1.c和d在制备薯蓣皂苷元中的应用,所述c为fbg1或与fbg1相关的生物材料;所述d为frg1或与frg1相关的生物材料;
所述fbg1为a1)或a2)或a3)或a4)的蛋白质:
a1)氨基酸序列是seqidno.2的蛋白质;
a2)氨基酸序列是seqidno.2的第19-621位的蛋白质;
a3)在a1)或a2)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白;
a4)将a1)或a2)所示的蛋白质经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与a1)或a2)所示的蛋白质具有90%以上的同一性且具有糖基水解酶活性的蛋白质;
所述与fbg1相关的生物材料为下述b1)至b16)中的任一种:
b1)编码所述fbg1的核酸分子;
b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒;
b3)含有b1)所述核酸分子的重组载体;
b4)含有b2)所述表达盒的重组载体;
b5)含有b1)所述核酸分子的重组微生物;
b6)含有b2)所述表达盒的重组微生物;
b7)含有b3)所述重组载体的重组微生物;
b8)含有b4)所述重组载体的重组微生物;
b9)含有b1)所述核酸分子的转基因动物细胞系;
b10)含有b2)所述表达盒的转基因动物细胞系;
b11)含有b3)所述重组载体的转基因动物细胞系;
b12)含有b4)所述重组载体的转基因动物细胞系;
b13)含有b1)所述核酸分子的转基因植物细胞系;
b14)含有b2)所述表达盒的转基因植物细胞系;
b15)含有b3)所述重组载体的转基因植物细胞系;
b16)含有b4)所述重组载体的转基因植物细胞系。
所述frg1为r1)或r2)或r3)或r4)的蛋白质:
r1)氨基酸序列是seqidno.4的蛋白质;
r2)氨基酸序列是seqidno.4的第24-670位的蛋白质;
r3)在r1)或r2)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白;
r4)将r1)或r2)所示的蛋白质经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与r1)或r2)所示的蛋白质具有90%以上的同一性且具有糖基水解酶活性的蛋白质;
所述与frg1相关的生物材料为下述s1)至s16)中的任一种:
s1)编码所述frg1的核酸分子;
s2)含有s1)所述核酸分子的表达盒;
s3)含有s1)所述核酸分子的重组载体;
s4)含有s2)所述表达盒的重组载体;
s5)含有s1)所述核酸分子的重组微生物;
s6)含有s2)所述表达盒的重组微生物;
s7)含有s3)所述重组载体的重组微生物;
s8)含有s4)所述重组载体的重组微生物;
s9)含有s1)所述核酸分子的转基因动物细胞系;
s10)含有s2)所述表达盒的转基因动物细胞系;
s11)含有s3)所述重组载体的转基因动物细胞系;
s12)含有s4)所述重组载体的转基因动物细胞系;
s13)含有s1)所述核酸分子的转基因植物细胞系;
s14)含有s2)所述表达盒的转基因植物细胞系;
s15)含有s3)所述重组载体的转基因植物细胞系;
s16)含有s4)所述重组载体的转基因植物细胞系。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:b1)中编码所述fbg1的核酸分子为fbg1基因,所述fbg1基因为如下c1)-c3)中任一所述的dna分子:
c1)编码序列是seqidno.1的dna分子;
c2)编码序列是seqidno.1的第55-1866位核苷酸的dna分子;
c3)与c1)或c2)限定的dna分子具有90%以上的同一性且编码所述fbg1的dna分子;
s1)中编码所述frg1的核酸分子为frg1基因;所述frg1基因为如下d1)-d3)中任一所述的dna分子:
d1)编码序列是seqidno.3的dna分子;
d2)编码序列是seqidno.3的第70-2013位核苷酸的dna分子;
d3)与d1)或d2)限定的dna分子具有90%以上的同一性且编码所述frg1的dna分子;
b3)或b4)所述的重组载体为将ppiczαa的ecori和noti识别位点间的片段替换为seqidno.1的第1-1863位所示的fbg1基因,保持ppiczαa的其它序列不变得到的重组表达载体,命名为ppiczαa-fbg1;
b5)至b8)的重组微生物为将ppiczαa-fbg1导入酵母中得到的表达氨基酸序列是seqidno.2的蛋白质的重组酵母;
s3)或s4)所述的重组载体为将ppic9k的ecori和noti识别位点间的片段替换为seqidno.3的第1-2010位所示的frg1基因,保持ppic9k的其它序列不变得到的重组表达载体,命名为ppic9k-frg1;
s5)至s8)的重组微生物为将ppic9k-frg1导入酵母中得到的表达氨基酸序列是seqidno.4的蛋白质的重组酵母。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述应用中利用酶制备薯蓣皂苷元,所述酶为所述fbg1和所述frg1,或所述酶包括所述fbg1和所述frg1。
4.根据权利要求1-3中任一权利要求所述的应用,其特征在于:所述应用包括:
1)用所述frg1将盾叶新苷转化为延龄草苷;
2)用所述fbg1将延龄草苷转化为薯蓣皂苷元。
5.权利要求1中所述的fbg1。
6.权利要求1或2中所述的与fbg1相关的生物材料。
7.权利要求5所述的fbg1或权利要求6所述的生物材料在制备薯蓣皂苷元中的应用。
8.y1或y2的应用:
y1、权利要求5所述的fbg1或权利要求6所述的生物材料在将延龄草苷转化为薯蓣皂苷元中的应用;
y2、权利要求5所述的fbg1在作为糖基水解酶中的应用。
9.制备权利要求5所述fbg1的方法,包括使权利要求5所述fbg1的编码基因在生物中进行表达得到所述fbg1的步骤;所述生物为微生物、植物或非人动物。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述表达包括将所述fbg1的编码基因导入受体微生物,得到表达所述fbg1的重组微生物,培养所述重组微生物,表达得到所述fbg1。