一种红花檵木查尔酮异构酶LcCHI基因及其应用的制作方法

文档序号:22684328发布日期:2020-10-28 12:49阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种来源于红花檵木的查尔酮异构酶基因,其特征在于,所述查尔酮异构酶基因的核苷酸序列如下所示。

2.atggctaaagtactgcacgtcaccggagttcaggtcgagaacgttacattcccaccgacg60

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3.如1所示的红花檵木的查尔酮异构酶基因,其氨基酸序列如下所示:

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4.含要求1所述的查尔酮异构酶基因的重组质粒。

5.如要求4所述的重组质粒体,其特征在于,所述质粒为plcchi-super1300。

6.一种如权利要求1所述的查尔酮异构酶基因在调控红花檵木黄酮类含量中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:

s1,将红花檵木的查尔酮异构酶基因的orf序列,插入到psuper1300过表达质粒中,得到表达载体;

s2,将所述表达载体转化至农杆菌后,用转化后的所述农杆菌对红花檵木进行侵染转化,得到转基因红花檵木。


技术总结
从红花檵木中克隆获得查尔酮异构酶同源基因LcCHI。LcCHI基因的开放阅读框长度为657bp,编码218个氨基酸。红花檵木LcCHI与包括玫瑰、月季在内的多种植物CHI的氨基酸序列同源性很高。CHI负责酶催化活性的5个氨基酸残基位点也在不同植物的CHI氨基酸序列中高度保守。LcCHI蛋白的三级结构主要由8个α螺旋和11个β折叠片层形成的球状蛋白,其催化核心区域具有两个硝酸根配基结合位点。成功构建LcCHI的过表达载体,在拟南芥中异源表达并获得基因过表达的转基因株系,为该基因功能分析鉴定基础。红花檵木LcCHI基因的克隆和转基因研究可为红花檵木中类黄酮生物合成分子机制奠定基础。

技术研发人员:张邦跃
受保护的技术使用者:湖南工业大学
技术研发日:2020.01.07
技术公布日:2020.10.27
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