L型环状氨基酸的制造方法与流程

文档序号:28563128发布日期:2022-01-19 17:01阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种l型环状氨基酸的制造方法,其特征在于,使以下的(a)、(b)或(c)所示的多肽、具有生产所述多肽的能力或包含所述多肽的微生物或细胞、所述微生物或细胞的处理物和/或对所述微生物或细胞进行培养而得到的包含所述多肽的培养液与下述通式(i)所示的在1位具有双键的环状氨基酸接触,生成下述通式(ii)所示的l型环状氨基酸,式中,a表示链长为1~4原子、可在链中或末端包含选自由硫原子、氧原子和氮原子组成的组中的至少一种杂原子、且可具有取代基的亚烷基链,式中,a与上述含义相同,(a)具有序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列的多肽;(b)为在序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列中缺失、置换和/或添加1个~两个以上氨基酸而成的氨基酸序列、且催化下述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽,式(1):式中,a与上述含义相同;或者(c)具有与序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列具有90%以上的序列一致性的氨基酸序列、且催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽。2.根据权利要求1所述的制造方法,其中,所述多肽由以下的(d)、(e)或(f)所示的核酸编码:(d)包含序列号1、3、5、7、9或11所示的碱基序列的核酸;(e)为在序列号1、3、5、7、9或11所示的碱基序列中置换、缺失和/或添加1个或两个以上碱基而成的碱基序列、且编码催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽的核酸;或者(f)为与序列号1、3、5、7、9或11所示的碱基序列的互补链在严格条件下进行杂交的碱基序列、且编码催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽的核酸。3.一种l型环状氨基酸的制造方法,其特征在于,使能够将二氨基酸的α位的氨基转换为酮基而生成α酮酸的酶与下述通式(iii)所示的链状的α,ω-二氨基酸反应,生成下述通式(i)所示的在1位具有双键的环状氨基酸,然后利用权利要求1或2所述的方法使所得到的
在1位具有双键的环状氨基酸生成下述通式(ii)所示的l型环状氨基酸,式中,a表示链长为1~4原子、可在链中或末端包含选自由硫原子、氧原子和氮原子组成的组中的至少一种杂原子、且可具有取代基的亚烷基链,式中,a与上述含义相同,式中,a与上述含义相同。4.根据权利要求3所述的l型环状氨基酸的制造方法,其中,能够将二氨基酸的α位的氨基转换为酮基而生成α酮酸的酶为选自由d-氨基酸氧化酶、l-氨基酸氧化酶、d-氨基酸脱氢酶、l-氨基酸脱氢酶、d-氨基酸转移酶和l-氨基酸转移酶组成的组中的一种以上的酶。5.根据权利要求1~4中任一项所述的l型环状氨基酸的制造方法,其中,所述通式(i)所示的在1位具有双键的环状氨基酸为δ
1-哌啶-2-甲酸,所述通式(ii)所示的l型环状氨基酸为l-哌可酸。6.一种多肽,其为:(a)具有序列号4、6、8、10或12所示的氨基酸序列的多肽;(b)为在序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列中缺失、置换和/或添加1个~两个以上氨基酸而成的氨基酸序列、且催化下述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽,式(1):式中,a表示链长为1~4原子、可在链中或末端包含选自由硫原子、氧原子和氮原子组成的组中的至少一种杂原子、且可具有取代基的亚烷基链;或者(c)具有与序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列具有90%以上的序列一致性的氨基酸序列、且催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽。7.一种核酸,其编码权利要求6所述的多肽。8.根据权利要求7所述的核酸,其中,核酸来自植物。9.根据权利要求8所述的核酸,其中,植物为桑或海滨山黧豆。
10.根据权利要求7~9中任一项所述的核酸,其中,所述核酸为以下的(d)、(e)或(f)所示的核酸:(d)包含序列号3、5、7、9或11所示的碱基序列的核酸;(e)为在序列号1、3、5、7、9或11所示的碱基序列中置换、缺失和/或添加1个或两个以上碱基而成的碱基序列、且编码催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽的核酸;或者(f)为与序列号1、3、5、7、9或11所示的碱基序列的互补链在严格条件下进行杂交的碱基序列、且编码催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽的核酸。11.一种重组载体,其包含权利要求7~10中任一项所述的核酸。12.一种转化体,其包含权利要求11所述的重组载体。13.一种酶制剂组合物,其包含:以下的(a)、(b)或(c)所示的多肽、具有生产所述多肽的能力或包含所述多肽的微生物或细胞、所述微生物或细胞的处理物和/或对所述微生物或细胞进行培养而得到的包含所述多肽的培养液,具有由下述通式(i)所示的在1位具有双键的环状氨基酸生成下述通式(ii)所示的l型环状氨基酸的能力,式中,a表示链长为1~4原子、可在链中或末端包含选自由硫原子、氧原子和氮原子组成的组中的至少一种杂原子、且可具有取代基的亚烷基链,式中,a与上述含义相同,(a)具有序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列的多肽;(b)为在序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列中缺失、置换和/或添加1个~两个以上氨基酸而成的氨基酸序列、且催化下述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽,式(1):式中,a与上述含义相同;或者(c)具有与序列号2、4、6、8、10或12所示的氨基酸序列具有90%以上的序列一致性的氨基酸序列、且催化所述式(1)所示的反应的具有l型环状氨基酸生成能力的多肽。

技术总结
本发明的课题在于提供由在1位具有双键的环状氨基酸更廉价、高效率且工业化地制造高纯度的L型环状氨基酸的方法,通过使具有将在1位具有双键的环状氨基酸还原而生成L型环状氨基酸的催化性能的特定酶作用于在1位具有双键的环状氨基酸从而制造L型环状氨基酸,由此解决了课题。了课题。


技术研发人员:水谷正治 三宅良磨 川端润
受保护的技术使用者:株式会社API
技术研发日:2020.05.15
技术公布日:2022/1/18
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