一种多芳基取代咪唑荧光探针及其制备方法和在特异性检测G‑四链体中的应用与流程

技术特征：

1.一种多芳基取代咪唑荧光探针，其特征在于，所述多芳基取代咪唑荧光探针的结构式如式(I)为：

式中，n＝1，2，3，4，5；R¹为氟，二乙胺，吗啡啉，哌啶或N-甲基哌嗪；R²为氟，二乙胺，吗啡啉，哌啶或N-甲基哌嗪。

2.根据权利要求1所述的多芳基取代咪唑荧光探针，其特征在于，所述R¹与R²相同，R¹为N-甲基哌嗪。

3.一种根据权利要求1所述的多芳基取代咪唑荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将直接与炔基取代的苯甲醛发生缩合反应，或，先将与二乙胺，吗啡啉，哌啶或N-甲基哌嗪反应，再与炔基取代的苯甲醛发生缩合反应得到

S2.将荧光素用浓硫酸酯化得然后通过取代反应引入二溴烷烃侧链得到化合物叠氮化后制得化合物

S3.将S1中与S2中进行点击反应，得到所述多芳基取代咪唑荧光探针。

4.权利要求1或2所述的多芳基取代咪唑荧光探针在检测G-四链体中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述多芳基取代咪唑荧光探针用于特异性检测野生型c-MYC G-四链体结构。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，通过如下方法检测野生型c-MYC G-四链体结构：

S1.将待测DNA溶于pH值为7.2～7.4的缓冲液，得到溶液A；将所述多芳基取代咪唑探针溶解，再用pH值为7.2～7.4的缓冲液稀释，得到溶液B；

S2.将S1中的溶液A和溶液B混合，得到混合液，所述混合液中待测DNA与多芳基取代咪唑探针的摩尔比为10:1，混合后对混合液进行荧光光谱分析，或者在紫外灯下进行肉眼观察。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，S2中判断待测DNA为野生型c-MYC G-四链体结构的方法如下：

当在紫外灯下进行肉眼观察时，与溶液B对比，若混合液在紫外灯下通过肉眼观察到荧光增强，则待测DNA为野生型c-MYC G-四链体结构；

当对混合液进行荧光光谱分析时，与溶液B相比，若混合液的荧光发射强度增强，则待测DNA为野生型c-MYC G-四链体结构。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，当对混合液进行荧光光谱分析时，与溶液B相比，若混合液的荧光发射强度增强5～20倍，则待测DNA为野生型c-MYC G-四链体结构。

9.根据权利要求6中所述的应用，其特征在于，所述缓冲液为Tris-盐酸缓冲液，所述多芳基取代咪唑用二甲基亚砜溶解。

10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，S2中溶液A和溶液B的混合反应时间为1分钟。