1.从含有一种或更多种杂质的组合物中纯化抗体的方法,其包括下述步骤:
a1.提供含有抗体的细胞培养上清液;
b1.将细胞培养上清液经由亲和层析树脂处理,得到含有抗体的亲和层析合并物;
c1.将亲和层析合并物中的病毒灭活,得到病毒灭活液;
d1.用活性炭材料处理病毒灭活液,得到活性炭材料合并物;和
e1.将活性炭材料合并物经由阳离子交换材料处理,得到阳离子交换材料合并物。
2.根据权利要求1的从含有一种或更多种杂质的组合物中纯化抗体的方法,其包括下述步骤:
a2.提供含有抗体的细胞培养上清液;
b2.将细胞培养上清液经由亲和层析树脂处理,得到含有抗体的亲和层析合并物;
c2.将亲和层析合并物中的病毒灭活,得到病毒灭活液;
d2.将病毒灭活液经由深层过滤器处理,得到深层过滤合并物;
e2.用活性炭材料处理深层过滤合并物,得到活性炭材料合并物;和
f2.将活性炭材料合并物经由阳离子交换材料处理,得到阳离子交换材料合并物。
3.根据权利要求1或2的方法,其中,亲和层析树脂是蛋白a树脂。
4.根据权利要求3的方法,其中,蛋白a树脂是kancapa、kancapa3g、mabselectsure、mabselectsurepcc、mabselectprisma或amspherea3。
5.根据权利要求1-4中任一项的方法,其中,病毒灭活是用选自酸、表面活性剂、化学物质、核酸交联剂、紫外线、γ射线和热中的至少一种进行的处理。
6.根据权利要求5的方法,其中,病毒灭活包括将亲和层析合并物的ph降低至3~4。
7.根据权利要求6的方法,其中,在病毒灭活期间,将亲和层析合并物孵育60~120分钟。
8.根据权利要求6或7的方法,其中,在病毒灭活期间,在15~30℃下孵育亲和层析合并物。
9.根据权利要求1-8中任一项的方法,其中,要加载于活性炭材料上的溶液、以及活性炭材料的平衡缓冲液和清洗缓冲液各自具有4.5~7.5的ph。
10.根据权利要求9的方法,其中,要加载于活性炭材料上的溶液、以及活性炭材料的平衡缓冲液和清洗缓冲液各自具有4.5~5.5的ph。
11.根据权利要求1-10中任一项的方法,其中,要加载于活性炭材料上的溶液、以及活性炭材料的平衡缓冲液和清洗缓冲液各自具有2~10ms/cm的电导率。
12.根据权利要求11的方法,其中,要加载于活性炭材料上的溶液、以及活性炭材料的平衡缓冲液和清洗缓冲液各自具有2~5ms/cm的电导率。
13.根据权利要求1-12中任一项的方法,其中,利用活性炭材料的处理通过使用含有活性炭材料的过滤器来进行。
14.根据权利要求13的方法,其中,过滤器是millistak+podcr40、zetaplus活性炭吸附深层过滤器或supracap50seitzaks过滤器。
15.根据权利要求1-14中任一项的方法,其中,活性炭材料合并物以超过阳离子交换材料的结合能力的量加载于阳离子交换材料上。
16.根据权利要求15的方法,其中,活性炭材料合并物以500~2000g/l的加载密度加载于阳离子交换材料上。
17.根据权利要求16的方法,其中,活性炭材料合并物以1000~1500g/l的加载密度加载于阳离子交换材料上。
18.根据权利要求1-17中任一项的方法,其中,阳离子交换材料为树脂、整体柱或膜。
19.根据权利要求18的方法,其中,阳离子交换材料具有官能团,其为磺基丙基、磺基乙基、磺基异丁基或羧基。
20.根据权利要求19的方法,其中,阳离子交换材料为porosxs、eshmunocpx、eshmunocp-ft或captosimpact。
21.根据权利要求1-20中任一项的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有4~6的ph。
22.根据权利要求21的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有4.5~5.5的ph。
23.根据权利要求1-22中任一项的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有3~7ms/cm的电导率。
24.根据权利要求23的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有3~5ms/cm的电导率。
25.根据权利要求1-24中任一项的方法,其中,阳离子交换材料合并物进一步经由疏水相互作用层析处理以得到合并物溶液。
26.根据权利要求25的方法,其中,疏水相互作用层析以流动-通过模式进行。
27.根据权利要求26的方法,其中,疏水相互作用层析通过使用树脂或膜进行。
28.根据权利要求27的方法,其中,疏水相互作用层析树脂或膜具有苯基、苄基或己基。
29.根据权利要求28的方法,其中,疏水相互作用层析材料是porosbenzylultra、porosbenzyl、hexyl-650c、phenylsepharose6fastflow、phenylsepharosehighperformance、sartobindphenyl或readytoprocessadsorberphenyl。
30.根据权利要求1-14中任一项的方法,其中,活性炭材料合并物经由疏水相互作用层析处理以得到合并物溶液,其进一步经由阳离子交换材料处理以得到合并物溶液。
31.根据权利要求30的方法,其中,疏水相互作用层析以流动-通过模式进行。
32.根据权利要求31的方法,其中,疏水相互作用层析通过使用树脂或膜进行。
33.根据权利要求32的方法,其中,疏水相互作用层析树脂或膜具有苯基、苄基或己基。
34.根据权利要求33的方法,其中,疏水相互作用层析材料是porosbenzylultra、porosbenzyl、hexyl-650c、phenylsepharose6fastflow、phenylsepharosehighperformance、sartobindphenyl或readytoprocessadsorberphenyl。
35.根据权利要求30-34中任一项的方法,其中,疏水相互作用层析合并物以超过阳离子交换材料的结合能力的量加载于阳离子交换材料上。
36.根据权利要求35的方法,其中,疏水相互作用层析合并物以500~2000g/l的加载密度加载于阳离子交换材料上。
37.根据权利要求36的方法,其中,疏水相互作用层析合并物以1000~1500g/l的加载密度加载于阳离子交换材料上。
38.根据权利要求30-37中任一项的方法,其中,阳离子交换材料为树脂、整体柱或膜。
39.根据权利要求38的方法,其中,阳离子交换材料具有官能团,其为磺基丙基、磺基乙基、磺基异丁基或羧基。
40.根据权利要求39的方法,其中,阳离子交换材料为porosxs、eshmunocpx、eshmunocp-ft或captosimpact。
41.根据权利要求30-40中任一项的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有4~6的ph。
42.根据权利要求41的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有4.5~5.5的ph。
43.根据权利要求30-42中任一项的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有3~7ms/cm的电导率。
44.根据权利要求43的方法,其中,要加载于阳离子交换材料上的溶液具有3~5ms/cm的导电性。
45.根据权利要求1-44中任一项的方法,其中,至少一种杂质选自源自宿主细胞的蛋白(宿主细胞蛋白;hcps)、磷脂酶b-样2(plbl2)、病毒、病毒样颗粒、高分子量种类(hmws)、低分子量种类(lmws)、培养基组分、浸出蛋白a和/或dna。
46.根据权利要求1-45中任一项的方法,其中,这些步骤是连续进行的。
47.通过权利要求1-46中任一项的方法纯化的抗体。