1.一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针,其特征在于,分子结构式如下:
2.一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)中间体化合物香豆素343的合成:将等当量的8-羟基久洛尼定-9-醛和丙二酸环异丙酯(麦氏酸)溶于乙醇,再将0.1当量的哌啶和乙酸逐滴滴入上述溶液;常温搅拌后,加热回流;冷却后倒入冰水中,抽滤,得到滤饼,用二氯甲烷、甲醇和乙酸为淋洗剂进行硅胶柱柱层析纯化,得到黄色固体,即为香豆素343;
(2)荧光探针分子lh-1的合成:将步骤(1)得到的香豆素343溶于二氯甲烷,冰浴下逐滴滴入20当量的草酰氯,然后再滴入n,n-二甲酰胺,在室温条件下进行第一次搅拌,旋除溶剂,真空干燥得到干燥的产物;
将上述所得产物溶于无水二氯甲烷中,分批加入等当量的2,4-二硝基苯肼,逐滴滴入20当量的无水三乙胺,在室温条件下进行第二次搅拌,旋除溶剂,得到粗产物,用淋洗剂进行硅胶柱柱层析纯化,得到黄色固体,为探针分子化合物lh-1;即为本发明所要制备的极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针。
3.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述8-羟基久洛尼定-9-醛、丙二酸环异丙酯、乙醇、哌啶和乙酸的用量关系为1.12g:0.74g:8ml:0.044g:0.1~0.2ml。
4.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述乙醇和冰水的体积比为8:100;所述常温搅拌的时间为30~40min,加热回流的时间为3h。
5.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述二氯甲烷、甲醇和乙酸的体积比为50∶1∶0.1。
6.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述香豆素343、二氯甲烷、草酰氯和n,n-二甲酰胺的用量关系为100mg:10ml:0.6ml:0.1~0.2ml。
7.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述第一次搅拌的时间为24h,真空干燥的时间为2-3小时。
8.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述香豆素343、无水二氯甲烷、2,4-二硝基苯肼和无水三乙胺的用量关系为100mg:10ml:70mg:1ml。
9.根据权利要求2所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述第二次搅拌的时间为48h;所述淋洗剂为二氯甲烷。
10.根据权利要求1所述的一种具有极低背景荧光的高灵敏次氯酸根荧光探针应用于水样、活细胞内及斑马鱼体内次氯酸根的检测。