技术特征：
1.一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，所述方法包括对重度免疫缺陷小鼠nplg小鼠的il3，gm-csf（csf2）和kitlg基因进行人源基因的原位敲入替换；其特征在于包括如下步骤：1）制备人源化il3 gm-csf小鼠；并通过pcr扩增鉴定筛选人源化il3 gm-csf纯合小鼠；2）制备人源化kitlg小鼠；并通过pcr扩增鉴定筛选人源化kitlg 纯合小鼠；3）将步骤1）获得的人源化il3 gm-csf纯合小鼠与步骤2）获得的人源化kitlg纯合小鼠杂交，得到人源化il3 gm-csf kitlg杂合小鼠；所述人源化il3 gm-csf小鼠是将nplg小鼠il3基因的p.a27信号肽至gm-csf基因的tga终止密码子区段：seq no.16整体替换为如下区段： 人类il3基因的p.a20信号肽至tga终止密码子序列：seq no.17+ 小鼠il3基因的utr非翻译区序列：seq no.18 + 小鼠il3基因5号外显子下游500bp的序列：seq no.19 + 小鼠csf2基因atg起始密码子上游5kbp的序列：seq no.21+ 小鼠csf2基因的p.m1到p.s17信号肽序列：seq no.22+ 人类csf2基因的p.a18信号肽到tga终止密码子序列：seq no .23；所述人源化kitlg小鼠是将nplg小鼠kitlg基因2号外显子的部分蛋白编码区(cds区)替换为人kitlg基因的cds区，即p.e26-p.v273序列： seq no.24 + 3
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sv40 polya序列：seq no.25。2.根据权利要求1所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于所述步骤3）还包括将人源化il3 gm-csf kitlg杂合小鼠通过多次同胞交配，并进行pcr鉴定，获得il3 gm-csf kitlg纯合小鼠。3.根据权利要求1或2任一项所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于所述步骤1）制备人源化il3 gm-csf小鼠包括构建供体载体，其含有核苷酸序列seq no.1；将cas9，grna和供体载体共同显微注射到小鼠受精卵中，以产生拥有目标敲入基因片段的小鼠。4.根据权利要求3所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于步骤1）涉及的grna选自：grna-a1 (与正向序列互补):seq no .3；grna-a2 (与反向序列互补):seq no .4；或grna-b1 (与正向序列互补): seq no .5；grna-b2 (与反向序列互补):seq no .6。5.根据权利要求1或2任一项所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于所述步骤2）制备人源化kitlg小鼠包括构建供体载体，其含有核苷酸序列seq no.2；将cas9，grna和供体载体共同显微注射到小鼠受精卵中，以产生拥有目标敲入基因片段的小鼠。6.根据权利要求5所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于步骤2）涉及的grna选自：grna-c1 (与正向序列互补): seq no .10；grna-c2 (与反向序列互补):seq no .11。7.根据权利要求1所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征
在于所述步骤1）pcr扩增鉴定筛选采用如下引物：同源臂引物primer f: seq no .7；插入片段引物primer r1: seq no .8；小鼠基因组引物primer r2: seq no .9。8.根据权利要求1或7所述的一种人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠的制备方法，其特征在于所述步骤2）pcr扩增鉴定筛选采用如下引物： human kitlg prime 1f:seq no .12；human kitlg prime 1r: seq no .13；同源臂引物prime 2f: seq no .14；同源臂引物prime 2r: seq no .15。9.一种人源化免疫系统小鼠的制备方法，其特征在于，使用权利要求1-8任一项方法获得的人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠按如下步骤制备获得：选用新生或1至5周龄的人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠，全身辐照或给予化疗药物清髓；清髓后，对小鼠尾静脉注射cd34阳性的人源造血干细胞；干细胞接种12周后，对小鼠外周血中，人源免疫细胞的比例和亚群进行流式检测，外周血中人源免疫细胞占总免疫细胞数量超过25%的小鼠即为人源化免疫系统小鼠。10.根据权利要求9所述的一种人源化免疫系统小鼠的制备方法，其特征在于所述辐照的放射源是x射线、或者co60/cs137来源的gamma射线，射线的剂量为0.5-2gy每只小鼠。11.根据权利要求9或10任一项所述的一种人源化免疫系统小鼠的制备方法，其特征在于所述的cd34阳性的人源造血干细胞注射剂量为1
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104~1
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106每只小鼠。12.权利要求1-8任一项方法获得的人源化nplg il3 gm-csf kitlg小鼠或权利要求9-11任一项方法获得的人源化免疫系统小鼠在肿瘤免疫治疗单抗的药效评价中的应用。