1.一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)以鲷鱼基因组DNA为模板,采用引物A进行特异性扩增,鉴别真鲷、黑鲷及二者的杂交后代;所述引物A的序列为SEQ ID NO:1~2;
(2)以步骤(1)鉴别获得的杂交后代基因组DNA为模板,采用引物B进行特异性扩增;所述引物B的序列为SEQ ID NO:3~4;
(3)酶切步骤(2)的扩增产物,鉴别正交后代和反交后代。
2.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(3)酶切过程采用的是限制性内切酶MspI。
3.根据权利要求1或2所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(3)酶切的体系为:扩增产物10μL,灭菌双蒸水18μL,10×buffer Tango 2μL,酶10~20U,37℃酶切12h。
4.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)的扩增体系为:总体积20μL,其中含10×反应缓冲液2μL,Mg2+2mmol/L,dNTP 200μmol/L,上下游引物各0.2μmol/L,Taq酶0.5U,DNA模板100ng~200ng,用灭菌双蒸水补足至20μL。
5.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(1)扩增反应的条件为:94℃2min;94℃30s,57℃退火30s,72℃30s,30个循环;72℃延伸5min,4℃保存。
6.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(2)扩增反应的条件为:94℃2min;94℃30s,55℃退火30s,72℃30s,30个循环;72℃延伸5min,4℃保存。
7.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(1)的扩增产物采用8.0%的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离。
8.根据权利要求1所述的一种鲷鱼种质鉴定的方法,其特征在于,步骤(3)酶切产物采用3%琼脂糖凝胶进行电泳分离。
9.权利要求1~8任一所述鲷鱼种质鉴定的方法在鲷鱼育种中的应用。