1.一种甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)病原菌株活化:取甘蔗梢腐病病原菌株接种于含有氨苄青霉素的pda培养基中,放置于28℃恒温培养箱中培养5天;
(2)含药平板的配置:用无菌水将拟进行筛选的杀菌剂配置成10-15g/l的母液,再用无菌水稀释成6个浓度梯度的药液,取2ml不同稀释浓度的药液分别加入98ml冷却至50-55℃pda培养基中,充分混匀后分装于5个培养皿中,冷却后即可得含药平板,以无药平板为对照;
(3)接种:用打孔器在经过步骤(1)活化好的甘蔗梢腐病病原菌菌落边缘打取菌饼,将菌饼转接于含药平板中央,放置于28℃恒温培养箱中培养4-5天;
(4)抑制数据测定:培养结束后,以菌饼为中心在平板底部画两条垂直线,用直尺沿垂直线测量菌落直径,取平均值,测定杀菌剂抑制率,计算ec50;
(5)根据步骤(4)计算出来的ec50,筛选出ec50≤30mg/l的杀菌剂或者复配杀菌剂进行田间防治试验。
2.根据权利要求1所述的甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于:所述含有氨苄青霉素的pda培养基中含100μg/ml氨苄青霉素。
3.根据权利要求1或2所述的甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于:所述含有氨苄青霉素的pda培养基的配制是先按照pda培养基配方配制,灭菌后冷却至50-55℃再添加100μg/ml的氨苄青霉素。
4.根据权利要求1所述的甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于:所述含有氨苄青霉素pda培养基均需121℃高压灭菌20min后使用;所述培养皿需经121℃高压灭菌20min后使用。
5.根据权利要求1所述的甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于:所述步骤(3)接种过程中,选用孔径为5mm打孔器在活化好的甘蔗梢腐病病原菌菌落边缘打取菌饼,将菌饼转接于含药平板中央,每个处理5次重复。
6.根据权利要求1所述的甘蔗梢腐病病原菌有效杀菌剂的筛选方法,其特征在于:所述打孔器需经过酒精灯灼烧灭菌,冷却后方可使用。