含咪唑的体外无细胞蛋白合成体系及其应用的制作方法

文档序号:22477381发布日期:2020-10-09 22:20阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高蛋白表达量的无细胞蛋白合成体系,其特征在于:在无细胞蛋白合成体系中添加咪唑,其中所述咪唑在合成体系中不发挥抗生素功能。

2.根据权利要求1所述的合成体系,其特征在于:所述咪唑的浓度至少为0.199mm。

3.根据权利要求1所述的合成体系,其特征在于:所述无细胞蛋白合成体系包含细胞提取物、rna聚合酶、核苷酸混合物、氨基酸混合物。

4.根据权利要求3所述的合成体系,其特征在于:所述体系还包括缓冲剂、钾离子、镁离子、二硫苏糖醇、聚乙二醇、任选的水性溶剂及能量再生系统中的一种或多种成分。

5.根据权利要求3或4任一项所述的合成体系,其特征在于:所述细胞提取物的细胞来源选自原核细胞、真核细胞之一或其组合。

6.根据权利要求5所述的合成体系,其特征在于:所述细胞提取物的细胞来源选自大肠杆菌、哺乳动物细胞、植物细胞、酵母细胞、昆虫细胞之一或其组合。

7.根据权利要求6所述的合成体系,其特征在于:所述酵母细胞选自下组:酿酒酵母、毕氏酵母、克鲁维酵母之一或其组合。

8.根据权利要求7所述的合成体系,其特征在于:所述克鲁维酵母选自乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母、多布克鲁维酵母之一或其组合。

9.一种咪唑在提高蛋白表达量的无细胞蛋白合成体系中的应用。

10.一种利用无细胞蛋白合成体系合成外源蛋白的方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:

(i)提供权利要求1-8任一项所述的无细胞蛋白合成体系;

(ii)添加编码外源蛋白的dna模板,反应合成所述的外源蛋白;

还包括可选的步骤(iii)分离或检测所述外源蛋白。


技术总结
本发明提供一种含有咪唑的体外无细胞蛋白合成体系,其能够提高体外无细胞蛋白合成的能力。其无需从分子水平进行改造,体系组成成分来源常规,能够达到节约成本、操作简单、应用范围广泛的效果。相应的,提供还有咪唑的无细胞蛋白合成体系的应用,具体的为咪唑在提高蛋白表达量的无细胞蛋白合成体系中的应用及利用该体系合成外源蛋白的方法。

技术研发人员:郭敏;章小铃;于雪
受保护的技术使用者:康码(上海)生物科技有限公司
技术研发日:2019.03.27
技术公布日:2020.10.09
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