不饱和透明质酸奇数寡糖及其制备方法与流程

技术特征：

1.一种不饱和透明质酸奇数寡糖，其特征在于：其分子式为C6+14nH8+21nO6+11nNn，分子量为176.0320+(379.1146)n道尔顿，聚合度(dp)为2n+1，其结构式为：

其中，5≥n≥1。

2.一种如权利要求1所述的不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，主要将透明质酸经过酶解、分离纯化和脱盐三个步骤制得一系列不饱和透明质酸奇数寡糖，其特征在于，所述制备方法的具体步骤如下：

步骤1)将冻干粉末状透明质酸用纯水配成浓度为8-10mg/mL的透明质酸溶液，将冻干粉末状微生物透明质酸酶用酶解工作液配成150-200IU/mL的透明质酸酶溶液；

步骤2)取所述透明质酸溶液5-8份，在冰浴条件下加入所述透明质酸酶溶液1-2份，震荡混匀，在35-40℃水浴箱中孵育24-36h，制成样品；将所述样品移至95-100℃水浴锅中，加热5-7min，离心，去沉淀；

步骤3)利用低压层析色谱柱对去沉淀后的所述样品进行分离纯化，其中流动相浓度为0.1-0.2M，流速0.1-0.2mL/min，平衡后上样1mL，示差检测器检测，馏分收集器10-12min/管收集，合并收集，再通过旋转蒸发仪进行浓缩，获得一系列不饱和透明质酸奇数寡糖粗品；

步骤4)将获得的不饱和透明质酸奇数寡糖粗品利用体积排阻色谱柱分别进行除盐，纯水为流动相，流速0.1-0.2mL/min，平衡后上样1mL，示差检测器检测，馏分收集器10-12min/管收集，浓缩，冻干，即制得一系列不饱和透明质酸奇数寡糖纯品。

3.根据权利要求2所述的不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，其特征在于：步骤1)中，所述酶解工作液为纯水。

4.根据权利要求2所述的透不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，其特征在于：步骤1)中，所述微生物透明质酸酶来源于Streptomyceshyalurolyticus。

5.根据权利要求2所述的不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，其特征在于：步骤3)中，所述低压色谱柱的填料为Bio-gel P4、Bio-gel P6或Bio-gel P10。

6.根据权利要求2所述的不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，其特征在于：步骤3)中，所述低压色谱柱的流动相为氯化钠或氯化钾。

7.根据权利要求2所述的不饱和透明质酸奇数寡糖的制备方法，其特征在于：步骤4)中，所述体积排阻色谱柱的填料为Sephadex G10、Sephadex G25或Sephadex G50。