沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用的制作方法

文档序号:20699732发布日期:2020-05-12 15:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种沙门氏菌噬菌体lpst144,其特征在于:所述噬菌体命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(salmonellatyphimuriumbacteriophage)lpst144,保藏编号为:cctccno:m2019533。

2.权利要求1所述沙门氏菌噬菌体lpst144在特异性裂解沙门氏菌中的应用。

3.权利要求1所述沙门氏菌噬菌体lpst144在制备裂解酶lyst15中的应用。

4.一种沙门氏菌噬菌体裂解酶lyst15,其氨基酸序列为sedidno.1。

5.一种编码权利要求1所述沙门氏菌噬菌体裂解酶的基因orf15,其核苷酸序列如sedidno.2。

6.一种重组表达载体pet28b-orf15,其特征在于:所述重组表达载体pet28b-orf15为含有权利要求4所述的基因orf15的表达载体,其中,所述表达载体为原核细胞表达载体pet28b(+)。

7.含有权利要求5所述重组表达载体的宿主细胞,其特征在于:所述宿主细胞为大肠杆菌bl21(de3)。

8.含有权利要求4所述的基因orf15的细胞系。

9.利用权利要求6所述宿主细胞制备裂解酶lyst15的方法:其特征在于:包括以下步骤:

(1)将重组表达载体pet28b-orf15的大肠杆菌感受态细胞bl21培养至od600nm为0.8-1.0,用1mm异丙基硫代半乳糖苷诱导后继续培养6h后离心,8000rpm15min,沉淀用磷酸盐缓冲液pbs重悬,即为悬浮菌液;

(2)在温度为4℃条件下对悬浮菌液进行菌体破碎,离心收集上清,经镍柱亲和层析纯化分离,得到重组的裂解酶lyst15。

10.一种权利要求4所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lyst15在下述方面中的应用,

1)上述裂解酶lyst15在特异性裂解沙门氏菌中的应用;

2)上述裂解酶lyst15在制备裂解沙门氏菌的生物制剂中的应用;

3)上述裂解酶lyst15在制备防止沙门氏菌对食品污染的食品添加剂中的应用。


技术总结
本发明公开了一种沙门氏菌噬菌体LPST144以及其裂解酶的抗菌应用;所述噬菌体命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonella Typhimurium Bacteriophage)LPST144;本发明的沙门氏菌噬菌体LPST144及其裂解酶LysT15,能够裂解沙门氏菌;由于采用噬菌体及其裂解酶特异性裂解沙门氏菌能够防止沙门氏菌进化和减少耐药菌株的产生;由于本发明噬菌体菌株及其裂解酶均有亲水相,通过传统方法很容易配置成喷洒液或是淋洗液,对环境或器具消毒;由于本发明涉及到的噬菌体及其裂解酶没有毒副作用,可以作为食品添加剂,具有应对食品污染的潜在应用。

技术研发人员:王小红;丁一峰;王佳;杨其乐;聂若男;黄晨曦;李亚萌;庞倩
受保护的技术使用者:华中农业大学
技术研发日:2020.01.14
技术公布日:2020.05.12
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