1.一种用于解决基因检测中荧光定量pcr非特异性扩增干扰的方法,其特征在于,其pcr扩增反应条件为:90—95℃预变性1—15min;90—95℃变性10—30s;50—65℃退火30s—90s;70—85℃延伸10s—30s;35-50个循环;信号收集设置在延伸环节。
2.如权利要求1所述的用于解决基因检测中荧光定量pcr非特异性扩增干扰的方法,其特征在于,还包括:20μlpcr反应体系;
所述20μlpcr反应体系包括以下组分:2×sybrgreenipcrmastermix10μl,特异性引物对各0.4μl,dna模板10—100ng,ddh2o补充至20μl。
3.如权利要求2所述的用于解决基因检测中荧光定量pcr非特异性扩增干扰的方法,其特征在于,所述特异性引物对包括以下7对引物对中任意一对:
引物对1:
上游引物序列如seqidno.1所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对2:
上游引物序列如seqidno.3所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对3:
上游引物序列如seqidno.4所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对4:
上游引物序列如seqidno.5所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对5:
上游引物序列如seqidno.6所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对6:
上游引物序列如seqidno.7所示;
下游引物序列如seqidno.2所示;
引物对7:
上游引物序列如seqidno.7所示;
下游引物序列如seqidno.8所示。
4.如权利要求1所述的用于解决基因检测中荧光定量pcr非特异性扩增干扰的方法,其特征在于,在80℃收集荧光信号。
5.如权利要求1所述的用于解决基因检测中荧光定量pcr非特异性扩增干扰的方法,其特征在于,所述基因为人k-ras基因。
6.如权利要求1-5任一项所述的方法在荧光染料法定量pcr反应实验中的应用。
7.如权利要求1-5任一项所述的方法在荧光染料法定量pcr反应试剂盒中的应用。