pH 6.5-8.0。

5.如权利要求1所述的芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:步骤(1)所述种子培养基配方为:8-12g/L蛋白胨,4-6g/L酵母浸出粉,8-12g/L氯化钠,pH 7.0-7.2;所述种子培养条件为:培养温度25-40℃,摇床转速180-240r/min,培养时间为8-12h。

6.如权利要求5所述的芽胞杆菌高产普切明的发酵工艺,其特征在于:步骤(1)所述种子培养条件还包括:装瓶量为容器体积的12%-20%。

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