1.小叶金钱草抗炎化合物,其特征在于,包括:香草酸(1)、4-羟基苯甲酸(2)、原儿茶酸(3)、没食子酸(4)、槲皮素(5)、山柰酚(6)、木犀草素(7)、芹菜素(8)、杨梅苷(9)、槲皮苷(10)、紫云英苷(11)、杨梅素3-o-半乳糖苷(12)、异杨梅树皮苷(杨梅素3-o-葡萄糖苷)(13)和槲皮素3,3'-二-α-l-鼠李糖苷(16)。
2.小叶金钱草抗炎化合物在抑制在raw264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子(tnf-α)和白细胞介素(il-6)产生中的应用,其特征在于,所述化合物包括:香草酸(1)、4-羟基苯甲酸(2)、原儿茶酸(3)、木犀草素(7)、杨梅苷(9)、槲皮素3,3'-二-α-l-鼠李糖苷(16)。
3.小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)样品提取与前处理;(2)样品f1高速逆流色谱分离;(3)样品f2高速逆流色谱分离;(4)样品f3高速逆流色谱分离;(5)样品f4高速逆流色谱分离;(6)结构解析及鉴定。
4.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(1)包括:将购置的药材经中药粉碎机粉碎后过40目筛;称取20kg粉末分次置于kj-11030al型超声波清洗器,按液料比10:1加入70%(v:v)乙醇溶液,于600w、40khz、60℃提取1h,过滤除去药渣,将药渣重复提取4次;提取液减压浓缩,得棕褐色黏稠浸膏;浸膏用蒸馏水混悬并超声溶解,10倍体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取5次;浓缩乙酸乙酯萃取液,冻干得乙酸乙酯萃取物;取3g乙酸乙酯萃取物,用30ml蒸馏水超声溶解并过0.45μm滤膜,作为分离样品一,即f1;取5g乙酸乙酯萃取物,用30ml蒸馏水超声溶解并过0.45μm滤膜;经sephadexlh-20柱层析分离(3×80cm),分别用水、10%、20%、30%、40%、50%、75%、100%甲醇洗脱,每个比例洗脱2个柱体积,1/20柱体积为一馏分;收集30%,40%,75%和100%甲醇洗脱馏分,合并色谱峰保留时间相同的馏分。
5.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(2)包括:选择二氯甲烷-甲醇-水(2:1:1,v:v)来测试微量化合物的富集;根据溶剂系统给出的k值(2:1:1,v:v),色谱峰1,4能够从复杂的样品系统中分离。
6.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(3)包括:参考高速逆流色谱分离黄酮类化合物的相关报道选择溶剂系统,配制比例均为2:1:1的乙酸乙酯-正丁醇-水和正己烷-正丁醇-水系统,考察此两个比例系统对分配系数k的影响;按照正己烷-正丁醇-水的体积比配制溶剂系统,比例依次为:1:1:1、1:2:2、1.5:1:1、1.75:1:1、1:2:1、2:2:1和2:3:1。
7.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(4)包括:配制正己烷-正丁醇-水-冰乙酸(2:3:1:0.1,v:v)两相溶剂系统,仪器参数(正相旋转,转速900r/min,流速2ml/min,检测波长为254nm,f3分离样品50mg;采用正己烷-正丁醇-水(2:3:1:0.1,v:v)溶剂系统,sf=[(300-96)]/300×100%=68.0%;进行hsccc分离。
8.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(5)包括:根据前期实验总结出的经验,在含有乙酸乙酯的溶剂系统中化合物的分配系数过大,故在f4样品的分离过程中使用不含乙酸乙酯的正己烷-正丁醇-水溶剂系统;按照正己烷-正丁醇-水的体积比配制溶剂系统,比例依次为:2:1:1、1:1:1、1:2:1、1:2:2和1:1:2;按照正己烷-正丁醇-水的体积比配制溶剂系统,比例依次为:2:1:1、1:1:1、1:2:2和1:2:1。
9.根据权利要求3所述小叶金钱草抗炎化合物分离方法,其特征在于,步骤(6)包括:经1hnmr、13cnmr及ms等多种表征手段,鉴定出乙酸乙酯萃取物中14个单体化合物的结构,并对部分化合物列出详细解析过程。