1.烟草低温早花相关基因ntduf599,其特征在于,该基因由711bp碱基组成,其碱基序列如seqidno.1所示。
2.权利要求1所述烟草低温早花相关基因ntduf599在花期调控中的应用,其特征在于,利用基因沉默技术、或者基因超表达方法,通过调节ntduf599基因表达量,来调节控制逆境条件下的花期。
3.权利要求1所述烟草低温早花相关基因ntduf599的pcr扩增制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取烟草样品基因组,并反转录为cdna备用;
(2)设计pcr扩增引物,用于扩增ntduf599基因编码区,具体引物序列设计如下:
f:5'-atggagaaagaaattctgga-3',
r:5'-ctaaactgctactctctctg-3'。
4.用于沉默权利要求1所述烟草低温早花相关基因ntduf599的rnai载体,其特征在于,将该rnai载体命名为:pbwa(v)hs-ntduf599-rnai,通过如下步骤制备获得:
(1)酶切、连接
首先,以ntduf599基因中第121-300位核苷酸作为rnai的引导序列,进行正反方向的pcr扩增;
其次,对pbwa(v)hs载体依次采用psti和smai进行单酶切,单酶切后利用infusion连接酶依次将正向和反向rnai引导序列连接到pbwa(v)hs载体;
(2)转化、筛选和鉴定
将步骤(1)中的连接产物转化大肠杆菌dh5α,并进行筛选,挑取阳性克隆质粒进行菌落pcr鉴定和测序鉴定,确保重组构建正确,并将最终构建正确重组干扰表达载体质粒命名为:pbwa(v)hs-ntduf599-rnai。
5.权利要求1烟草低温早花相关基因ntduf599所编码蛋白,其特征在于,包括236个氨基酸,氨基酸序列如seqidno.2所示。
6.权利要求5所述烟草低温早花相关基因ntduf599所编码蛋白在花期调控中的应用,其特征在于,该蛋白与植物低温条件下开花时间相关,降低该蛋白表达量后,可缩短逆境处理条件下的植物开花时间。
7.利用权利要求1所述烟草低温早花相关基因ntduf599的烟草新品种培育方法,其特征在于,通过转基因技术、瞬时表达技术或基因组编辑技术,构建含有ntduf599基因的病毒诱导沉默载体、rnai干涉载体或基因组编辑载体,转化烟草,筛选获得花期缩短的烟草新品种。