一种广藿香醇生产酵母菌株及其构建方法和应用与流程

文档序号:23542037发布日期:2021-01-05 20:51阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,以酿酒酵母菌株为出发菌,在所述出发菌中多拷贝整合erg20和pts的融合酶fpts,即可获得一种广藿香醇生产酵母菌株,其中,所述融合酶fpts的核苷酸序列如seqidno:1所示。

2.根据权利要求1所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,还包括在所述出发菌中进行基因rox1、yjl064w或ypl062w的单独敲除或这三种基因的任意组合敲除,所述基因rox1的核苷酸序列如seqidno:7所示,所述基因yjl064w的核苷酸序列如seqidno:8所示,所述基因ypl062w的核苷酸序列如seqidno:9所示。

3.根据权利要求2所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,还包括在所述出发菌中过表达基因erg11和ctt1,所述基因erg11的核苷酸序列如seqidno:3所示,所述基因ctt1的核苷酸序列如seqidno:5所示。

4.根据权利要求1所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,所述出发菌是酿酒酵母菌株by4741,或以酿酒酵母菌株by4741为出发菌经过基因改造后能合成丰富fpp前体的酵母菌株。

5.根据权利要求4所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,所述出发菌是以酿酒酵母菌by4741为出发菌株改造的酿酒酵母菌株rel003,所述改造包括过表达upc2-1,thmg,以及以hxt1启动子替换菌株本身erg9启动子。

6.根据权利要求1所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,在所述出发菌中融合酶fpts的多拷贝整合包括1拷贝~7拷贝,最优选为7拷贝。

7.根据权利要求1所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,所述融合酶fpts中的pts为植物广藿香来源,erg20为前体fpp合酶,如seqidno:1所示的所述融合酶fpts的核苷酸序列为密码子优化后的序列。

8.根据权利要求3所述的广藿香醇生产酵母菌株的构建方法,其特征在于,所述基因rox1,yjl064w,ypl062w,erg11和ctt1均为酵母本身来源。

9.一种根据权利要求1~8中任意一项所述的构建方法构建的广藿香醇生产酵母菌株。

10.一种根据权利要求9所述的广藿香醇生产酵母菌株在广藿香醇生产中的应用,其特征在于,将所述广藿香醇生产酵母菌株在发酵罐中进行发酵,即可高产量制备广藿香醇。


技术总结
本发明提供一种广藿香醇生产酵母菌株及其构建方法和应用。所述构建方法包括以酿酒酵母菌株为出发菌,在出发菌中多拷贝整合ERG20和PTs的融合酶FPTs,即可获得一种广藿香醇生产酵母菌株,该融合酶FPTs的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。特别是,当广藿香醇生产酵母菌株是一种同时多拷贝整合基因ERG20和PTs的融合酶FPTs,缺失基因ROX1,YJL064w和YPL062w,以及强化基因ERG11及CTT1的酿酒酵母时,其生产广藿香醇的能力得到大幅提高。本发明通过构建一种酿酒酵母基因工程菌,将其用于制备广藿香醇,提高广藿香醇的生产效率及生产产量,降低其生产成本,具有良好的工业应用价值。

技术研发人员:刘敏;王风清;魏东芝;林阳琛
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:2020.09.17
技术公布日:2021.01.05
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