技术特征:
技术总结
本发明提供了一种新型β‑淀粉酶的高效制备方法。根据大麦β‑淀粉酶编码基因bba碱基序列和酿酒酵母的密码子偏好性,对上述bba基因进行密码子优化并全基因合成新的bbaP基因,并通过非高保真的DNA聚合酶在低退火温度下(45~50℃)对上述获得bbaP实施易错PCR,获得的新基因bbaPT克隆入pPIC9K载体中构建重组表达质粒pPIC‑bbaPT,在巴斯德毕赤酵母GS115中实现整合表达,筛选获得了最适作用温度显著提高的β‑淀粉酶的重组菌。获得重组β‑淀粉酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH为5.0,最高酶活力达280 U/mL。
技术研发人员:牛丹丹;叶秀云
受保护的技术使用者:福建福大百特生物科技有限公司
技术研发日:2017.01.26
技术公布日:2017.08.18