1.一种shrna片段,所述shrna片段序列如seqidno:1或seqidno:2所示。
2.一种含有权利要求1所述的shrna片段的重组质粒。
3.根据权利要求2所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒是将shrna片段与质粒pgmlv-sc5相连得到。
4.权利要求1所述的shrna片段、权利要求2或3所述的重组质粒在基因敲低方面的应用。
5.一种重组菌株,其特征在于,所述重组菌株含有权利要求1所述的shrna片段或权利要求2所述的重组质粒。
6.权利要求3所述的重组质粒的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)设计并合成如权利要求1所述的shrna片段;
2)shrna的退火得到目标片段;
3)shrna载体的酶切及回收;
4)将步骤3)的酶切载体与步骤2)的目标片段连接得到重组载体。
7.权利要求5所述的重组菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:将权利要求3所述的重组质粒导入到宿主细胞中得到。
8.根据权利要求7所述的重组菌株的构建方法,其特征在于,所述具体步骤为:
1)构建含有权利要求1所述的shrna片段的重组表达载体;
2)将步骤1)获得的重组表达载体感染宿主细胞hacat获得感染细胞株;
3)将步骤2)获得的感染细胞株应用嘌呤霉素筛选培养基定时更换培养基并长期筛选培养,获得阳性细胞株。
9.根据权利要求8所述的重组菌株的构建方法,其特征在于,所述步骤3)的含有嘌呤霉素的筛选培养基为含有2ug/ml的嘌呤霉素的10%的胎牛血清dmem培养基。
10.权利要求1所述的shrna片段、权利要求2或3所述的重组质粒、权利要求5所述的重组菌株在细胞增殖或药物筛选方面的应用。